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34RegulationsforevaluatingtheresistanceofwinterwheatvarietiestolatespringI本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定业有限责任公司、濉溪县农业技术推广中心、淮北三丰肥业有限公司、淮北双收种业有限责任公1冬小麦品种抗倒春寒性评价规程GB4404.1粮食作物种子第1部GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则NY/T496肥料合理使用准则通则4鉴定材料与方法4.1种子质量基肥，埋于试验田中，盆内土壤与盆外大田齐平。每个参试材料种植4.2.2在进行小麦品种抗倒春寒性评价期间，要及时防治病、虫、草和鸟害，防止倒伏等不利情况发4.3倒春寒处理方法4.3.1人工模拟倒春寒处理），个低温处理，处理时间为凌晨1:00-5:00。倒春4.3.2取样2倒春寒处理后采集胁迫组与对照组小麦主茎倒二叶用于指标测定5抗倒春寒性指标检测5.1可溶性糖含量5.2保护酶活性利用氯化硝基四氮唑蓝光化还原法检测分析（参5.2.3过氧化氢酶（CAT）活性5.4可孕小花数5.5产量性状n i1UXiXi-Xmin/XmaxXmin nWiPi/Pi i136.2基于D综合值和聚类分析图的平均隶属值结果，D值弱强4沸水中煮沸10min，取出后用水冷却至室温，使用紫外可见分光光度计在625nm处比色，计算可溶5砂，于冰浴中的研钵内研磨成匀浆，定容至5mL刻度离心管中，于试剂及酶液，反应系统总体积为3mL。其中4在560nm波长下以1号杯液调零，测定各杯液光密度并记录结果。以2、3号杯液作为抑制NBT光还原率100%，根据其他各杯液的光密度分别计算出不同酶液量在各反应系统中抑制NBT光还原的相对百分率。以酶液用量为横坐标，以抑制NBT光还原相对百分率为纵坐标，作出二者相关曲AU/gFW/hV100060BWt····························(B.1)B——一个酶活力单位的酶液量(μL6），缓冲液（pH8.5），研磨成匀浆，以4000r/min离心5min，倒出上清液，必要时残渣再用5mL缓酶活性过高可稀释），再加入反应混合液3mL，立即开启秒表记录时间，于分光光度计470nm波长PU/gminA470nmVT0.01V1tFW·······················(C.1)0.01——A470nm每下降0.01为7转移至10mL刻度试管中，用该缓冲液冲洗研钵，并将冲洗液转入刻度试管中，用同一缓冲液定容，4000r/min，离心15min，上清），）（），CU/gminA240nmVT0.1V1tFW··························(D.1)其中：A240nmAS0AS1AS22C——过氧化氢酶（CAT）活性（U/（g·min0.1——A240nm每下降0.1为18采

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