2025届上海市宝山区高三生物第一学期期末监测试题含解析

2025届上海市宝山区高三生物第一学期期末监测试题注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型（B）填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2．作答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．如图为某二倍体动物细胞分裂的模式图（不考虑染色体畸变）。下列叙述正确的是（）A．该时期的细胞可以作为制作染色体组型的材料B．该图表示的时期为有丝分裂后期C．若④⑤染色体上不含相同基因座位，则该细胞为次级精母细胞D．若②③染色体含有相同基因座位，且①⑤染色体某基因座位上分别含有A和a基因，造成这种现象的原因不可能是基因重组2．下表中人体不同细胞的寿命和分裂能力不同，以下说法错误的是（）细胞种类小肠上皮细胞癌细胞红细胞白细胞寿命1〜2天不死性120天5〜7天能否分裂能能不能大多数不能A．白细胞的凋亡比红细胞快，这与白细胞吞噬病原体有关B．癌细胞的无限增殖是由正常基因突变为原癌基因引起的C．通常情况下，细胞的分化程度越高，细胞分裂能力越弱D．小肠上皮细胞寿命最短，这与基因控制的凋亡有关3．下列有关细胞的物质基础和结构基础的叙述中，正确的是（）A．细胞中可以找到多糖与其他分子相结合的大分子B．向酶溶液中加入双缩脲试剂，一定能产生紫色反应C．核糖体能合成多种蛋白质，溶酶体能合成多种水解酶D．原核细胞没有线粒体，只能进行无氧呼吸4．下图为一对等位基因控制的某遗传病的家族系谱图。下列叙述正确的是A．若该家族每代都有患者，则该病为显性遗传病B．若该病为常染色体显性遗传病，则图中个体共有3种基因型C．若该病为伴X染色体显性遗传病，则正常情况下，Ⅲ中女性均患病D．若该病致病基因为位于XY染色体同源区段的显性基因，则Ⅲ中可能出现患病男孩5．下列有关植物激素的叙述正确的是（）A．顶端优势的原因是顶芽生长素浓度过高抑制了自身生长B．用一定浓度的秋水仙素或低温处理植物都可以抑制植物有丝分裂后期细胞板形成，从而引起染色体数目加倍C．达尔文通过实验验证：吲哚乙酸在植物向光侧和背光侧分布不均匀是导致向光性的原因D．赤霉素和乙烯可分别促进种子萌发和果实的成熟6．下图1是某遗传病的家系图。图2是图1中4个个体的基因检测结果。下列有关叙述错误的是（）A．该病为伴X染色体隐性遗传B．II3的致病基因来自I2C．II3与一正常人婚配，后代正常的概率是1/2D．该致病基因长度小于正常基因7．下列关于有机物的叙述中，正确的是()A．糖都是细胞内的能源物质 B．核酸中嘌呤数和嘧啶数相等C．磷脂存在于所有的活细胞中 D．细胞内运输K＋和氨基酸的物质都是蛋白质8．（10分）物质X通过细胞膜的运输速率与膜内外浓度差成正比，且不具有载体饱和效应。据此推断物质X进出细胞的方式为（）A．自由扩散 B．主动运输 C．协助扩散 D．胞吞和胞吐二、非选择题9．（10分）请回答下列问题。（1）从微生物所能利用的氮源种类来看，一部分微生物是不需要利用氨基酸作为氮源的，它们能把_____（列举两例）等简单氮源用于合成所需要的一切氨基酸，因而可称为“氨基酸自养型生物”。（2）伊红美蓝培养基可用于饮用水大肠杆菌数目的测定，根据培养基上黑色菌落的数目推测大肠菌的数量。但单位体积饮用水中大肠杆菌数量相对较少，若直接将一定体积的自来水接种到培养基中，培养后可能无法得到菌落或菌落数目太少，可通过“滤膜法”解决这个问题，其操作思路是：_____。稀释涂布平板法和______________________法是测定微生物数量更常用的两种方法。（3）在固定化细胞实验中，明胶、琼脂糖、海藻酸钠等物质能作为包埋细胞载体的原因是______。