医学教案α-地中海贫血(-SEA型)检测试剂盒 生产工艺规程

题目：α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒生产工艺规程文件编号：FSD-WI-QT-013版本号：A/0页数：2/19题目：α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒生产工艺规程文件编号：FSD-WI-QT-013版本号：A/0页数：1/18编制人：编制日期：年月日颁发部门：生产部审核人：审核日期：年月日批准人：批准日期：年月日生效日期：2014年06月01日分发部门：生产部、品保部分发号：目的:建立α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒生产工艺规程，对整体生产流程进行规范。范围:苏州发士达生物科技有限公司α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒生产作业过程。职责:操作人对作业过程操作规范性及记录的及时性和完整性负直接责任。复核人对相关作业过程规范性及记录的及时性和完整性负间接责任。工序负责人及生产部经理对本规程相关文件的执行负管理责任。术语和定义：α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒：指苏州发士达生物科技有限公司生产的α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒（实时荧光PCR法）产品（存货编号：130225）。Taq酶液：指将直接从供货商采购的Taq酶经过稀释后的酶液（物料编号：A011）。大包装PCR反应液：指PCR反应液已完成所有原料的加入和混合操作，但未进行分装操作时的半成品状态（中间体编号：M001）。大包装细胞裂解液I：指已完成所有原料的加入和混合操作，但未进行分装操作时的半成品状态（中间体编号：M002）。大包装细胞裂解液II：指已完成所有原料的加入和混合操作，但未进行分装操作时的半成品状态（中间体编号：M003）。大包装饱和NaCl：指已完成所有原料的加入和混合操作，但未进行分装操作时的半成品状态（中间体编号：M004）。阴性对照：指不含α-地中海贫血（--SEA型）的TE缓冲液（pH8.0）（物料编号：A016）。大包装阴性对照：指已按要求完成对TE缓冲液（pH8.0）稀释操作，但未进行分装操作时的半成品状态（中间体编号：M005）。阳性对照：指合成的α-地中海贫血（--SEA型）片段的克隆质粒（物料编号：A017）。大包装阳性对照：指已按要求完成质粒提取和稀释的α-地中海贫血（--SEA型）片段的克隆质粒，但未进行分装操作时的半成品状态（中间体编号：M006）。分装后半成品：指大包装半成品按照相关规范进行分装及贴签操作后的半成品状态。冷冻：如无特殊说明，应指低于0℃温度条件。冷藏：指2℃～8℃温度条件。室温：指生产区室内温度条件（在20℃±5℃范围内）。第一部分：试剂盒组成说明试剂盒名称：通用名称：α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒（实时荧光PCR法）商品名称：α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒内部名称：α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒存货规格:存货编号货号规格试剂盒说明130225FSD-GD00148T/盒配DNA提取相关试剂试剂盒预期用途：地中海贫血(thalassemia)简称“地贫”，是由于α或β珠蛋白基因缺失或突变导致珠蛋白链合成障碍，造成α链与β链的比例失去平衡，相对过剩的链呈游离状态而容易氧化变性。变性的链沉积在红细胞内，附于内膜上，使红细胞变形能力降低，膜通透性发生改变而容易被破坏导致溶血性贫血。呈现出血红蛋白减少，红细胞形态异常，小细胞低色素的血液学表现。根据合成障碍的链不同，将地贫主要分为α地贫和β地贫。α地贫是最主要的地贫类型之一，编码α珠蛋白链的基因是位于16号染色体短臂末端(16pl3.3——Pter)的α珠蛋白基因簇的成员之一。