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文档简介
PAGE6-微生物的试验室培育(30分钟100分)一、选择题(共5小题,每小题7分,共35分)1.在制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的过程中加入琼脂这一志向的凝固剂,下列关于琼脂的说法错误的是 ()A.不被所培育的微生物分解利用,对所培育的微生物无毒害作用B.在微生物生长温度范围内保持固体状态C.琼脂凝固点低,利于微生物的生长D.琼脂在灭菌过程中不会被破坏,透亮度好,凝固力强【解析】选C。琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用,在灭菌过程中不会被破坏,透亮度好,凝固力强,A、D正确。琼脂在水中加热至95℃时起先熔化,温度降至40℃时才起先凝固,微生物生长最相宜的温度范围一般为16~30℃,所以在微生物生长温度范围内保持固体状态,B正确。琼脂的凝固点相对于微生物生长的温度较高,凝固剂的凝固点不能太低,否则不利于微生物的生长,C错误。2.防止杂菌入侵获得纯净的培育物,是探讨和应用微生物的前提。下列叙述错误的是 ()A.试验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B.接种环、接种针等金属用具,干脆在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C.在试验室中,切不行吃东西、喝水,离开试验室时肯定要洗手,以防止被微生物感染D.运用后的培育基丢弃前肯定要进行灭菌处理,以免污染环境【解析】选B。对接种环等金属用具进行灼烧灭菌,应在酒精灯火焰的充分燃烧层,即外焰处灼烧。3.巴氏消毒法常用于酒、奶等食品的消毒,该消毒法就是加热到70~75℃、保持30min,或加热到80℃、保持15min,能杀死一般杂菌和病原菌。与灭菌的要求相比,巴氏消毒法 ()A.不能杀灭芽孢和耐高温的细菌B.能杀灭芽孢等休眠状态的细菌C.能杀灭各种细菌,包括芽孢D.能杀灭各种真菌,包括孢子【解析】选A。由于酒、奶等食品中的某些成分在高温下易被破坏,不宜实行高温灭菌法,虽然巴氏消毒法不能杀灭芽孢和耐高温细菌,但由于奶、酒等的污染并不严峻,巴氏消毒法还是能达到消毒要求的。4.在细菌的连续培育过程中,要以肯定速度不断添加新的培育基,同时以同样速度放出老的培育基。如图表示培育基的稀释率(培育基的更新速率)与培育容器中养分物质浓度、细菌代时(细菌数目增加一倍所需的时间)、细菌密度的关系。下列相关叙述不正确的是 ()A.在稀释率很低的状况下,稀释率的增加会导致细菌密度增加B.稀释率从A到B的改变过程中,细菌生长速率不断提高C.稀释率超过B点后,养分物质浓度过高导致细菌死亡率增大,细菌密度降低D.为持续高效地获得发酵产品,应将稀释率限制在B点旁边【解析】选C。稀释率超过B点,细菌密度降低,并不是由于养分物质浓度过高而使细菌死亡,养分物质浓度增加不会造成细菌死亡。图中细菌密度削减是由于稀释率过高,细菌数目削减的速率过大,无法通过繁殖速率的提高来补充造成的。5.在斜面培育基上接种时,其正确的操作依次是 ()①用左手大拇指、食指和无名指夹住菌种试管和待接种的斜面试管,管口并齐,使斜面对上保持水平状态。②右手拧松棉塞,但不取下。③在火焰边用右手无名指和小指夹住两个棉塞,将它们取下,同时左腕转动,灼烧管口一周。④将接种环伸入管内,让环先接触培育基上未长菌的部位,使环冷却,然后轻轻挑取少量菌体,马上将接种环抽出。⑤右手拿接种环,在火焰上灼烧灭菌。⑥在火焰旁快速将沾有菌体的接种环伸到斜面培育基的底部,由里向外轻轻画蛇形细线。⑦抽出接种环,再用火焰灼烧管口,并在火焰上方将棉塞塞上。A.①②③④⑤⑥⑦B.①②⑤③④⑥⑦C.①③②④⑤⑥⑦D.②③①④⑤⑦⑥【解析】选B。在斜面培育基上接种时,其正确的操作依次是:①用左手大拇指、食指和无名指夹住菌种试管和待接种的斜面试管,管口并齐,使斜面对上保持水平状态;②右手拧松棉塞,但不取下;⑤右手拿接种环,在火焰上灼烧灭菌;③在火焰边用右手无名指和小指夹两个棉塞,将它们取下,同时左腕转动,灼烧管口一周;④将接种环伸入管内,让环先接触培育基上未长菌的部位,使环冷却,然后轻轻挑取少量菌体,马上将接种环抽出;⑥在火焰旁快速将沾有菌体的接种环伸到培育基的底部,由里向外轻轻画蛇形曲线;⑦抽出接种环,再用火焰灼烧管口,并在火焰上方将棉塞塞上。故选B。二、非选择题(共4小题,共65分)6.(17分)(2024·全国卷Ⅲ)回答下列与细菌培育相关的问题。(1)在细菌培育时,培育基中能同时供应碳源、氮源的成分是______________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培育基时要依据所培育细菌的不同来调整培育基的pH,其缘由是______________________________________。硝化细菌在没有碳源的培育基上______________(填“能够”或“不能”)生长,缘由是__
__________________________________________________。
(2)用平板培育细菌时一般须要将平板____________(填“倒置”或“正置”)。
(3)单个细菌在平板上会形成菌落,探讨人员通常可依据菌落的形态、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,缘由是________________________________________________。
(4)有些运用后的培育基在丢弃前须要经过______________处理,这种处理可以杀死丢弃物中全部的微生物。
【解析】(1)蛋白胨含有C、H、O、N等元素,葡萄糖只含有C、H、O,NaNO3不含有C,所以培育基中蛋白胨能同时供应碳源和氮源。不同细菌生长繁殖所须要的pH不同,因此培育不同的细菌,须要调整培育基的不同pH。硝化细菌属于化能自养型细菌,可以将空气中的二氧化碳等无机物合成为有机物,它可以在没有碳源的培育基上生长。(2)用平板培育基培育细菌时,一般须要将平板倒置,以防止培育皿盖上凝聚的水珠滴落,导致污染。(3)不同种的微生物在肯定条件下培育,可在培育基上形成大小、颜色、形态等不同的菌落,这是一种比较稳定的特征,可依据菌落的特征区分不同种的微生物。(4)运用后的培育基须要用剧烈的物理或化学手段进行灭菌,以杀灭其中全部的微生物,避开污染环境。答案:(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源(2)倒置(3)在肯定的培育条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌7.(15分)(2024·全国卷Ⅲ)回答下列与酵母菌有关的问题:(1)分别培育酵母菌通常运用__________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培育基,该培育基应采纳____________灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培育一段时间后可视察到菌落,菌落的含义是______________。
