高三一轮复习生物：植物细胞工程课件

第31课植物细胞工程第十单元生物技术与工程学业质量水平：1．通过菊花的组织培养实验，理解植物组织培养技术的原理，了解植物激素(生长素和细胞分裂素)的浓度、比例对菊花愈伤组织形成和分化的影响。(生命观念、科学探究)2．运用所学生物学知识，结合教材图解，理解植物体细胞杂交的原理和技术流程。(生命观念、科学思维)3．阅读相关资料，列举植物组织培养、植物体细胞杂交技术在生产实践中的应用，用生命观念解释植物细胞工程给人们带来的影响。(生命观念、社会责任)课标要点一植物组织培养技术主干梳理1．细胞工程(1)概念原理、方法按照一定的设计方案，借助__________的方法或技术(细胞和组织培养、细胞融合、_______________等)操作对象细胞器、细胞或________目的获得特定的____________、细胞、组织、器官或新生物体工程学核移植技术组织细胞产物(2)分类：植物细胞工程和动物细胞工程。(3)植物细胞工程的基础技术：_________________。动物细胞工程的基础技术：动物细胞培养。植物组织培养2．植物细胞的全能性全部的遗传信息完整植株全部遗传信息离体营养、激素3．植物组织培养技术定义在无菌和人工控制条件下，将________的植物体器官、组织或细胞等培养在人工配制的培养基上，使其生成____________或使其细胞增殖并产生________________的技术原理_____________________分类①分类依据：根据__________的不同分类②类型：器官培养、_____________、细胞培养、__________________等培养过程形成完整植株的途径途径1：芽或茎

幼苗途径2(_____________途径)：外植体

愈伤组织

组织器官→完整植株途径3(体细胞胚发生途径)：外植体

愈伤组织

__________→完整植株培养条件适宜温度、________条件、培养基中适宜浓度和配比的____________、充分而全面的营养物质等培养基成分①无机盐：为植物提供必需的矿质元素②糖类：既可作为碳源和能源物质，又参与维持培养基的___________③维生素：往往以________的形式参与细胞的蛋白质、脂质、糖代谢等重要活动④植物生长调节物质：在____________和再分化中起着关键作用离体完整植株细胞代谢产物植物细胞全能性外植体组织培养原生质体培养外植体愈伤组织器官发生胚状体无菌植物激素渗透压辅酶脱分化4.活动：菊花的组织培养及幼苗的移栽(1)原理：通过调节激素的________可控制菊花外植体的生长发育。(2)步骤比例紫外灯洗涤灵无菌水1一个芽火焰火焰封口膜10~12火焰生根炼苗培养及管理5．植物组织培养通过多种途径有效地提高生产效率体细胞胚、芽营养保护体细胞胚人工胚乳人工种皮育性不良高小◆自我诊断◆判断正误(正确的打“√”，错误的打“×”)1．高度分化的成熟叶肉细胞不具备发育成完整植株的潜能。(

