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DB34DB34/T1943—2013猪瘟病毒强毒株与疫苗株鉴别检测套式MethodofdetectionanddifferentiationofvirulentandvaccinestrainsofclassicalswinefevervirusbynestedRT-PCR安徽省质量技术监督局发布I1本标准规定了猪瘟病毒（Classicalswinefevervirus，CSFV）野毒株与疫苗株鉴别检测的套式GB/T27540猪瘟病毒实时荧光RT-PCR检测方法能够引起机体免疫应答，但不能或轻微能使猪产生临床症状的RNA提取试剂，包装瓶用锡箔纸包裹，于4℃~8℃保存。2去离子水中加入0.1％DEPC，37℃作用1h121±2）℃,高压灭菌15min。4.8dNTP（2.5mmol/——套式第二步上游引物F2：5-ACCC——共用下游引物R：5-AAAGTGCTGTTAAAAATGAG3灭菌牙签和0.5mL或1.5mL离心管经（121±2）℃,高压灭菌15min；剪刀、镊子经160℃器中充分研磨，3000g离心15min，取上清液转入离心管中编号备用。号，送实验室。取50mg～100mg待检样品，按1:5倍体积加入DEPC水，于研钵用无菌注射器抽取全血，注入含1/104％EDTA溶液的无菌容器中，充分混匀挑取少许粪便样本于离心管中，加入适量生理盐采集或处理的样品在2℃~8℃条件下保存应不超过24h；若需长期保存，应放置-70℃冰箱，4），），7.1.5于4℃、12000g离心15min（离心），——0.5μLdNTP（10mmol/L）将混合物吹打均匀后，至PCR仪中扩增，条件如下：95

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