小麦抗茎基腐病评价技术规范DB41-T 2392-2023

ICS65.020.20

CCSB30

41

河南省地方标准

DB41/T2392—2023

小麦抗茎基腐病评价技术规范

2023-03-07发布2023-06-06实施

河南省市场监督管理局发布

DB41/T2392—2023

目次

前言.................................................................................II

1范围...............................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4病原物接种体.......................................................................2

5鉴定方法...........................................................................2

6病害调查...........................................................................2

7抗性评价...........................................................................3

附录A（资料性）小麦茎基腐病病原物的分离和鉴定.......................................5

I

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由河南省农业农村厅提出并归口。

本文件起草单位：河南省农业科学院植物保护研究所，河南省植物保护检疫站。

本文件主要起草人：徐飞、张国彦、宋玉立、杨共强、冯超红、王俊美、张少伟、白磊、金建猛、

李世民、林艳丽、石丽芬、刘娟娟、石瑞杰、韩自行。

II

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小麦抗茎基腐病评价技术规范

1范围

本文件规定了小麦茎基腐病接种体制备、接种方法、病害调查及抗性评价的技术规范。

本文件适用于普通小麦、野生小麦和小麦近缘种等。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

小麦茎基腐病

主要由假禾谷镰孢（Fusariumpseudograminearum）、禾谷镰孢（F.graminearum）和黄色镰孢（F.

culmorum）引起（我国黄淮海麦区优势病原菌为假禾谷镰孢）。病菌侵染后，苗期发病叶鞘变褐，分蘖

减少，植株矮弱，成株期发病茎基部1～3节变褐，严重时形成枯白穗。

3.2

接种体

通过人工培养能够侵染寄主植物引起病害的病原培养物。

3.3

病情指数

衡量发病率与严重度的综合指标。计算公式（1）：

nn

..................（1）

DI(XiSi)/(XiSmax)100

i0i0

式中：

DI——病情指数；

i——病级数（0～n）；

Xi——i级的单元数；

Si——i级严重度的代表值；

Smax——严重度的最高级值。

3.4

相对病情指数

鉴定品种与对照品种病情指数的比值。计算公式（2）：

RDI=DIiv/DIcv..........................（2）

式中：

RDI——相对病情指数；

1

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DIcv——对照品种（Controlvarieties）的病情指数；

