动物细胞工程-2025年高考生物一轮复习（新人教新高考）

第47讲动物细胞工程

课标内容（1）阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后,

在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的

基础。（2）阐明动物细胞核移植一般是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母

细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的过程。（3）阐明动

物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物细胞结合形

成一个细胞的过程。（4）概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。（5）简

述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。

考点一动物细胞培养

「基础1•精细梳理夯实■备知识

1.动物细胞培养原理：细胞增殖

（1）地位：动物细胞工程常用的技术有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细

胞融合等。其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。

（2）培养条件一般用液体培养基

金全;除糖类、氨基酸、无机盐和维生素等细

胞所需的营养物质外，通常还需加入皿

■5”：等一些天然成分

①对培养液和所有培养用具进行灭菌

处理

'无菌'

无毒②在无菌环境下进行操作

、环境，

、③定期更换培养液,以便清除代谢物，防

止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害

，适宜、

哺乳动物细胞培养的温度多以

的温度

36.5±0.5七为宜，多数动物细胞

pH和渗,

生存的适宜pH为7.2~7.4

气哈95%的空气:其中为细胞代谢所必

环氧广需的。5%的CO,:维持培养液的pH

（3）培养过程

选用劫舲利物俎犯进行纲胞培养，国为害分化

徨皮价，增殖能力殛，史&吁培养

戢动物组织

<

放入co?

厩:盘》转入培养

培养箱中

制成细液中进行培养

胞悬液原代培养

用机械的方法,

或用丹斐旦朔

胶原董百蘸等

传代放入co?培

处理的方法，

培养.养箱中培养

将组织分散成

单个细胞/

不用胃虏■勺酶

名师解读

(1)区分原代培养和传代培养的关键是看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶。

①分瓶前，第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养是原代培养。

②第二次用胰蛋白酶处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，分瓶后的细胞培养为传代

培养。

(2)细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴

壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止

分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

2.干细胞培养及其应用

-早期胚胎、

存

在-早期胚胎中

胚胎

干细胞具有分化为成年动物体内

（ES细胞）的任何一种类型的细胞，并

进一步形成机体的所有组

织和器官甚至个体的潜能

-成体组织或器官内

造血干细胞、神经干细胞

II成体

和精原干细胞等

寡干细胞

类J成体干细胞具有组织特异

利-性，只能分化成特定的细胞

U或组织，不具有发育成完整

个体的能力

科学家通过体外诱导小鼠

概成纤维细胞,获得了类似胚

念胎干细胞的一种细胞，将它

诱导多能

称为诱导多能干细胞

干细胞

|（iPS细胞）用iPS细胞治疗阿尔茨海默

病、心血管疾病等领域的研

究取得了新进展

产难.精准突破强化关键能力

【情境推理・探究】

1.进行动物传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，可以用胃蛋白酶替代胰蛋白酶吗？

说明原因。

提示不可以，胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.5,当pH大于6时，胃蛋白酶就

会失活。胰蛋白酶作用的适宜pH为7.2〜8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为

7.2〜7.4,胃蛋白酶在此环境中失活，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰

蛋白酶适宜用于传代培养时分散细胞。

2.若将病人的皮肤成纤维细胞诱导成iPS细胞，再使它转化为需要的细胞，用这

些细胞给病人治病，不会产生免疫排斥反应，尝试解释其中的原因。

提示iPS细胞来源于病人自身的体细胞。

3.利用iPS细胞治疗镰状细胞贫血的过程是首先制备患者的iPS细胞，再将其诱

导形成造血干细胞，最终输给患者使其产生健康的血细胞。判断该过程是否能治

疗镰状细胞贫血？并阐述理由。

提示不能。因为患者体细胞的相应基因是突变的，制成iPS细胞仍然是突变的,

分化成的细胞也是突变的，因此无法通过该方法治疗。

【重点难点・透析】

动物细胞培养和植物组织培养的比较

:布诙苗灰茂藕

1V_1

▼V■■'