)2．愈伤组织是外植体经脱分化和再分化后形成的。(

)3．培养草莓脱毒苗所采用的主要技术是细胞杂交。(

)4．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的植株基因都是相同的。(

)5．在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，不会发生细胞的增殖和分化。(

)×××××◆精准答题◆新疆特色葡萄品种木纳格粒大皮薄、色泽鲜艳、口味甘美，可通过以下植物组织培养过程大量繁殖。回答下列问题。(1)木纳格不能用果实中的种子大量繁殖是因为___________________________________________________________。利用植物组织培养繁殖木纳格能获得脱毒幼苗的原因是________________有性生殖产生种子的过程变异较多，不能保持亲本的优良性状选取病毒极少甚__________________________________________________________。(2)植物组织培养依据的原理是____________________，植物组织培养过程中的①②分别是指__________________。在同样条件下，利用木纳格的叶、嫩茎和根尖等外植体进行植物组织培养，经①形成愈伤组织的成功率差异很大，原因是____________________________。(3)培养基中激素的种类和含量会影响①②过程，以下Ⅰ、Ⅱ两个培养基中激素的配方，用于②过程诱导生根的是Ⅱ，原因是_______________________________________。至无病毒的部分进行组织培养，得到的植株就有可能不带病毒植物细胞的全能性脱分化、再分化不同的外植体分化程度不同生长素类似物含量较高有利于根的分化Ⅰ.6——BA0.5mg/L＋IBA0.05mg/L＋NAA0.05mg/L；Ⅱ.IBA0.5mg/L＋NAA0.5mg/L(4)在木纳格植物组织培养基中常加入少量的抗生素，目的是_________________。【解析】(1)有性生殖产生种子的过程变异较多，不能保持亲本的优良性状，因此木纳格不能用果实中的种子大量繁殖。选取病毒极少甚至无病毒的部分进行组织培养，得到的植株就有可能不带病毒，因此利用植物组织培养繁殖木纳格能获得脱毒幼苗。防止杂菌污染(2)植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，可以将植物细胞培育成完整个体。①是外植体脱分化得到愈伤组织的过程，②是愈伤组织再分化得到相应组织、器官的过程。不同的外植体分化程度不同，因此利用木纳格的叶、嫩茎和根尖等外植体进行植物组织培养，经①形成愈伤组织的成功率差异很大。(3)生长素类似物含量较高有利于根的分化，因此用于②过程诱导生根的是Ⅱ。(4)加抗生素可以防止杂菌污染。命题探究命题探究一植物组织培养过程分析

例1下图表示通过克隆技术获得烟草植株的过程，请回答下列问题。(1)①过程往往选取烟草叶片的幼嫩部位，需经过________处理，才能置于培养基中培养。(2)②过程称为___________，③过程称为___________。(3)通过悬浮培养形成的单细胞可发育成_________________，继而形成植物幼体；也可利用_____________________水解细胞壁，获得____________，其经培养后也可形成完整植株。(4)在培养过程中，若要诱导芽的产生，则配制植物激素时要_____(填字母)。消毒脱分化再分化幼胚(或胚状体)纤维素酶和果胶酶原生质体BA．添加适量的生长素和适当减除某些其他激素B．添加适当配比的生长素和细胞分裂素C．添加适量的生长素和适当增加某些其他激素D．适当增加细胞分裂素和生长素的量【解析】(1)自然环境中获取的植物组织、器官携带较多微生物，会影响培养过程中植物细胞的生长，因此需先进行消毒处理。(2)高度分化的植物细胞经诱导形成相对未分化的愈伤组织细胞，此过程称为脱分化。愈伤组织细胞在一定条件下重新分化成胚的过程，称为再分化。(3)据题图可知，悬浮培养的单细胞可发育成幼胚；细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，因此可使用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁，植物细胞壁去除后内部的结构称为原生质体。(4)营养物质和植物生长调节物质的配比会影响愈伤组织的分化方向，例如，适当的生长素和细胞分裂素配比可以诱导芽的分化，B符合题意。即时巩固[2024·杭二中模拟]草莓是人们经常食用的一种水果，有较高的营养价值。草莓是无性繁殖的作物，长期种植会使病毒积累在体内，产量降低，品质下降。下图是利用植物组织培养技术培育草莓脱毒苗的过程，请据图回答下列问题。外植体→愈伤组织→胚状体→脱毒苗→草莓植株(1)外植体能够形成幼苗所依据的原理是______________________。培育脱毒苗时，一般选取________作为外植体，其依据是_________________________________________。植物细胞具有全能性茎尖植物生长点附近病毒浓度很低甚至无病毒(2)为了成功培育草莓脱毒苗，从草莓植株上取下的外植体需消毒，常用_________________________________和____________混合使用效果会更好。将脱分化获得的愈伤组织置于_____(A.LB培养基B．MS培养基＋NAA∶6——BA＝1∶10

