霉菌实验报告

霉菌实验报告霉菌实验报告范文

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一.实验目的

1．掌握配制马铃薯培养基（PDA）的一般方法。

2．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。

3．了解并掌握四类霉菌（根霉、毛霉、曲霉、青霉）的基本形态。

二.实验原理

1.霉菌

霉菌是可产生复杂分枝的菌丝体，其菌丝分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约3～10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。本实验采用毛霉、青霉，曲霉，根霉四种常见的霉菌作为菌种进行观察。

2.小室培养法

观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。

用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，沿琼脂边缘接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

三．实验器材

1.菌种

曲霉（Aspergillussp.），青霉（Penicilliumsp.），毛霉（Mucorsp.）和根霉（Rhizopussp.）培养48h的马铃薯琼脂（PDA）斜面培养物。

2.培养基及试剂

马铃薯琼脂（PDA），20%甘油（无菌），乙醇。

3.仪器及其它用品

无菌操作台，解剖刀，镊子，无菌吸管，U型玻璃棒，普通光学显微镜，擦镜纸，绸布，酒精灯，载玻片，接种针，培养皿等。

四．操作步骤

1.培养基的配制

按附录所示配方称取PDA各组分，先将马铃薯去皮，切成小块称取20g煮沸

姓名系年级?学号?组别科目?题目霉菌的形态观察

同组者：

20min，然后先用1层纱布滤去未溶解的固体，再用6层纱布过滤，将滤液体积用无菌水调至101mL，然后再加入糖及琼脂，加塞后用牛皮纸包好，准备灭菌。

2.培养基及装置的灭菌

（1）灭菌准备

准备12个平皿，在其中10个平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和三块盖玻片，盖上皿盖后再与另外2个空平皿一起用牛皮纸包好；在101mL锥形瓶中用甘油配制20%的甘油，加塞包好；最后取2mL移液管两支并用牛皮纸包好。

（2）灭菌

将上述用牛皮纸包好的仪器与试剂连同配好的PDA培养基一并放入灭菌锅中110℃灭菌20到30min（由于培养基中有葡萄糖，为防止由于高温而使糖发生糊化而变质，灭菌温度不宜过高）。

3.琼脂块制备

分别取已灭菌并溶化冷却至约50℃的马铃薯琼脂培养基6～7mL注入两个灭菌空平皿中，使之凝固成薄层。在两个凝固后的平板背部用记号笔画下约1x1cm的方格，通过无菌操作，用解剖刀沿画下的方格线将其切成方形的'琼脂块。（注：解剖刀使用前应先在酒精中浸泡，然后在酒精灯上灼烧，冷却后再进行切割操作）

4.接种

在无菌操作台上，先用镊子将载玻片放于U型玻璃管上，然后用解剖刀取一小块儿琼脂块，置于载玻片上，用接种环分别从斜面培养物上挑取很少量的4种菌的孢子，分别接种于培养小室中琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。最后用移液管在培养小室中的圆滤纸上加2mL灭菌的20%的甘油（用于保持平皿内的湿度)，盖上皿盖并贴上标签，每一种菌接种两个小室（其中毛霉接种4个小室）。

5.恒温培养

将接种后的平皿正置于28℃培养箱中恒温培养7天。6.镜检

在显微镜下直接观察小室培养后的载玻片，用低倍镜即可较为清晰的观察到霉菌的菌丝体及孢子，根据所学的四种菌的基本特征对四种菌进行观察比较与区分，必要时可以采用高倍镜对菌进行观察。

五．实验结果记录

1.四种霉菌的形态特征

姓名系年级?学号?组别科目?题目霉菌的形态观察

同组者：

毛霉、根霉、青霉、曲霉的形态特征比较

2.四种霉菌的图示

图1根霉的形态（10x40）

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同组者：

图2黑曲霉的形态（10x10）

图

3黑曲霉的形态（10x40）

图4黑曲霉足细胞（10x40）

姓名系年级?学号?组别科目?题目霉菌的形态观察

同组者：

图5毛霉的形态（10x40）

分生小梗隔

图6青霉的形态（10x40）

六、实验小结

通过本次实验，学会了小室培养培及马铃薯培养基的配制方法。另外，通过观察霉菌的形态并且有特别的关注不同霉菌的细节及不同之处，比如菌丝是否有隔，孢子囊形态等特征，细心比较各种霉菌细节状态的不同，掌握了霉菌的一些基本形态特征，扩展了视野。

七、思考题

1、黑曲霉和黑根霉在形态