细胞增殖＞植物细胞的全能性

无菌;用机械的方法

或胰蛋白酶、胶原无菌、离体

蛋白酶等处理，使组〈同卜

织分散成单个细胞

出生不久的幼龄动«［取材卜植物幼嫩的部位或

物的器官或组织花药等

3

液体固体

水、矿质元素、蔗糖、

糖类、氨基酸、无机«培养

＞维生素、植物激素

盐、维生素和动物基成分

血清等和琼脂等

细胞培养产生大量

可产生新个体

细胞,不形成新个体上些

快速繁殖、作物脱

人造皮肤的构建、

毒、细胞产物的工

动物分泌蛋白的

厂化生产和单倍体

规模化生产

育种等

;①都需人工条件下的无菌操作;②都需要适宜的温度I

IpH等条件;③都进行有丝分裂，都不涉及减数分裂i

典例/遁@^研提升学科素养

考向1结合动物细胞培养，考查生命观念

1.（2023•东北师大附中）实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错

误的是（）

实验小鼠一更一皮肤组织一乙一皮肤细胞悬液一百一细胞群体1一丁一细胞群体2

A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒

B.乙过程需要用胰蛋白酶等处理皮肤组织，使细胞分散开

C.丙过程表示原代培养，该过程中会出现接触抑制现象

D.丁过程表示传代培养，此过程中的细胞分瓶后能无限增殖

答案D

解析离体动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，甲过程表示从实验小鼠身上取

下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒，A正确；皮肤细胞培养前需用胰蛋白

酶等处理皮肤组织使细胞分散开，并制成细胞悬液，B正确；丁过程表示传代培

养，但分瓶后，细胞并非都能无限增殖，D错误。

2.（2023•山东德州期末）如图所示为动物细胞培养的基本过程，下列关于甲、乙、

丙、丁四个操作过程的叙述，正确的是（）

甲乙丙丁

A.甲过程可选取动物个体的任何组织细胞

B.乙过程可用纤维素酶和果胶酶处理细胞

C.丙过程所用培养液中需添加动物血清

D.丁过程中的细胞因接触抑制而大量死亡

答案C

解析甲过程可选取幼龄动物的器官或组织，A错误；乙过程可用胰蛋白酶或胶

原蛋白酶处理细胞，B错误；由于人们对细胞所需的营养物质尚未完全研究清楚，

因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，C正确；丁过程

中的细胞因接触抑制而影响细胞增殖，并不会大量死亡，D错误。

考向2围绕干细胞的培养及其应用，考查社会责任

3.（2023・重庆巴蜀中学质检）胚胎干细胞必须从胚胎中获取，但这涉及伦理问题，

因而限制了它在医学上的应用。科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似于

胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（简称iPS细胞）。因为诱导过程无

须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，因此iPS细胞的应用前

景优于胚胎干细胞。如图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图

（c-Myc,K阴、Sox2和Oct3/4等基因与细胞的脱分化有关）。回答下列问题：

c-Myc、Klf4、Sox2、Oct3/4

成纤维细胞类似胚胎干细胞

iPS细胞

造血

肌细胞干细胞

脂肪细胞胰岛B细胞

神经细胞

⑴在对成纤维细胞进行培养时，常用胰蛋白酶处理使之分散成单个细胞，这说

明细胞间的物质为,（填“能”或“不能”）用胃蛋白酶处理成

纤维细胞，原因是____________________________________________________

（2）在培养iPS细胞的过程中，培养基中应含有细胞所需的各种营养物质，并定期

更换培养液。定期更换培养液的目的是____________________________________

O

（3）过程③④为iPS细胞提供的条件不同，分化得到的细胞不同，可知细胞分化是

的结果。若iPS细胞来源于病人自身体细胞的诱导，

再将其分化出的细胞移入患者体内的优势是

O

（4）如果诱导iPS细胞定向分化为原始生殖细胞，该技术可能的应用是

答案（1）蛋白质不能多数动物细胞培养的适宜pH为7.2〜7.4,胃蛋白酶在

此环境中变性失活（2）清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害

⑶基因与环境共同作用避免了免疫排斥问题（4）解决不育问题

考点二动物细胞融合技术与单克隆抗体

L基础’精细梳理夯实必备知识

1.动物细胞融合技术

薪G.动物细胞融合技术就是使两个或多个动物

细胞结合形成一个细胞的技术

PEG融合法、电融合法、生造遒固选导

懑-达至引物知胞符有的融令方/

细胞膜具有流动性

(^g)-形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的

单核细胞,称为杂交细胞

突破了直!生杂交的局限，使远缘杂交成为

年出可能。成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿

色夕瘤和培育生物新品种等的重要手段，为制

造单克隆抗体开辟了新途径

2.单克隆抗体及其应用

制备过程原理：细胞膜的流动性和细胞增殖

用特定的抗用特定的选择培养

能分泌抗体，

原对小鼠进基进行筛选:在该培

行免疫，并识别并特异养基上，未融合的亲

从该小鼠的本细胞和融合的具

性结合病原

感中得到能有同种核的细胞都

产生特定抗体，但不能迅会死亡，只有融合

的杂交瘤细胞才能

体的B淋巴速大量增殖

细胞生长

-----o------------o-------

多种杂交细胞

注射特定多种B淋

巴细以诱导就

的抗原

公…®—

(ft®

培养骨髓将骨髓瘤细胞

.,一骨髓瘤细胞；

瘤细胞与B淋巴细胞

融合\

----(5----

能在体外大诱导融合的方法有PEG体现了细

量增殖，但不融合法、电融合法和灭胞膜的流

能产生抗体活病毒诱导法等动性

对上述经选择培单克隆抗体的

将抗体检测

养的杂交瘤细胞应用:①作为诊

呈阳性的杂

进行克隆化培养断试剂，在多

交瘤细胞在

和抗体检测,经种疾病的诊断

体外条件下

多次筛选，就可和病原体鉴定

大规模培养,

获得足够数量的中发挥作用；

或注射到小

能分泌所需抗体②用于运载药

鼠腹腔内增殖

的细胞物和治疗疾病

体外培养

抗体检测呈阳正.里克隆

性的杂交瘤细,抗体

胞（分泌的抗体，疱皤识别抗原的

力微基导,与要臾

林原先史H■牛性

掂令，并可大置

杂交瘤细胞（既能迅速大涮各

量增殖，又能产生抗体）

-..”