正常人每条染色体上均有2个α珠蛋白基因(α2基因和αl基因)，因此，二倍体细胞中总共有4个a基因，如果一条16号染色体上缺失一个α基因者，称α+地贫(基因型写作-α/αα)，2个α基因均缺失者，称为α0地贫(基因型写作--/αα)。我国南方最常见的地贫基因缺失类型为东南亚型(--SEA型)、-α3.7及-α4.2。目前地贫主要的检测方法为gap-PCR法和膜杂交法，但存在操作复杂、假阳性高等缺点。本试剂盒利用实时荧光PCR原理，用于定性筛查检测α-地中海贫血（--SEA型）。检验原理：本试剂盒针对α珠蛋白基因的α-地中海贫血（--SEA型）设计特异性引物和探针，在样本出现α-地中海贫血（--SEA型）的情况下，PCR反应得以进行并释放荧光信号，反之则没有扩增信号。利用仪器对PCR过程中相应通道的信号强度进行实时监测和输出，实现检测结果的定性分析。试剂盒组成：试剂盒组成及标签打印内容：组分名称分装量试剂盒内数量包装及存货编号说明标签打印品名细胞裂解液I28ml/管1瓶30ml棕色平口瓶（配白色盖）存货编号：HC005细胞裂解液I细胞裂解液II8ml/管1瓶20ml棕色平口瓶（配白色盖）存货编号：HC006细胞裂解液II饱和NaCl8ml/管1瓶20ml棕色平口瓶（配白色盖）存货编号：HC006饱和NaCl地贫PCR反应液1ml/管1管1.5ml冷藏冻存管(配红色盖)存货编号：HC001地贫PCR反应液Taq酶液30ul/管1管0.5ml冷藏冻存管(配蓝色盖)存货编号：HC002Taq酶液地贫阳性对照40ul/管1管0.5ml冷藏冻存管(配橙色盖)存货编号：HC003地贫阳性对照阴性对照40ul/管1管0.5ml冷藏冻存管(配黄色盖)存货编号：HC004阴性对照说明书1说明书版本：FSD-PCR-001-1包装内衬1包装内衬存货编号：HC008试剂盒外包装盒1试剂盒包装存货编号：HC009合格签1合格签存货编号：HC010PCR反应管8管×6条八连排管（配无色平盖）存货编号：HC011管，HC012盖试剂盒外标签打印内容：αα-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒实时荧光PCR法48人份/盒储存条件：-20℃以下试剂盒使用方法：10.1试剂准备：（试剂准备区）(1)从-20℃以下冰箱中取出试剂盒(2)从试剂盒中取出实验所需试剂。为避免试剂加样过程中意外喷溅等情况造成实验区域污染，单一试剂在使用前应振荡混匀并于2000rpm离心10秒。(3)核算当次实验所需要的反应数（n），并根据表1反应体系配制方法计算当次实验所需要的各种试剂量。n=阴性对照数（1T）+阳性对照数（1T）+误差预留量（1T）+样本数表1：反应体系配制方法单反应体系配方地贫PCR反应液19.5μlTaq酶液0.5μl(4)在适当容积的无菌离心管中加入上述试剂，充分振荡混匀后2000rpm离心10秒。按照20μl/管分装量将试剂分装至PCR反应管中。(5)盖紧PCR反应管盖后将PCR反应管转移至样本准备区。剩余试剂放回-20℃以下冰箱冷冻保存。注：1)实验前20分钟从冰箱中取出试剂盒相应试剂，以平衡至室温（20～25℃）；饱和NaCl则需提前半小时拿出置于37℃水浴至析出物完全溶解。2)为保证实验正常进行，建议在进行反应量计算时考虑试剂混合及分装过程中的误差和浪费。即在配制反应液的时候加多1人份作为预留量。3)为保证试剂不受标本污染，建议将DNA提取液与试剂盒统一保存于试剂准备区。在进行试剂准备的时候根据标本量吸取适量DNA提取液转移到样本准备区后进行DNA提取操作。标本准备：（样本准备区）(1)DNA提取：a.取试剂准备区传递过来的细胞裂解液I、细胞裂解液II和饱和NaCl室温平衡备用。b.取250μl抗凝全血，加入500μl细胞裂解液I，混匀，4000rpm离心5分钟，然后重新裂解一次。c.加150μl细胞裂解液II，混匀，56℃金属浴孵育15min，加饱和NaCl150μl，混匀，4000rpm离心5分钟，去尽上清。d.加两倍体积的无水乙醇，4000rpm离心5分钟，去尽上清。e.加50μl无菌纯化水溶解DNA，取上清进行PCR检测。(2)加样：a.取出试剂准备区准备好的试剂，2000rpm离心10秒。b.打开PCR反应管盖，每管加入相应样本模板5μl。c.