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DB11北京市市场监督管理局发布 验动物寄生虫检测与评价第5部分:实验用长爪沙鼠》,除结构调整和编辑性改本文件起草单位:中国农业大学、中国食品药品检定研究院、国家卫生健康委科学中国科学院水生生物研究所、中国动物疫病预防控制中心、首都医科大学、浙江省医学科学医学科学院医学实验动物研究所、北京康蓝生物技术有限公司、北京市实验动物管理办公室验动物行业协会、北京市标准化研究院、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、北京华阜康生王锡乐、刘文菊、齐静、刘云波、魏强、向志光、刘先菊、黄澜、李长龙、付瑞、岳秉飞、萨晓婴、实验动物寄生虫检测本文件规定了实验动物的寄生虫学等级分类、检测要求本文件适用于实验小型猪、实验猪、实验牛、实验羊、实验猫、实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽、实验下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修不携带所规定的人兽共患病病原、动物烈性传染病病原和对科学实验有重大干普通级实验动物中未免疫特定的疫苗,且经检测不携带实验要求排除的特定病原微生物除普通级实验动物应排除的病原外,不携带主要潜在感染根据对微生物和寄生虫控制的程度,实验动物分为普通级实验动物、无特定病原体级对待检实验动物的精神状态、行为、被毛、天然孔分泌物进行外观普通级●●●●无特定病原体●●●●●●●●●●●普通级●●●●●●无特定病原体级●●●●●●●●●●●○●●●○●●●○●●普通级●●无特定病原体级●●●●●●●普通级●●无特定病原体级●●●●●●●●普通级●●无特定病原体级●●●●●●普通级●●●无特定病原体级●●●●●●●●●表7实验鸡、实验鸭、实验鹅和实验鸽各●●●●普通级无特定病原体级●●●●●●●●●●●●●○●○●○○○●●○○●○○○●●●●○○●○○○○●●●●●普通级●●●●无特定病原体级●●●●●●●●●●●●●●物的耐受剂量,可采用吸入性麻醉或注射麻醉,麻醉过程中应随时注意实验动物的反应。6.1.3釆血方法以及毛发、羽毛或皮屑、新鲜粪便的采样方法参照NY/T541进行。>500样品和送检单一同送达具备检测能力的实验室,送检单应写明检品名称、品系、等级、血清样品经间接血凝实验(IndirectHemagglutinationAssay,IHA)、酶联免疫吸附测定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,ELISA)或间接免疫荧光(Indirect固定液,乙醇,二甲苯,苏木素,盐酸,伊红,中性树脂,石蜡,姬姆萨染液,动物组织从精神状态、行为、被毛和天然孔分泌物对实验鸡剖检实验鸡,进行病理学大体观察。观察肝脏是否肿大,表面是否有黄褐色坏死灶——取剖检的实验鸡盲肠,除去内容物后取盲肠粘膜表面的刮取物于载玻片上,盐水稀释,显微镜下观察是否有活动的组织滴虫——取剖检的实验鸡的肝组织涂片进行姬氏染色,显微镜下观察是否有组织滴虫虫体存——取剖检的实验鸡的肝脏和盲肠组织制作组织切片并进行H.E.染色,显微镜下观察是否有组织CTCGTCGGCATAGTTTAAGGTAGG-3’)进行PCR检测,扩增产物进行凝胶电泳并测序分若有火鸡组织滴虫感染,典型病理变化为肝脏肿大,呈深紫褐色,表面有大小不一灶,坏死灶中央稍有下陷,有的坏死灶周围有出血带;盲肠外观明显肿大,触之坚硬,细不均,肠腔内有干酪样物充塞,可怀疑为阳性,需通过下列任意一种——若有火鸡组织滴虫感染,盲肠粘膜刮取物或肝脏抹片在显微镜油镜下可见单个或成簇成直径0.8cm~1cm大小圆形厚血膜。在同一玻片的另一区域,取约1μL~1.5μL的血量,使血滴与平置的载玻片接触,并形成25°~35°夹角,待血液向两侧扩展约2cm~2.5cm宽时,均在镜下看到占据红细胞的细胞核以外空间的虫体,后者依据其发育阶段不同呈现不同的D.1.1.1将待检鱼麻醉后放在解剖盘加一滴清水或生理盐水,用镊子将组织分散,加上盖玻片,在然后将鳃小片逐片剪开,在体视显微镜下用两根解剖针,把鳃丝逐条分开,仔细检查,将每片鳃片的鳃上所有内含物完全刮下,放在培养皿里,用清水稀释、搅匀后,在解剖D.2.2眼球:采用水浸法,即将鱼体的眼球取下,放在盛有生理盐水的培养皿中,待寄生虫游离D.2.3体腔、脏器、生殖腺和鳔:首先采用肉眼观察,看组织表面有没有肉眼可见的白色包囊和寄生虫;然后将体腔用生理盐水冲洗,并盛在培养皿中,其他组织用生理盐D.2.4肠道:先用肉眼检查,看肠外壁有无白点,这些白点通常是微孢子虫或粘孢子虫的孢囊。肠道内的寄生虫检测采用压片法,先把肠外壁上的脂肪组织尽量除干净,否则脂肪会混
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