C．MS培养基＋NAA∶6——BA＝10∶1

D．MS培养基＋NAA∶6——BA＝1∶1)上可长成丛状苗。

(3)研究表明，多倍体草莓产量高于二倍体，利用组织培养技术获得多倍体草莓的方法有两种：一是使用_____________(填化学试剂)处理草莓的愈伤组织，再经培养获得多倍体植株；二是利用____________(填化学试剂)诱导草莓体细胞原生质体融合形成杂种细胞后，再经组织培养获得多一定浓度的次氯酸钠(或氯化汞)75%酒精B秋水仙素聚乙二醇倍体植株，这种育种技术被称为植物体细胞杂交技术。植物体细胞杂交技术的原理是_____________________________________________，植物体细胞融合完成的标志是_________________。【解析】(1)植物体的每个生活细胞都具有发育成完整植株的潜能，称为植物细胞的全能性，外植体能够形成幼苗所依据的原理是植物细胞的全能性。培育脱毒苗时，一般选取茎尖作为外植体，这是因为植物生长点附近(如茎尖)病毒浓度很低甚至无病毒。(2)外植体需消毒，常用75%酒精和一定浓度的次氯酸钠(或氯化汞)混合使用效果会更好。将愈伤组织培养长成丛状苗，需细胞分裂素类大于生长素类物质的浓度(MS培养基细胞膜具有一定的流动性和植物细胞的全能性细胞壁的形成＋NAA∶6——BA＝1∶10)，以促进芽的分化，故选B。(3)利用组织培养技术获得多倍体草莓的方法有两种：一是使用秋水仙素处理草莓的愈伤组织，秋水仙素会抑制纺锤体的形成，导致染色体数目加倍，再经培养获得多倍体植株；二是利用聚乙二醇诱导草莓体细胞原生质体融合形成杂种细胞后，再经组织培养获得多倍体植株，这种育种技术被称为植物体细胞杂交技术。植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜具有一定的流动性和植物细胞的全能性。植物体细胞融合完成的标志是原生质体再生出细胞壁，即细胞壁的形成。命题探究二多途径的植物克隆及应用

1．植物快速繁殖和植物脱毒(1)快速繁殖(也称微型繁殖)(2)植物脱毒①进行植物脱毒的原因实质植物组织培养原理植物细胞的全能性优点①能保持亲本的一切优良性状，子代个体的遗传物质与亲本相同②选材少，培养周期短，繁殖率高③不受自然生长季节的限制，便于自动化管理，有利于进行工厂化生产长期进行无性繁殖的植物(如马铃薯和草莓)，它们感染的病毒很容易传给后代。病毒在植物体内逐年积累，从而导致作物产量降低，品质变差。②材料的选取在植物生长点附近(如茎尖)的细胞代谢十分旺盛、细胞分裂速度快，很少被病毒感染，甚至无病毒。因此，利用植物的分生组织进行组织培养，可以使新长成的植株不带病毒，从而获得脱毒苗，再用脱毒苗进行繁殖，则种植的作物就不会或极少感染病毒。(3)快速繁殖与作物脱毒的比较项目概念(或原理)特点快速繁殖用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术①保持优良品种的遗传特性②高效快速地实现种苗的大量繁殖作物脱毒植物生长点附近的病毒极少甚至无病毒，因此，取茎尖等进行组织培养形成脱毒苗①获得高产、优质的脱毒植株②繁殖速度快，保持植株的遗传特性2.人工种子(1)体细胞胚是指在组织培养过程中，在植物组织块或愈伤组织上产生的一种结构，它与正常受精卵发育形成的胚有类似的结构和发育过程。(2)人工胚乳中除含有体细胞胚发育所需的营养物质外，还可以添加各种附加成分，如固氮细菌、防病虫农药、除草剂和植物生长调节物质等，这些附加成分有利于幼苗茁壮成长。(3)人工种皮的要求①能保持体细胞胚的活力，即要能透气、透水且有利于体细胞胚萌发等。②有利于储藏、运输和萌发，选取的材料要有韧性、耐压、对体细胞胚无毒害作用，且易被分解。(4)人工种子与天然种子的区别①人工种子是通过植物组织培养产生的，属于无性繁殖，可保持亲本的优良性状。②天然种子是通过有性生殖产生的，可表现出双亲的遗传性状。3．植物组织培养与植物细胞培养(1)植物细胞培养植物细胞培养是将组织培养过程中形成的愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中，经机械作用分散成单个细胞制备成细胞悬浮液，通过继代培养使细胞增殖，从而获得大量细胞群体的一种技术。植物细胞培养是在植物组织培养技术的基础上发展起来的。