盖好PCR反应管盖，将PCR反应液与样本模板振荡混匀后2000rpm离心10秒。d.记录模板加样顺序。将PCR反应管转移到PCR区进行上机。注：1）标本DNA提取及加样过程中应避免污染。2）提取好的DNA模板如不能立即检测，建议放置冷冻条件下保存，并在2周内检测。10.3PCR：（核酸扩增区）（1）开机检验仪器性能。（2）取样本准备区准备好的PCR反应管，放置在仪器样品槽相应位置。并记录放置顺序。（3）按表2设置仪器核酸扩增相关参数，并开始进行PCR扩增。表2：仪器核酸扩增相关参数体系反应体系设为25μl信号采集FAM通道采集α-地中海贫血（--SEA型）－FAM通道采集荧光信号。PCR反应条件阶段条件循环数预变性95℃：3分钟（min）1PCR95℃：5秒（s）4055℃：60秒（s）（设置在此阶段结束时采集荧光信号）注：为防止荧光干扰，PCR反应管管壁和管盖应避免用手直接接触，并应避免使用任何颜料笔在PCR反应管上进行标记。在使用前应对仪器及配套电源系统进行初步检查，以保证试剂在上机后仪器正常运行。仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行正确设置。PCR反应管在仪器运行完毕后应及时取出，并应按照实验室相关规范进行处理。废弃的PCR反应管应按照实验室相关规定进行处理以防止污染。为避免实验过程意外引入污染，保证PCR实验结果准确性。建议用户依据《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》并结合自身实际情况建立核酸扩增实验室，并在实验过程中严格按照相关规范进行操作。10.4试剂盒有效性判定：（1）阳性对照：Ct值≤25，有明显指数增长期。（2）阴性对照：Ct值＞35或无Ct值，线形为直线或轻微斜线，无明显指数增长期和平台期。10.5标本结果判定：（1）阳性：标本检测结果Ct值≤30，有明显指数增长期。（2）可疑：标本检测结果Ct值在30～35范围。此时应对标本进行重复检测，如重复实验结果Ct值仍在30～35范围，有明显指数增长期，则判定为阳性，否则为阴性。（3）阴性：标本检测结果Ct值＞35或无Ct值。10.6检验结果的解释：通道及检测结果标本检测结果解释FAM阴性（－）标本中未检出α-地中海贫血（--SEA型）阳性（＋）标本中检测出α-地中海贫血（--SEA型）第二部分：生产工艺生产配方表：基础缓冲液：500毫升1MKCl配制：组分物料编号配方表KClA00437.27克灭菌纯化水A003定容至500毫升，121℃高压灭菌20分钟Taq酶液的配制：组分物料编号配方表Taq酶A01510微升灭菌纯化水A00320微升中间体试剂溶液：细胞裂解液I配制：反应液组分物料编号产品配方（1瓶）产品配方（20瓶）灭菌纯化水A00326.35毫升527毫升1MTris-HCl(pH8.0)A008（外购）280微升5.6毫升1MKClA010280微升5.6毫升1MMgCl2A005（外购）280微升5.6毫升0.5MEDTA(pH8.0)A009（外购）112微升2.24毫升TritonX-100A012700微升14毫升合计28毫升560毫升细胞裂解液II配制：反应液组分物料编号产品配方（1瓶）产品配方（20瓶）灭菌纯化水A0037.73毫升154.6毫升1MTris-HCl(pH8.0)A008（外购）80微升1.6毫升1MKClA01080微升1.6毫升1MMgCl2A005（外购）80微升1.6毫升0.5MEDTA(pH8.0)A009（外购）32微升640微升SDSA0130.08克1.6克合计8毫升160毫升PCR反应液：反应液组分物料编号产品配方（48人份/盒）（生产量：20盒）灭菌纯化水A003697.44微升13.95毫升10×buffer(含镁离子)A015Taq酶自带120微升2.40毫升dNTPsA01496微升1.92毫升引物1（50uM）182F9.6微升192微升引物2（50uM）182R9.6微升192微升探针A（50uM）182A3.36微升67.2微升合计936微升18.72毫升Taq酶液：组份名称物料编号分装量（1管）Taq酶液A01130微升/管阳性对照：组分物料编号分装量（1管）TE缓冲液A016合成的α-地中海贫血（--SEA型）片段的克隆质粒DNA终浓度为7.5纳克/微升。