DIiv——鉴定品种（Identificationvarieties）的病情指数。

4病原物接种体

4.1病原物的获取

组织分离得到的病原物，经形态学和分子生物学鉴定为假禾谷镰孢，进行致病力测定后选择强致病

力菌株。也可选择保存于中国普通微生物菌种保藏管理中心的假禾谷镰孢强致病力标准菌株14LY24-2

或WZ-8A（保藏编号分别为CGMCC3.20319和ACCC38068）作为接种体培养的病原菌。

4.2分生孢子悬浮液的制备

将接种菌株活化后，在PDA培养基平板上25℃培养7d，用直径为0.5cm打孔器把菌块均匀打碎后，

挑入4%绿豆汤培养基中，密封，转入在25℃振荡培养72h后，过滤掉残渣，吸取菌液到血球计数板上，

测定分生孢子悬浮液浓度，然后将浓度调节成每毫升1×106个孢子的悬浮菌液。

4.3谷粒接种体的制备

将麦粒或粟粒浸泡12h后，装入到三角瓶或聚乙烯塑料袋中，放入灭菌锅121℃灭菌60min，放置

2d后，再次灭菌30min，冷却后使用。将PDA平板上25℃条件下培养3d菌丝块均匀接入谷粒上。1周后，

在超净工作台中混合均匀，2个星期后待菌丝布满整个谷粒时，在通风背光处晾干备用。

5鉴定方法

5.1苗期鉴定

苗期鉴定可采用滴注法或菌土法。滴注法：将直径为7cm的塑料营养钵装入灭菌土（沙子：蛭石：

大田土=1:1:1均匀混合并121℃灭菌1h），浇水备用。将小麦种子催芽露白后种于营养钵中，

覆盖1cm灭菌土，每个品种4钵，每钵10粒。出苗约10d后，使用移液器吸取10μL浓度为每毫升1×106

个的孢子悬浮液，在距离土壤表面约0.5cm的幼苗茎基部滴上菌液。菌土法：将粟粒接种体和灭菌土按

0.5%的比例混合制成菌土，待播种后覆盖2cm菌土。接种后将幼苗放置在温度为25℃、湿度90%培养箱

中，黑暗培养48h后，再转入温度25℃、光照12h、湿度90%人工气候箱或温室中正常管理。

5.2田间鉴定

鉴定圃应设置在人工营造的病圃或病害常发田，具备利于发病的环境条件，地势平坦和地力均匀的

地块。鉴定圃不施用任何杀菌剂。病圃内每个品种6行，行长1.5m～2.0m，行距0.20m～0.25m。每20

个品种种植一组高感对照品种。重复3次。接种方法：播种后覆2cm的土，撒上谷粒接种体（种子与谷

粒接种体质量比1:1方式接种），最后覆土（约1cm）压实。

6病害调查

6.1苗期调查方法

接菌30d～35d后将麦苗轻轻拔出，冲洗干净，调查病级（表1），计算病情指数。

2

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表1小麦茎基腐病苗期严重度分级及症状描述

严重度分级症状

0植株无病变

1植株胚芽鞘或第1叶鞘明显褐变

3植株第1叶鞘褐变且第1叶鞘下的根冠部分褐变

5植株第2叶鞘有明显褐变且第2叶鞘下的根冠完全褐变

7植株第3叶鞘有明显褐变且第3叶鞘下的根冠完全褐变

9整株枯死

6.2成株期调查方法

在小麦乳熟至蜡熟期充分发病后进行调查。每个重复5点取样，每点查20茎，剥去叶鞘调查记载病

级（表2），计算病情指数和相对病情指数。

表2小麦茎基腐病成株期严重度分级及症状描述

严重度分级症状

0茎基部无病变

1茎基部褐变至第1节

2茎基部褐变至第2节

3茎基部褐变至第3节

4茎基部褐变至第3节以上但未形成枯白穗

5枯白穗或因病未抽穗

7抗性评价

7.1鉴定有效性的判断

当高感对照品种达到相应的感病程度：苗期病情指数>45，成株期病情指数>30，该批次鉴定视为

有效。建议使用‘矮抗58’或‘国麦301’为高感对照品种。

7.2抗性评价标准

7.2.1苗期抗性鉴定标准

小麦茎基腐病苗期抗病类型划分为5个级别（表3）。

表3小麦苗期茎基腐病抗性评价标准

病情指数抗性评价

DI=0免疫Immune(I)

0＜DI≤25高抗HighlyResistant(HR)

3

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表3小麦苗期茎基腐病抗性评价标准（续）

病情指数抗性评价

25＜DI≤35中抗Moderatelyresistant(MR)

35＜DI≤45中感ModeratelySusceptible(MS)

DI＞45高感Highlysusceptible(HS)

7.2.2成株期抗性鉴定标准

依据相对病情指数确定其对茎基腐病的抗性水平，评价标准见表4。

表4小麦成株期茎基腐病抗性评价标准

相对病情指数抗性评价

RDI=0免疫Immune(I)

0＜RDI≤0.20高抗HighlyResistant(HR)

0.20＜RDI≤0.50中抗Moderatelyresistant(MR)

0.50＜RDI＜0.80中感ModeratelySusceptible(MS)

RDI≥0.80高感Highlysusceptible(HS)

7.3抗性评价

根据两年抗性鉴定结果，以最高相对病情指数为准。

A

4

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附录A

（资料性）

小麦茎基腐病病原物的分离和鉴定

从田间采集发病小麦植株样品，将其发病茎段剪下，无菌条件下，依次用70%乙醇处理10s，3%NaClO

溶液消毒1min，无菌水冲洗3次，灭菌滤纸片吸干水分；最后将病组织置于含有抗生素（150μg/mL

硫酸链霉素和75μg/mL氨苄青霉素）的马铃薯葡萄糖培养基（PDA）上，于25℃培养箱中培养2d～

3d，待病组织周围长出菌丝，挑取至新的PDA上生长。每个病茎分离1个菌株。连续3次挑取边缘菌丝进

行纯化。

形态学鉴定：将纯化菌株转入康乃馨叶片培养基中进行诱导产孢。测定分生孢子形态和大小。无性

态为假禾谷镰孢FusariumpseudograminearumO’DonnellandT.Aoki，属半知菌类镰孢属（Fusarium）。

其大型分生孢子镰刀形，有隔膜3～7个，顶端钝圆，基部足细胞明显，单个孢子无色，聚集在一起呈粉

红色黏稠状，大小为（29.5～49.2）μm×（3.0～4.9）μm，平均大小为40.3μm×4.1μm。有性态

为Gibberellacoronicola，属子囊菌门（Ascomycotina）、核菌纲（Pyrenomycetes）、肉座菌目

（Hypocreales）、肉座菌科（Hypocreaceae），赤霉属（Gibberella）。子囊壳散生或聚生于寄主组

织表面，略包于子座中，梨形，有孔口，顶部呈疣状突起，黑褐色或墨绿色或紫色，直径大小为（286.5～

360.7）μm×（204.95～341.5）μm，平均大小为320.0μm×281.3μm；子囊大小为（74.2～96.7）

μm×（7.1～11.8）μm，平均大小为86.2μm×8.9μm；子囊孢子镰刀状，3个分隔，大小为（24.1～

32.4）μm×（4.1～7.1）μm，平均大小为27.1μm×5.6μm。

分子生物学鉴定：收集菌丝并提取DNA，然后用假禾谷镰孢特异性引物

（Fp1-1:5'-CGGGGTAGTTTCACATTTC(C/T)G-3'，Fpl-2:5'-GAGAATGTGATGA(C/G)GACAATA-3'）进行扩增，

条带大小为523bp～526bp;或用EF-1α（EF1:5'-ATGGGTAAGGA(A/G)GACAAGAC-3'，EF2:

5'-GGA(G/A)GTACCAGT(G/C)ATCATGTT-3'）扩增测序，序列比对参照GenBank登录号:AF212468(假禾谷

镰孢菌株NRRL28062)。

5

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河南省地方标准

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小麦抗茎基腐病评价技术规范

2023-03-07发布2023-06-06实施

河南省市场监督管理局发布

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目次

前言.................................................................................II

1范围...............................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4病原物接种体.......................................................................2

5鉴定方法...........................................................................2

6病害调查...........................................................................2

7抗性评价...........................................................................3

附录A（资料性）小麦茎基腐病病原物的分离和鉴定.......................................5

I

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由河南省农业农村厅提出并归口。

本文件起草单位：河南省农业科学院植物保护研究所，河南省植物保护检疫站。

本文件主要起草人：徐飞、张国彦、宋玉立、杨共强、冯超红、王俊美、张少伟、白磊、金建猛、

李世民、林艳丽、石丽芬、刘娟娟、石瑞杰、韩自行。

II