(2)植物组织培养与植物细胞培养的比较项目植物组织培养植物细胞培养目的获得植物体获得细胞次生代谢产物培养基固体培养基液体培养基过程实例各种转基因植物、脱毒苗人参皂苷的生产4.突变体和细胞产物获取过程的比较(1)突变体的获取过程(2)细胞产物的工厂化生产过程例2植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用，回答下列问题。(1)植物组织培养技术是植物快速繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比，这种繁殖技术的特点有__________________________________________(答出2点)。(2)通过组织培养技术，可把植物组织细胞培养成体细胞胚，再经过人工能保持植物原有的遗传特性；繁殖速度快种皮(人工薄膜)包装得到人工种子(如图所示)。这种人工种子在适宜条件下可萌发生长，人工种皮要具备透气性，目的是______________________________。人工胚乳能够为体细胞胚生长提供所需物质，因此应含有植物激素、_____________和______等几类物质。(3)用脱病毒苗进行繁殖，可以减少作物感染病毒。为了获得脱病毒苗，可以选取植物的________进行组织培养。(4)植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是_________________________________________________(用流程图表示)。有利于体细胞胚进行呼吸作用矿质元素糖茎尖【解析】(1)植物快速繁殖是指用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，与常规的种子繁殖方法相比，这种快速繁殖技术的特点有保持优良品种的遗传特性；高效快速地实现种苗的大量繁殖。(2)人工种子的体细胞胚在进行细胞呼吸时，需要从外界环境吸收O2，并将产生的CO2释放到外界环境中，因此人工种皮具备透气性可有利于体细胞胚进行呼吸作用，以保持体细胞胚的活力。人工胚乳的作用是为体细胞胚的发育提供营养，因此应含有植物激素、矿质元素、糖等物质。(3)植物分生区附近(如茎尖)的病毒极少甚至无病毒，因此为了获得脱病毒苗，可以选取植物的茎尖进行组织培养。(4)将含有目的基因的植物细胞培养成一个完整即时巩固红豆杉因其次生代谢产物紫杉醇的显著治癌效果而备受关注。为了获得紫杉醇，可以先用植物外植体获得愈伤组织，然后在生物反应器中悬浮培养。请回答下列问题。(1)以该植物的幼茎、树皮、针叶作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是________________________________________________________________________。研究发现用幼嫩茎段比成年老枝更易产生愈伤组织，且时间早，诱导率高，原因是幼嫩茎段细胞分化程度较______。

幼茎、树皮、针叶的细胞都具有全能性，在一定条件下能发育成完整的植株低(2)与从红豆杉树皮中直接提取相比，通过茎段组培获得的愈伤组织细胞悬浮培养生产紫杉醇的优点是______________________________________________________________________________________。(3)二倍体愈伤组织细胞经____________________处理，会产生染色体数目加倍的细胞。(4)不同有机溶剂及其组合作为浸提溶剂对紫杉醇的得率的影响如下图所示。

可以在生物反应器中大规模培养细胞，并且通过控制培养条件使培养细胞合成大量的紫杉醇秋水仙素(或低温)注：1.甲醇；2.乙醇；3.丙酮；4.二氯甲烷；5.乙酸乙酯；6.甲醇、乙醇；7.甲醇、丙酮；8.甲醇、二氯甲烷；9.甲醇、乙酸乙酯；10.乙醇、丙酮；11.乙醇、二氯甲烷；12.乙醇、乙酸乙酯；13.丙酮、二氯甲烷；14.丙酮、乙酸乙酯；15.二氯甲烷、乙酸乙酯。从溶剂单独和混合提取效果的角度分析，可得出的结论有：单一溶剂作为提取紫杉醇的浸提溶剂时，________的提取效果最佳；溶剂混合浸提时，____________________作为浸提溶剂提取紫杉醇效果最好。【解析】(1)植物的幼茎、树皮、针叶作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是植物细胞具有全能性。研究发现用甲醇乙醇、二氯甲烷幼嫩茎段比成年老枝更易产生愈伤组织，且时间早，诱导率高，原因是幼嫩茎段细胞分化程度较低，全能性高。(2)与从红豆杉树皮中直接提取相比，通过茎段组培获得的愈伤组织细胞悬浮培养生产紫杉醇的优点是可以在生物反应器中大量培养植物细胞，并且通过控制条件使培养细胞合成大量的紫杉醇。(3)二倍体愈伤组织细胞经秋水仙素(或低温)处理，会产生染色体数目加倍的细胞。(4)由柱形图分析可知，单一溶剂作为提取紫杉醇的浸提溶剂时，甲醇的提取效果最佳；溶剂混合浸提时，乙醇、二氯甲烷作为浸提溶剂提取紫杉醇的效果最好。课标要点二植物体细胞杂交技术主干梳理1．获得原生质体的具体方法处理目的用________________溶液处理细胞(在0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液下或一定浓度的蔗糖溶液下)使细胞处于微弱的____________状态，