小鼠体内培养的优点：腹

从细胞培养液或小

水中抗体浓度高、产量大,

鼠腹水中获取大量

不需要制备培养基和无菌

的单克隆抗体

操作等

名师解读

①用特定抗原对小鼠进行免疫的原因：

B淋巴细胞栗经过免疫过程，即接触抗原，增殖分化为有特异性免疫功能的B

淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际

上是经过特定抗原免疫的B淋巴细胞。

②杂交细胞：

在诱导因素的作用下进行细胞的诱导融合，形成的杂交细胞有多种，若仅考虑两

两融合的情况，形成的杂交细胞有三种，AA型、BB型、AB型。只有AB型才

是我们所需要的杂交细胞，所以需要用选择培养基进行筛选。

③两次筛选的目的：

第一次是在诱导融合之后，利用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。第二次是

对上述杂交瘤细胞进行筛选，利用96孔板培养，采用专一抗体检测的方法筛选

出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞。

.精准突破强化关键能力

【情境推理・探究】

1.制备的单克隆抗体在临床上不能直接用于人体，还需要对抗体进行人源化，即

对鼠源单克隆抗体进行改造，使其大部分氨基酸序列为人源序列所替代，该过程

的意义是。

提示鼠源单克隆抗体对人而言可能是异种抗原，经人源化后能保留抗体的特异

性，降低其异源性

2.dMAb技术是一种通过DNA编码产生单克隆抗体的技术，比传统的单克隆抗

体制备方法有更多的发展潜力。下图是dMAb技术在埃博拉病毒感染疾病的临

床研究中的操作流程。

：目的目的

佟吉构iQ基因1基因2

提取《工一何建一。

嚏博拉病毒病

绮构田重组质粒

患者骨骼肌

埃博拉病

（细胞）

毒病幸存者

进入血液卜卜F

埃博拉病

毒病患者

存活与埃博拉病毒结合单克隆抗体

与传统利用杂交瘤细胞产生单克隆抗体的技术相比，dMAb技术在抗体的制备上

有何优势？（请列举两点）________________________________________________

提示抗体的产生在生物体内进行，不需要进行细胞体外培养；产生抗体的细胞

种类不局限于免疫细胞（浆细胞）；可制备成DNA“疫苗”，便于存储和运输；抗

体直接由DNA编码产生，省去抗原刺激免疫细胞、细胞融合和筛选的步骤

3.请根据以下信息，设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中筛选出杂交瘤细

胞，并写出其依据的原理。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途

径能被氨基喋吟阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂

增殖。小鼠骨髓瘤细胞中尽管只有D途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞

在试管中混合，加入聚乙二醇促融，获得杂种细胞。

提示为了筛选出杂交瘤细胞，除去其他细胞，可向培养液中加入氨基喋吟，收

集增殖的细胞，因为加入氨基喋吟后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的

骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合

后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。

典例/遁虫浮研_________提升学科素养

考向结合单克隆抗体的制备及应用，考查科学探究能力

1.（2022•山东卷，15）如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子,

在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是

（）

抗体1抗体2抗体3

A.双抗可同时与2种抗原结合

B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞

C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原

D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞

答案D

解析根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2种抗原结

合，A正确；根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白

类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的作用，B正确；由于双抗是在两种

不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成的单抗，自体

偶联后重新偶联制备成的，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的

2种抗原来进行抗原一抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C正确；同时注射2

种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D

错误。

2.（2023・中原名校联盟）S蛋白是新冠病毒表面的一种抗原蛋白，能引起机体的特

异性免疫反应。下图是国产腺病毒载体疫苗的生产流程，该疫苗可以有效预防新

冠病毒感染。回答下列问题：

新冠病毒重组到腺转染到扩增携带S蛋白基

s蛋白基因病毒载体细胞培养、因的非复制型

基因组纯化重组腺病毒

⑴构建重组腺病毒载体基因组需要用到的酶是。培养扩增细

胞时，细胞常出现贴壁生长现象，分瓶前应

⑵腺病毒疫苗进入人体后，S蛋白基因利用人体细胞的蛋白质表达系统指导S

蛋白的合成，其过程是_____________________________________________________

（用文字和箭头表示）。

⑶新冠抗体是人体产生的能直接攻击新冠病毒的蛋白质，直接给患者注射抗体

能起到很好的治疗效果。一般可以通过、细胞培养和蛋白质提取技术制

备单克隆抗体。若要制备针对新冠病毒的单克隆抗体，需要用多次注射

小鼠，之后再从小鼠脾脏中分离出，与小鼠骨髓瘤细胞共同制备杂交瘤

细胞。要得到满足生产需要的杂交瘤细胞至少需要筛选次。

答案（1）限制酶和DNA连接酶用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分散细胞，并

加入新培养液配成细胞悬液（2）S蛋白DNA装适mRNA鳍岷S蛋白（3）（动

物）细胞融合S蛋白已免疫的B淋巴细胞2

考点三动物体细胞核移植技术和克隆动物

「基础•精细梳理夯实必备知识

1.动物细胞核移植技术

动物一个细胞的细胞核

去掉细胞核的卵母细胞

重新组合的细胞发育成断胚胎，继而

发育成动物个体

动物体细胞核具有全能性

-胚胎细胞核移植和体细胞核移植

名师解读

动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易；而动物体细胞分化程度高，表

现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。

2.体细胞核移植的过程

从屠宰场收集牛［庖产奶牛（供体））

卵巢，采集卵母细

胞,在体外培养到9-'从供体高产奶

MII期牛身体的某一

［部位（如耳）上

通过显微操作/［取体细胞，进行

去核培养

壬*纳胞机保证

无窿利物的核遗传舞、.—4细胞培养）

物索金钟来自堤有

处吁Mil期的灯母相胞,

优赏性状的动物的犯胞核的往里京立第一

舜知胞板林，在去核的同附连

同写一枫林一并去呼

保证传■核不被破坏，操作也方便

将供体细胞注入去核的卵母细胞

京用去核歼母犯胞作为馁,林绅胞的原a:

,［①林耙大、&操作；②曹系物族丰富；

③名有激鼠相胞核全能性表达的物族

通过电融合法使两细胞融合，供

体核进入卵母细胞，形成重构胚

融合的原理主纲胞膜理有一定的流沙性

用物理或化学方法（如电刺激、Ca?+

载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）

--一-激活重构胚，使其完成细胞分裂和

|发育进程

与I将胚胎移入受仗«弋孕）母牛体内

生出与供体奶牛遗传物质基本相同

的犊牛

4克隆至物细胞孩只莱百做张,其墓

画画写很菊丽…7篇吁无性生殖

1降动物的性状与偌林不完全相同

的原因：

°①无降渺物的彼胞加逢桂物加来自

堂林卯母知胞的相胞.