α-地贫质粒DNAA017分装量40微升/管阴性对照：组分物料编号分装量（1管）TE缓冲液A01640微升/管饱和NaCl：常温常压下，在1L烧杯中加入500ml灭菌纯化水，然后加入过量NaCl搅拌溶解，直至NaCl不能再溶解为止，取上清即为饱和NaCl，121℃高压灭菌20分钟，然后按8毫升/瓶进行分装。生产工艺流程图：①①质检、验收合格原辅材料纯化水②质检合格生产指令大包装PCR反应液配制基础试剂配制③成品质检入库不合格④④⑥质检合格处理图1生产工艺流程图大包装细胞裂解液I配制④大包装细胞裂解液II配制大包装饱和NaCl配制阴阳性对照配制（万级）④④⑤大包装试剂分装试剂盒组装⑦⑤Taq酶液分装十万级生产区带序号内容为质量控制点，控制点质量控制内容如下：定期检测符合企业内部标准；质检部检验，结果应符合企业内部标准；称量的控制及复核，检测溶液PH值符合质控标准；（关键工序）准确量取所需液体，并需复核，严格控制试剂各组分加入比例及实际加入量并符合作业指导书要求准确量取所需液体进行分装操作，严格控制操作准确度，核对液体名称及标签相符，校准分装量，并进行复核。填写物料平衡表；（关键工序）定人定位流水作业，质监员定时抽查，计算填写物料平衡表。质检部检验，结果应符合企业内部标准；生产操作过程及工艺条件：基础试剂制备：作业地点：十万级洁净车间基础液配制间作业相关设备及器材：电子天平、pH计、单道可调移液器。作业规范：1MKCl溶液依照《1MKCl溶液配制SOP》（FSD-WI-PO-001）进行配制。Taq酶液(A011)的配制，依据《Taq酶液配制SOP》（FSD-WI-PO-002）要求进行。引物探针的溶解依照《引物、探针溶解SOP》（FSD-WI-PO-011）进行配制。大包装半成品配制（关键工序）：作业地点：十万级洁净车间基础液配制间作业相关设备及器材：单道可调移液器、漩涡混匀器、掌上离心机。作业规范：大包装PCR反应液的配制，依据《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒PCR反应液制备SOP》（FSD-WI-PO-003）要求进行。大包装细胞裂解液I的配制，依据《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒细胞裂解液I制备SOP》（FSD-WI-PO-005）要求进行。大包装细胞裂解液II的配制，依据《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒细胞裂解液II制备SOP》（FSD-WI-PO-006）要求进行。大包装1M饱和NaCl的配制，依据《1M饱和NaCl溶液配制SOP》（FSD-WI-PO-007）要求进行。大包装对照品的配制：作业地点：万级阳性对照品生产间作业相关设备及器材：单道可调移液器、漩涡混匀器、掌上离心机、生物安全柜。作业规范：大包装阳性对照(M006)的配制与分装依据《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒阳性对照配制、分装SOP》（FSD-WI-PO-008）要求进行。大包装阴性对照(M005)的分装依据《α-地中海贫血（SEA型）检测试剂盒阴性对照配制、分装SOP》（FSD-WI-PO-009）要求进行。Taq酶液的分装依据《α-地中海贫血（SEA型）检测试剂盒Taq酶液分装SOP》（FSD-WI-PO-012）要求进行。13.4试剂分装13.4.1饱和NaCl的分装依据《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒饱和NaCl的分装SOP》（FSD-WI-PO-014）要求进行。13.4.2细胞裂解液I的分装依据《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒细胞裂解液I》（FSD-WI-PO-015）要求进行。13.4.3细胞裂解液II的分装依据《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒细胞裂解液II》（FSD-WI-PO-016）要求进行。