这样有利于完整的原生质体的释放，防止原生质体被破坏用____________________混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞消化除去____________，获得球形的原生质体较高渗透压质壁分离纤维素酶和果胶酶细胞壁2.植物体细胞杂交技术(1)概念：将两个来自不同种植物的体细胞融合成________________，并把杂种细胞培育成_______________的技术。(2)原理：体细胞杂交利用了细胞膜的__________，杂种细胞培育成杂种植株利用了植物细胞的___________。(3)过程一个杂种细胞新的植物体流动性全能性原生质体细胞壁愈伤组织①用_________法获得原生质体。②通过一定的技术手段如__________、离心、振荡、__________等诱导，实现原生质体的融合。③一个融合体系中的细胞并非均为____________，两个不同亲本的原生质体混合后经诱导融合，实际上得到的是各种原生质体的混合物，包括_______________________________、不同种细胞融合的原生质体。(4)意义：______________________________________。酶解电刺激聚乙二醇杂种细胞未融合的、同种细胞融合的克服远缘杂交的不亲和性，获得新品种◆自我诊断◆判断正误(正确的打“√”，错误的打“×”)1．再生出细胞壁是植物体细胞原生质体融合成功的标志。(

)2．在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体数目加倍的细胞。(

)3．用纤维素酶和果胶酶酶解获得的植物原生质体失去了全能性。(

)√××◆精准答题◆黑腐病是困扰花椰菜种植的一大问题，研究人员希望通过植物体细胞杂交的方式，让花椰菜获得黑芥的黑腐病抗性基因。请回答下列问题。(1)研究者通过图1的过程，获得再生植株。①对花椰菜、黑芥组织进行消毒的目的是__________________。②图中(a)处应填写____________，细胞融合成功的标志是避免杂菌污染原生质体_________________。③从融合细胞获得再生植株使用的技术是____________________，其原理是____________________，获得再生植株的过程中需要用到多种不同的培养基，其成分的主要区别是_______________________。(2)获得再生植株后，研究者利用各种手段进行筛选和鉴定。①为了对再生植株进行初步鉴定，研究者利用流式细胞仪测定植株细胞中的DNA含量，已知待测的细胞有黑芥植株细胞、花椰菜植株细胞、杂种植株细胞三类，图2中表示杂种植株细胞的峰有_________。再生出细胞壁植物组织培养技术植物细胞的全能性植物激素的比例不同d和e②研究者提取再生植株细胞的DNA，用特定引物进行PCR后电泳，进行进一步鉴定，结果如图3。X1、X2、X3是不同植株的鉴定结果，其中确定是杂种植株的有__________。X1中包含全部来自花椰菜的特征性片段，但仅包含部分来自黑芥的特征性片段，其原因是_____________________________。③筛选出杂种植株之后，需要鉴定其黑腐病抗性相对于原花椰菜植株是否提升，方法是_________________________________________________________________。X1和X2来自黑芥的染色体随机丢失