②生物的性状不仅与应传物质洵失，

还食环境都响

3.体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题

加速家备遗传改良进程，促进优良畜

畜牧业

群繁育

①作为生物反应器生产医用蛋白

②转基因克隆动物的细胞、组织和

刖器官可以用于异种移植

京医药

卫生③人核移植胚胎干细胞经过诱导分

化形成相应的细胞、组织或器官，可

用于器官移植

保护濒

增加濒危物种的存活数量

危物种

①成功率非常低;

②绝大多数克隆动物存在健屡问题，表现出

遗传和生理缺陷

•精准突破强化关键能力

【情境推理・探究】

1.若通过核移植等技术获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质

的角度分析其原因是。

提示卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响。

2.科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑系统，成功改造了狒猴基因组中与某病症（Z

症）相关的SHANK3基因，获得了Z症狒猴。由此技术获得的Z症猿猴，可通过

体细胞核移植技术得到克隆Z症狒猴，请写出基本程序（用流程图表示）。

提示

z症舞猴的

体细胞核L核移植后一重构胚「弋孕」症

去核厂的细胞欷猴秣猴

卵母细胞

3.2018年，中国科学家成功培育全球首个体细胞克隆猴“中中”和“华华”。克

隆猴的成功为阿尔茨海默症、自闭症等脑疾病以及免疫缺陷、肿瘤等疾病机理研

究、干预、诊治带来前所未有的光明前景。与以往用普通猴子做实验相比，克隆

猴作为实验动物模型的两大优势在哪里？

提示一是体细胞克隆猴遗传背景相同，避免个体间差异对实验的干扰，大大减

少实验动物的使用数量；二是体细胞克隆猴制备时间缩短，基因编辑等可在体外

培养的细胞进行。

典例/遁心卷研__________提升学科素养

考向结合动物核移植技术与克隆动物，考查社会责任

1.（2023•山东潍坊期末）研究人员采用体细胞克隆技术培育克隆羊，其操作流程如

图所示。下列叙述正确的是（）

A.X不能直接发育为个体的原因是细胞中的遗传物质不能表达

B.重组细胞要进行分裂和发育需经振荡或用灭活的病毒、PEG等激活

C.早期胚胎在丙体内能正常孕育是因为胚胎可与母体建立正常的生理和组织联

系

D.经培育得到的丁羊，其细胞内的遗传物质与甲完全相同

答案C

解析X不能直接发育为个体的原因是动物体细胞表现全能性十分困难，A错

误；重组细胞要进行分裂和发育需用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙

醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活，B错误；经培育得到的丁羊，其细胞核遗传物

质来自甲，而细胞质遗传物质大部分来自乙，因此其细胞内的遗传物质与甲不完

全相同，D错误。

2.（2023•山东聊城期中）“中中”和“华华”是两只在我国出生的克隆狒猴，它们

也是国际上首例利用体细胞克隆技术获得的非人灵长类动物。如图表示培育“中

中”和“华华”的流程。下列相关叙述正确的是（）

A.图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等

B.这两只克隆狮猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎

C.融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件

D.利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猿猴的难度更大些

答案C

解析图示过程包括核移植和动物细胞培养等技术，没有干细胞移植技术，A错

误；这两只克隆獗猴是通过核移植、胚胎移植产生的，没有用到受精卵，B错误;

胚胎干细胞的全能性比体细胞的全能性高，所以利用A猴的胚胎干细胞核移植

获得克隆獗猴的难度要小些，D错误。

重温真题经典再现

1.（2020•天津卷，1）在克隆哺乳动物过程中，通常作为核移植受体细胞的是去核

的（）

A.卵原细胞B.初级卵母细胞

C.次级卵母细胞D.卵细胞

答案C

解析克隆哺乳动物时，一般将动物的一个体细胞的细胞核移入到一个去掉细胞

核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动

物个体。通常作为核移植受体细胞的是去核的次级卵母细胞，C正确。

2.（2021・辽宁卷，13）下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，

有关叙述正确的是（）

重

代

组

孕

移

胚

丙

一

胎

牛

植¥

取

卸

代

」

A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定

B.过程①需要提供95%空气和5%C02的混合气体

C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理

D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植

答案B

解析图示过程为体细胞克隆过程，取甲牛体细胞，对处于减数第二次分裂中期

的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的重组细胞激活后培养得到早期

胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。后代丁的细胞核中的遗传物质主要来

自甲，细胞质中的遗传物质主要来自于乙，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质

共同决定，A错误；动物细胞培养中需要提供95%空气(保证细胞的有氧呼吸)和

5%C02(维持培养液的pH)的混合气体，B正确；过程②常使用显微操作去核法

对卵母细胞进行处理，C错误；过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑藕胚

后移植，D错误。

3.(2021・江苏卷，11)下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，错误的是

()