(2)酵母菌液体培育时,若通入氧气,可促进________(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培育,可促进________(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。
(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的缘由是____________________________________。
【解析】(1)麦芽汁琼脂培育基含糖量高,更适合酵母菌培育;该培育基应采纳高压蒸汽灭菌法灭菌;若将酵母菌划线接种在平板上,培育一段时间后可视察到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。(2)酵母菌液体培育时,若通入氧气,进行有氧呼吸产生H2O和CO2,释放能量多,菌体增殖快;若进行厌氧培育,进行无氧呼吸,产生乙醇和CO2,释放能量少,菌体增殖慢。(3)制作面包时,在面粉中添加肯定量的酵母菌,因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖,产生CO2,CO2是气体,遇热膨胀而形成小孔,使得面包松软多孔。答案:(1)麦芽汁琼脂高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(2)菌体快速增殖乙醇产生(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软8.(19分)微生物的分别和培育是现代生物工程应用中的重要环节。如图甲、乙、丙是大肠杆菌分别和培育过程中部分操作和试验结果示意图,请据图回答有关问题:(1)图甲所示的是制备固体培育基时的试验操作步骤之一,它称为________,若用该培育基培育大肠杆菌,除考虑养分条件外,还要考虑________、________和渗透压等条件。
(2)培育大肠杆菌时,在接种前须要检测培育基是否被污染。对于固体培育基应采纳的检测方法是______________________________________。
(3)图乙是平板划线法接种操作示意图,正确的操作依次是A→B→__________________(用字母和箭头表示);找出图乙中两处错误的操作(用字母表示):________、________。
(4)图丙是某同学用平板划线法接种后的培育基培育12h后的试验结果,假如培育基上
__________________________,
则说明无菌操作基本符合要求。【解析】(1)图甲所示操作为倒平板,须要在酒精灯火焰旁进行操作。培育基中除养分成格外,还应考虑pH、氧气、无菌、温度、渗透压等条件。(2)检测培育基是否被污染的方法是将未接种的培育基在相宜的温度下放置相宜的时间,视察培育基上是否有菌落产生,如有菌落,说明该培育基已被污染。(3)平板划线法的操作依次为灼烧接种环,冷却,挑取菌种,划线,灼烧接种环,划线,灼烧接种环,平板倒置培育,即A→B→G→F→E→C→D→H。图乙中C操作应在酒精灯旁边进行,D中划线的首尾不应当相接。(4)同一菌种的菌落颜色、形态、大小基本一样,如有杂菌污染,会有异样菌落出现,可依据菌落的特征确定该菌落是否为大肠杆菌。答案:(1)倒平板温度(氧气)pH(无菌)(2)将未接种的培育基在相宜的温度下放置相宜的时间,视察培育基上是否有菌落产生(3)G→F→E→C→D→HCD(4)生长的菌落颜色、形态、大小基本一样,并符合大肠杆菌菌落的特点9.(14分)某学校准备开拓一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌试验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题。(1)牛肉膏蛋白胨固体培育基的配方如下:牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂蒸馏水5.0g10.0g5.0g20.0g定容至1000mL其中供应氮源的是________________,供应碳源的主要物质是____________。
(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培育基时各成分要有合适的____________。在烧杯中加入琼脂后要不停地____________,防止______________________________________。
(3)将配制好的培育基分装到试管中,加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧后放入____________中灭菌,压力为100kPa,温度为____________,时间为____________。灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然降到0时,将试管取出。假如棉塞上沾有培育基,此试管应____________________________。
(4)运用高压蒸汽灭菌锅时应留意,要先向锅内倒入__________________,并加热煮沸,将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。
(5)从一支试管向另一支试管接种时应留意,接种环要在酒精灯____________(填“内”或“外”)焰灭菌,并且待接种环______________后沾取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰旁边。将接种的试管在适温下培育,长成菌落后放入____℃冰箱中保藏。
【解析】(1)牛肉膏和蛋白胨均为自然成分,均能供应碳源和氮源,但是供应碳源的主要物质是牛肉膏。(2)微生物的培育基的成分应依据微生物的须要,并有合适的比例。在烧杯中加入琼脂后易出现糊底现象,应不断用玻棒搅拌。(3)培育基应在高压蒸汽灭菌锅内灭菌,压力为100kPa,温度为121℃,时间为15~30min。假如棉塞上沾有培育基,则很简单造成杂
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