将杂种植株和原花椰菜栽培在含有黑腐病菌的环境中，比较两者的抗性【解析】(1)①植物组织培养过程中应注意无菌操作，因此对花椰菜、黑芥组织进行消毒的目的是避免杂菌污染。②分析流程图可知，在用PEG诱导融合之前，应首先去除植物细胞壁以制备原生质体，故(a)处应填写原生质体。植物细胞(原生质体)融合成功的标志是再生出细胞壁。③从融合细胞获得再生植株使用的技术是植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞的全能性。获得再生植株的过程中需要用到多种不同的培养基，培养基中植物激素的比例可决定细胞分化的方向，故其成分的主要区别是植物激素的比例不同。(2)①已知待测的细胞有黑芥植株细胞、花椰菜植株细胞、杂种植株细胞三类，根据流式细胞仪测定结果可知峰值a、b和c多集中在50、75左右，可能代表未融合的两种细胞，而d和e是125左右，可能代表杂种细胞，而f是150，是75的两倍，可能是某一种细胞的两个细胞融合在一起，不属于杂种细胞。②根据图谱分析，X1和X2个体含有黑芥和花椰菜两种类型的DNA，说明是杂种细胞，而X3个体只有花椰菜中的DNA，说明不是杂种细胞。X1中包含全部来自花椰菜的特征性片段，但仅包含部分来自黑芥的特征性片段，其原因是在细胞融合过程中来自黑芥的染色体随机丢失。③筛选出杂种植株之后，需要鉴定其黑腐病抗性相对于原花椰菜植株是否提升，方法是将杂种植株和原花椰菜栽培在含有黑腐病菌的环境中，比较两者的抗性。命题探究命题探究一原生质体的获得及培养技术分析

1．材料分析注意点(1)从自然界获得的材料，应先进行消毒处理。所用的酶溶液用G6玻璃砂漏斗过滤灭菌。将材料放入0.5～0.6mol·L－1的甘露醇溶液环境中，用纤维素酶和果胶酶处理，前者的目的是使细胞处于微弱的质壁分离状态，以利于完整的原生质体的释放，后者的主要目的是消化除去细胞壁，获得球形的原生质体。(2)愈伤组织和悬浮细胞与叶材料相比，处理时常用的酶活性强且浓度大；要获得产量高，质量好，且易分裂的原生质体，选择合适的基因型材料最关键；愈伤组织或细胞悬浮培养物，一般需继代培养多次后，才能用于获得原生质体；为避免消毒剂对材料的损伤，可选择灭菌培养后的材料；在较高渗透压下，酶液中细胞会发生质壁分离，有利于酶消化细胞壁。2．原生质体活性的鉴定方法：观察是否有胞质环流；染色法；以氧的摄入为指标，表示呼吸强度。3．影响原生质体分离的数量和质量的因素：材料的种类和生理状态；酶的种类、酶解时间和温度；酶液的浓度；分离与纯化的方法等。4．原生质体培养时的培养基渗透压应低于原生质体分离时的渗透压，原生质体培养时，其再生出细胞壁是其能进行有丝分裂的前提。例1植物体细胞杂交需要分离出有活力的原生质体，研究者通过实验研究了酶解时间对原生质体产量和活力的影响，结果如下。下列相关叙述错误的是(

)注：原生质体活力＝(有活力的原生质体数/原生质体总数)×100%。A．利用纤维素酶和果胶酶去壁后可分离得到原生质体B．随酶解时间延长两种原生质体产量均先增加后减少C．适宜两植物细胞的最佳酶解时间分别为10h和12hD．原生质体活力可通过质壁分离与复原实验进行验证D【解析】细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，利用纤维素酶和果胶酶去壁后可分离得到原生质体，A正确；据题图分析，随酶解时间延长两种原生质体产量均先增加后减少，B正确；据题图分析，清水紫花苜蓿和里奥百脉根的最佳酶解时间分别为10h和12h，C正确；原生质体已经去除细胞壁，不能发生质壁分离和复原，D错误。即时巩固[2024·富阳中学模拟]科研人员为探究诱导酵母原生质体摄取蚕豆叶绿体的适宜条件，进行了如下实验。①提取蚕豆叶绿体：过滤蚕豆新鲜叶片研磨液，对滤液进行________后获得叶绿体，加入2mL0.35mol·L－1氯化钠溶液，制成悬浮液。②制备酵母原生质体：在适宜条件下用2%的蜗牛酶处理酵母菌，获得酵母原生质体。③诱导酵母原生质体摄取蚕豆叶绿体：将酵