A.细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质

B.早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体

C.猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴

D.将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞

答案D

解析我国利用核移植技术成功培育出克隆猴“中中”和“华华”，C正确；将

骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B

细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，D错误。

4.(2020•全国卷I,38)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材

料设计了以下实验流程。

制备单细胞悬液

杂

融

筛选交筛选2

小鼠1B淋巴1能产生抗病

合

甲「A细胞।瘤

细毒A的单克

骨髓瘤］细

胞

胞隆抗体的杂

细胞交瘤细胞

回答下列问题：

(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A,该处理的目的是

(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：

(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中

筛选1所采用的培养基属于，使用该培养基进行细胞培养的结果是

图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是

（4）若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法

有_________________________________________________________________________

____________________________________________________________（答出2点即可）。

答案（1）诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞（2）取小鼠甲脾

脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液

（3）选择培养基只有杂交瘤细胞能够生存抗原与抗体的结合具有特异性

（4）将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养

解析（1）实验前给小鼠甲注射病毒A,其目的是刺激机体发生免疫反应，从而

产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞。（2）制备单细胞悬液的主要实验步骤:

从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这

样组织就会分散成单个细胞，然后用培养液将分散的细胞稀释制成单细胞悬液。

（3）图中筛选1采用特定的选择培养基，在该培养基上，未融合的细胞和融合的

具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞（杂交瘤细胞）才能生存。图中

筛选2含多次筛选，利用抗原与抗体特异性结合的原理，就可获得能分泌所需抗

体的杂交瘤细胞。（4）要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖,

可将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。

限时强化练

（时间:30分钟）

【对点强化】

考点一动物细胞培养

1.（2023•广东惠州调研）动物细胞培养的基本过程如图所示，下列叙述正确的是

（）

皮肤组织一里一皮肤细胞一乙一细胞培养1—丙一细胞培养2

A.应选择幼龄动物的皮肤组织进行动物细胞培养

B.甲过程需要用纤维素酶和果胶酶处理

C.丙过程是传代培养，所有细胞贴壁生长

D.乙过程是原代培养，一般不会出现接触抑制现象

答案A

解析应选择幼龄动物的皮肤组织进行动物细胞培养，因为幼龄动物细胞分裂能

力较强，A正确；甲过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，B错误；丙过程是

传代培养，体外培养的动物细胞除贴壁生长外，有的细胞还可以悬浮在培养液中

生长增殖，C错误；原代培养会出现接触抑制现象，D错误。

2.（2023•河北石家庄期中）美国和日本的两个研究小组分别宣布，其研究人员成功

地将人体皮肤细胞改造成了几乎可以和胚胎干细胞相媲美的诱导多能干细胞

—iPS细胞，人类“iPS细胞”可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下有

关“iPS细胞”的说法正确的是（）

A.“iPS细胞”分化为人体多种组织细胞的过程体现了细胞的全能性

B.“iPS细胞”既可分化形成神经元，也可用于分化形成心肌细胞，说明“iPS

细胞”在分裂时很容易发生突变

C.“iPS细胞”有细胞周期，它分化形成的神经细胞没有细胞周期

D.“iPS细胞”只能分化成人体多种组织细胞，是因为它不具有人体细胞的全部

遗传物质

答案C

解析全能性的体现需发育为完整的个体或分化成其他各种细胞，A错误；"iPS

细胞”分化为多种细胞是基因的选择性表达的结果，B错误；"iPS细胞”具有

连续分裂能力，有细胞周期，而其分化形成的神经细胞无增殖能力，没有细胞周

期，C正确；“iPS细胞”与人体内其他细胞的遗传物质相同，其只能分化成人

体多种组织细胞是因为其分化能力有限，D错误。

考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体

3.（2023•北京延庆区模拟）抗体一药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与单克隆抗体

结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列表述正确的是（）

A.ADC可通过主动运输进入肿瘤细胞

B.抗体进入细胞后激活溶酶体酶，导致细胞凋亡

C.单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞特异性结合

D.肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，所以不会产生新的蛋白质

答案C

解析据图分析可知，ADC可通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，A错误;据图分

析可知，抗体进入细胞后被溶酶体裂解，释放的药物导致细胞凋亡，B错误；肿

瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，细胞凋亡过程中基因进行选择性表达，因此

会产生新的蛋白质，D错误。

4.（2023•黑龙江黑河市一模）人乳头瘤病毒（HPV）是一种DNA病毒,可诱发细胞癌

变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生。

以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程如下图所示。下列叙述错误的

是（）

小鼠骨髓瘤细胞

将特定的抗...（不能在HAT

原注入小鼠/：：•培养基上生长）杂交瘤

•••.混合并进.