在工业生产中，细胞的固定化是在严格_____条件下进行的。（4）为探究一种新型碱性纤维素酶去污效能，研究小组进行了不同类型洗衣粉实验，结果如下图。加酶洗衣粉中目前常用的四类酶制剂除纤维素酶外，还有_____（至少答两类）。根据以上实验结果，_____________（能/否）得出对污布类型2的去污力最强是因碱性纤维素酶所致，并说明原因_________。10．（14分）回答下面（一）、（二）两个小题：（一）回答与制果汁、果酒、果醋有关的问题：（1）猕猴桃维生素C含量丰富，有“维C之王”的美誉。利用猕猴桃直接制成的猕猴桃汁较为浑浊，加入______之后，会出现絮状物，说明含有较多的果胶。为获得无色澄清的果汁，需要首先进行________________处理，然后再加入________________，将果胶分解为________________，使果汁澄清，同时提高出汁率。（2）制作出的猕猴桃汁，加入活化的酵母悬液，再加入________________，密封发酵，可以用来制作酒精含量较高、含糖量也高的猕猴桃酒。由于维生素C与2，4-二硝基苯肼作用可形成红色产物，因此若要测定发酵产生的猕猴桃酒中维C的含量，你的方案是________________。（3）家庭制作的猕猴桃酒存放的过程中容易被醋杆菌污染。为防止变酸，你的建议是________________。（答两点）（二）回答下列有关生态工程类型和技术的问题。（1）对城市生活垃圾进行减量化、无害化和资源化处理，将生活垃圾中的有机部分、人畜粪便等转化成优质生态复合肥，是________________技术在城市生态系统中应用的具体体现。该技术能实现物质和能量的多级利用，提高能量的________________。（2）针对我国北方地区，一年只种一茬小麦，热量有余，如果种两茬，则积温不足的问题，可以采用________________技术，除了解决上述问题，该技术还有________________优点。（3）在农村地区，要根据当地的土地资源、水资源等实际情况，合理优化种植业和畜牧业的产业结构。优化过程中需要针对当地的粮油肉蛋奶等的________________，以农业生态系统________________为基础，尽量减少外部的化肥和农药，以求最大的经济效益和________________效应。（4）在矿山废弃地，应该根据当地生态条件，积极发展草业、木业或林业的________________工程。11．（14分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。12．人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。（1）为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。（2）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是_____________（填写字母，单选）。A．人血细胞启动子B．水稻胚乳细胞启动子C．大肠杆菌启动子D．农杆菌启动子（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是____________。（4）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才有活性。与途径Ⅱ相比，选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是____________________________________。（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、D【解析】