13.4.4大包装PCR反应液的分装，依据《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒PCR反应液分装SOP》（FSD-WI-PO-004）要求进行。13.5试剂盒组装：（关键工序）13.5.1作业地点：普通生产区包装间13.5.2作业相关设备及器材：台式电脑、激光打印机、手动打码机。13.5.3标签打印依据《α-地中海贫血（SEA型）检测试剂盒标签打印SOP》（FSD-WI-PO-013）要求进行。13.5.4作业规范：α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒的组装作业，应依据《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒组装SOP》（FSD-WI-PO-010）相关要求进行。生产管理：14.1试剂盒生产过程所涉及的中间体以及成品批号，依据《批号管理规程》（FSD-WI-PM-007）要求进行。14.2生产现场应达到井然有序，满足《生产现场管理规程》（FSD-WI-PM-004）相关要求。14.3半成品分装、成品组装等生产环节需进行物料平衡，平衡计算按照《物料平衡管理规程》（FSD-WI-PM-003）相关要求进行。14.4清场作业，按《清场管理规程》（FSD-WI-PM-006）相关要求进行。如生产过程某工序需要返工，按《返工管理规程》（FSD-WI-PM-010）相关要求进行。

第三部分质量标准及质量验收标准质量标准及质量验收标准：15.1主要原料验收标准：名称编号对应质量标准名称及编号引物1182Fα-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒原料质量标准FSD-WI-QT-009引物2182R探针A182Aα-地贫质粒DNAA017dNTPsA014dNTPs质量标准FSD-WI-QT-003纯化水A003工艺用水质量标准FSD-WI-QT-001Taq酶A015Taq酶质量标准FSD-WI-QT-002辅料验收标准：名称编号对应质量标准名称及编号NaClA001化学试剂验收标准FSD-WI-QT-012KClA0041MMgCl2A0051MTris-HCl(pH8.0)A0080.5MEDTA(pH8.0)A009TritonX-100A012SDSA01310×buffer(含镁离子)A015(自带)TE缓冲液A016包装材料验收标准：名称编号对应质量标准名称及编号1.5ml冷藏冻存管(配红色盖)HC001标签、包装材料说明书验收标准FSD-WI-QT-0110.5ml冷藏冻存管(配蓝色盖)HC0020.5ml冷藏冻存管(配橙色盖)HC0030.5ml冷藏冻存管(配黄色盖)HC00430ml棕色平口瓶(配白色盖)HC00520ml棕色平口瓶(配白色盖)HC006包装内衬HC008试剂盒外包装盒HC009合格签HC0108联PCR反应管HC0118联PCR反应管平盖HC012说明书HC013细胞裂解液Ⅰ标签HC014细胞裂解液Ⅱ标签HC015饱和NaCl标签HC016地贫PCR反应液标签HC017地贫阳性对照标签HC018阴性对照标签HC019Taq酶液标签HC020试剂盒外包装盒标签标签HC021合格签标签HC022包装内衬标签HC0238联PCR反应管标签HC0248联PCR反应管平盖标签HC025成品质量标准名称编号对应质量标准名称及编号α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒（实时荧光PCR法）130225α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒成品质量标准FSD-WI-QT-010第四部分：生产及质检设备一览主要生产设备一览表：设备编号设备名称规格型号存放位置数量相关规范使用文件及编号FSD-02-001掌上离心机D1008基础液配制间1掌上离心机标准操作规程FSD-WI-EO-119FSD-02-002掌上离心机D1008PCR成品生产及分装间1掌上离心机标准操作规程FSD-WI-EO-119FSD-02-003不锈钢手提式灭菌器280B(18L）预留间41手提式压力蒸汽灭菌器标准操作规程FSD-WI-EO-116FSD-02-004漩涡混合器XW-