DB34T 3650-2020 水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定 酶联免疫吸附法　　

DB34DB34/T3650—2020水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定酶联免疫吸附法DeterminationofresiduesofnitrofuranmetabolitesinaquaticProductsELISAmethod2020-06-22发布2020-07-22实施安徽省市场监督管理局发布I1GB/T6682分析实验室用水规农业部1192号公告-1-2009水产苗定。试样中残留的硝基呋喃代谢物、HRP酶标记抗原共同竞争板上的抗体，加TMB底物后的颜色——包括：呋喃唑酮代谢物（AOZ）测定试剂盒、呋喃它酮代谢物（AMOZ）测定试剂盒、呋喃西林4.6.1呋喃唑酮代谢物（AOZ）标准系列工作液（ng/mL0，0.0224.6.2呋喃它酮代谢物（AMOZ）标准系列工作液（ng/mL0，0.04.6.3呋喃西林代谢物(SEM)标准系列工作液（ng/）：4.6.4呋喃妥因代谢物(AHD)标准系列工作液（ng/）：5.5恒温振荡器。温控范围：室温～100℃,温控精度：±0.5℃所有操作应在20℃~25℃室温下进行。AOZ、AMOZ、SEM和AHD测定试剂盒及所有试剂，使用前30.5mL盐酸溶液（4.3）和80μL衍生化试剂（4.6.6剧烈振荡1min，置于恒温振荡器中此最终试液体积（v）为1mL，所代表的相应的位置。在每孔中，加入100μL标准缘混匀1min，盖上板膜，放入恒温培养箱中于22.5℃±2.5℃避光孵育30min；取出酶标板，在吸水纸上拍打，完全去除孔中液体。每孔加入100μLTMB底物（4.6.8），盖上板膜，放入恒温培养箱中于22.5℃±2.5℃避光孵育20min后，加入100μL终止液（4.6.9），轻轻振荡混匀标准品或样品的百分吸光率按式（1）计算，百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均00A——标准工作液或试液的百分吸光率，%;B——非0浓度标准工作液或试液的平均吸光度值，%;应的试样中硝基呋喃类代谢物浓度（c），再乘以），），4X——硝基呋喃类代谢物含量，单位为微克每千克(μg/kg）；AMOZ、SEM和AHD空白试样中添加0.05μg/kg～5μg/kg，AOZ空白试样中添加％～5A.1呋喃唑酮代谢物（AOZ）测定2℃~8℃的温度下储存。已包被的酶标板(AOZ-coatedPlate)（可标准液(Standards)（ng/mL：0，0.02，0.06，0.18，0.54，1.62）......AOZ酶标抗原(HRP-Conjugate)...........................................620×浓缩洗液(WashingSolution).....................................终止液(StopBuffer)................TMB底物(TMBSubstrate)......................50mM2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)............A.2呋喃它酮代谢物（AMOZ）测定2℃~8℃的温度下储存。已包被的酶标板（AMOZ-coatedPl标准液(Standards)（ng/mL：0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4）.........AMOZ酶标抗原(HRP-Conjugate)...........................................6mL20×浓缩洗液(WashingSolution).....................................终止液(StopBuffer)................TMB底物(TMBSubstrate)......................50mM2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)............A.3呋喃西林代谢物(SEM)测定试2℃~8℃的温度下储存。已包被的酶标板（SEM-coatedPlate)（可标准液(Standards)（ng/mL：0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4）.........6SEMZ酶标抗原(HRP-Conjugate)...........................................6mL20×浓缩洗液(WashingSolution)............................终止液(StopBuffer)..........................................14mLTMB底物(TMBSubstrate)................................50mM2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde).....................A.4喃妥因代谢物(AHD)测定试2℃~8℃的温度下储存。已包被的酶标板(AHD)-coatedPla标准液(Standards)（ng/mL：0，0.025，0.1，0.4，1.6，AHD)酶标抗原(HRP-Conjugate)...........................................6mL20×浓缩洗液(WashingSolution)............................终止液(StopBuffer)..........................................14mLTMB底物(