80A基础液配制间1涡旋混合器标准操作规程FSD-WI-EO-116FSD-02-005漩涡混合器XW-80APCR成品生产及分装间1涡旋混合器标准操作规程FSD-WI-EO-116FSD-02-006电子天平JA2003N（210g/1mg）称量室1电子天平标准操作规程FSD-WI-EO-102FSD-02-007PH计PHS-3C基础液配制间1酸度计标准操作规程FSD-WI-EO-107FSD-02-008磁力加热搅拌器78-1基础液配制间1磁力加热搅拌器标准操作规程FSD-WI-EO-128FSD-02-009鼓风干燥箱GZX-9070MBE预留间41电热鼓风干燥箱标准操作规程FSD-WI-EO-103FSD-02-010生物安全柜BSC-1000-II-A2阳性对照品生产间1生物安全柜标准操作规程FSD-WI-EO-112FSD-02-011单道可调移液器0.5-10μL基础液配制间1单道可调移液器标准操作规程FSD-WI-EO-101FSD-02-012单道可调移液器100-1000μL基础液配制间1单道可调移液器标准操作规程FSD-WI-EO-101FSD-02-013单道可调移液器10-100μLPCR成品生产及分装间1单道可调移液器标准操作规程FSD-WI-EO-101FSD-02-014纯水系统250L/H机房1纯水系统标准操作规程FSD-WI-EO-124FSD-02-015直膨风冷热泵机组KZE1515DH/KSA150BRD十万级生产区1直膨风冷热泵机组标准操作规程FSD-WI-EO-124FSD-02-016风管机RFD140F2W万级阳性对照生产区1风管机组标准操作规程FSD-WI-EO-126FSD-02-017洗衣机MB55-3006G十万级生产区洗衣房1洗衣机标准操作规程FSD-WI-EO-117FSD-02-018洗衣机MB55-3006G万级阳性对照生产区洗衣房1洗衣机标准操作规程FSD-WI-EO-117FSD-02-019烘干机MLGY-001十万级生产区洗衣房1烘干机标准操作规程FSD-WI-EO-114FSD-02-020烘干机MLGY-001万级阳性对照生产区洗衣房1烘干机标准操作规程FSD-WI-EO-114FSD-02-021冰箱BCD-176SQMK基础液配制间1电冰箱标准操作规程FSD-WI-EO-121FSD-02-022冷柜BD/BC-199VMQ仓库1冷柜标准操作规程FSD-WI-EO-120FSD-02-023冷柜BD/BC-199VMQ仓库1冷柜标准操作规程FSD-WI-EO-120主要质检设备一览表：设备编号设备名称规格型号定置位置数量相关规范使用文件FSD-03-001定量PCR仪ABI7500PCR扩增室1荧光定量PCR仪标准操作规程FSD-WI-EO-108FSD-03-002掌上离心机D1008试剂配制室1掌上离心机标准操作规程FSD-WI-EO-119FSD-03-003掌上离心机D1008标本制备室1掌上离心机标准操作规程FSD-WI-EO-119FSD-03-004低速台式离心机TDL-80-2B标本制备室1台式离心机标准操作规程FSD-WI-EO-115FSD-03-005不锈钢手提式灭菌器280B(18L）普通质检室1手提式压力蒸汽灭菌器标准操作规程FSD-WI-EO-116FSD-03-006磁力加热搅拌器78-1普通质检室1磁力加热搅拌器标准操作规程FSD-WI-EO-128FSD-03-007单道可调移液器0.1-2.5μL试剂配制室1单道可调移液器标准操作规程FSD-WI-EO-101FSD-03-008单道可调移液器0.5-10μL标本制备室1单道可调移液器标准操作规程FSD-WI-EO-101FSD-03-009单道可调移液器10-100μL试剂配制室1单道可调移液器标准操作规程FSD-WI-EO-101FSD-03-010恒温金属浴TU-10标本制备室1金属恒温加热器标准操作规程FSD-WI-EO-111FSD-03-011紫外分光光度计752（手动）普通质检室1紫外可见分光光度计标准操作规程FSD-WI-EO-110FSD-03-012漩涡混合器XW-80A试剂配制室1涡旋混合器标准操作规程FSD-WI-EO-116FSD-03-013漩涡混合器XW-80A标本制备室1涡旋混合器标准操作规程FSD-WI-EO-116FSD-03-014电子天平JA2003N（210g/1mg）普通质检室1电子天平标准操作规程FSD-WI-EO-102FSD-03-015PH计PHS-3C普通质检室1酸度计标准操作规程FSD-WI-EO-107FSD-03-016生化培养箱SPX-100B-Z阳性对照室1生化培养箱标准操作规程FSD-WI-EO-105FSD-03-017生物安全柜BSC-1000-II-A2阳性对照室1生物安全柜标准操作规程FSD-WI-EO-112FSD-03-018生物安全柜BSC-1000-II-A2标本制备室1生物安全柜标准操作规程FSD-WI-EO-112FSD-03-019风管机RFD71F2W阳性对照室1风管机组标准操作规程FSD-WI-EO-126FSD-03-020风管机RFD71F2W微生物限度室无菌检测室1风管机组标准操作规程FSD-WI-EO-126FSD-03-021冰箱BCD-176SQMK试剂配制室1电冰箱标准操作规程FSD-WI-EO-121FSD-03-022冰箱BCD-176SQMK标本制备室1电冰箱标准操作规程FSD-WI-EO-121FSD-03-023冷柜BD/BC-199VMQ普通质检室1冷柜标准操作规程FSD-WI-EO-120FSD-03-024超净台SW-YJ-1F微生物限度室1净化操作台标准操作规程FSD-WI-EO-113FSD-03-025超净台SW-YJ-1F无菌检测室净化操作台标准操作规程FSD-WI-EO-113FSD-03-026风速仪MS6552A普通质检室风速仪标准操作规程FSD-WI-EO-123FSD-03-027尘埃粒子计数器3887L普通质检室尘埃粒子标准操作规程FSD-WI-EO-109FSD-03-028电导率仪DDS-11A普通质检室1电导率仪标准操作规程FSD-WI-EO-106FSD-03-029电热恒温培养箱DHP-9052阳性对照室1电热恒温培养箱标准操作规程FSD-WI-EO-129第五部分批量及物料消耗定额产品批量与试剂生产量：（批量960人份）名称编号理论需求量大包装PCR反应液M00118.72毫升大包装细胞液IM002560毫升大包装细胞液IIM003160毫升大包装饱和NaClM004160毫升大包装阴性对照M0050.8毫升大包装阳性对照M0060.8毫升原料消耗定额(批量960人份)名称编号理论需求量引物1(50uM)182F192微升引物2(50uM)182R192微升探针A(50uM)182A67.2微升dNTPsA0141.92毫升Taq酶A015200微升Taq酶液A011600微升KClA00437.27克α-地贫质粒DNAA0176微克NaClA001180克饱和NaClA002160毫升1MTris-HCl(pH8.0)A00812.2毫升0.5MEDTA(pH8.0)A0093.88毫升1MKClA0107.2毫升1MMgCl2A0057.2毫升TritonX-100A01214毫升SDSA0131.6克10×buffer(含镁离子)A015自带2.4毫升TE缓冲液A0161.6毫升纯化水A0033504毫升包装材料消耗定额：（批量960人份）名称编号理论需求量1.5ml冷藏冻存管(配红色盖)HC001200.5ml冷藏冻存管(配蓝色盖)HC002200.5ml冷藏冻存管(配橙色盖)HC003200.5ml冷藏冻存管(配黄色盖)HC0042030ml棕色平口瓶（配白色盖）HC0052020ml棕色平口瓶（配白色盖）HC00620包装内衬HC00820试剂盒外包装盒HC00920合格签HC010208联PCR反应管HC0111208联PCR反应管平盖HC012120说明书HC01320细胞裂解液I液标签HC01420细胞裂解液II液标签HC01520饱和NaCl标签HC01620地贫PCR反应液标签HC01720地贫阳性对照标签HC01820阴性对照标签HC01920Taq酶液标签HC02020合格签标签HC02120试剂盒外包装盒标签HC02220包装内衬标签HC023208联PCR反应管标签HC024208联PCR反应管平盖标签HC02520

第六部分工艺、环境卫生物料卫生：物料进出洁净区按《物料进出洁净室清洁规程》（FSD-WI-EO-001）进行。人员卫生人员进出洁净区按