据图分析可知：该二倍体细胞图像为后期，有以下可能性：若④⑤和②③（X与Y染色体）为同源染色体，则为有丝分裂后期，若不是同源染色体，则为减数第二次分裂后期。【详解】A、有丝分裂中期的细胞为制作染色体组型较为理想的材料，A错误；B、由以上分析可知，该细胞可能处于有丝分裂后期或减数第二次分裂后期，B错误；C、若④⑤染色体上不含相同基因座位，则其为非同源染色体，此细胞可能处于减数第二次分裂后期，但该生物性别未知，故该细胞可能为次级精母细胞或第一极体，C错误；D、若②③染色体含有相同基因座位，则其为同源染色体（X、Y），此细胞处于有丝分裂后期，①⑤染色体某基因座位上分别含有A和a基因，造成这种现象的原因不可能是基因重组，只能是基因突变，D正确。故选D。【点睛】本题考查有丝分裂与减数分裂过程的辨析，旨在考查考生获取与处理信息的能力，掌握分裂过程是解题关键。2、B【解析】

细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程，实质是基因的选择性表达，最终形成形态和功能不同的组织和细胞。【详解】A、白细胞没有细胞核，功能主要是吞噬病原体，因此更新速度快，A正确；B、癌细胞的无限增殖是由于原癌基因突变为癌基因，以及抑癌基因突变失去功能导致的，B错误；C、通常情况下，细胞的分化程度越高，其全能性就越低，细胞分裂能力就越弱，C正确；D、人体不同组织的细胞寿命不同，是由遗传物质决定，与基因控制的衰老和凋亡有关，D正确。故选B。【点睛】原癌基因主要负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的进程；抑癌基因主要阻止细胞不正常的增殖。细胞癌变的内因是原癌基因和抑癌基因发生突变，导致正常细胞的生长和分裂失控，使得正常细胞变成不受控制、恶性增殖的癌细胞。3、A【解析】

A、细胞膜表面的多糖可以和蛋白质结合形成糖蛋白，A正确；B、向化学本质是蛋白质的酶溶液中加入双缩脲试剂能产生紫色反应，而向化学本质是RNA的酶溶液中加入双缩脲试剂不能产生紫色反应，B错误；C、核糖体能合成多种蛋白质，而溶酶体不能合成多种水解酶，C错误；D、原核细胞中的醋酸菌细胞没有线粒体，但含有与有氧呼吸有关的酶，能进行有氧呼吸，D错误。故选A。4、C【解析】

该图中没有典型的“有中生无或无中生有“典型图谱，可假设不同的遗传方式进行判断，根据遗传图谱分析该图显示的遗传病遗传方式比较多，可能是常染色体显性遗传病、常染色体隐性遗传病、伴X隐性遗传病、伴X显性遗传病。【详解】A、假如控制该病的等位基因是A、a，若该家族每代都有患者，则该病可能为显性遗传病，也可能为隐性遗传病，A项错误。B、若该病为常染色体显性遗传病，则图中个体共有2种基因型，即Aa和aa，B项错误。C、若该病为伴X染色体显性遗传病，根据遗传图可知，Ⅰ-2的基因型是XAXa，Ⅱ-2、Ⅱ-3的基因型均为XAY，所以正常情况下，Ⅲ中女性均患病，C项正确。D、若该病致病基因为位于XY染色体同源区段的显性基因，根据遗传图可知，Ⅰ-2的基因型是XAXa，Ⅱ-2、Ⅱ-3的基因型均为XAYa，所以Ⅲ中不可能出现患病男孩，D项错误。故选C。5、D【解析】

生长素对植物的生长效应表现出两重性，即低浓度促进生长，高浓度抑制生长。各种植物激素并不是孤立地起作用，而是多种激素相互作用共同调节；植物激素的概念：由植物体内产生，能从产生部位运输到作用部位，对植物的生长发育有显著影响的微量有机物。【详解】A、顶端优势是因顶芽产生的生长素积累在侧芽而导致侧芽生长受抑制，A错误；B、用一定浓度的秋水仙素或低温处理植物都可以抑制植物有丝分裂前期纺锤体的形成，B错误；C、达尔文通过实验验证单侧光照射使胚芽鞘的尖端产生某种刺激，当这种刺激传递到下部的伸长区时，会造成背光面比向光面生长快，因而出现向光性弯曲，C错误；D、赤霉素和乙烯分别能促进果实的发育和果实的成熟，D正确。故选D。6、C【解析】

根据图1中Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ4可知该病为隐性遗传病，根据图2中电泳图可知，Ⅱ4长度为1.0的基因属于致病基因，则长度为2.1的为正常基因，据此可知，Ⅰ1只含正常基因，Ⅰ2既含正常基因又含致病基因，所以Ⅱ4的致病基因只来自Ⅰ2，故该病的遗传方式为伴X隐性遗传。Ⅰ2和II3均为携带者。【详解】A、根据上述分析可知，该病为伴X染色体隐性遗传，A正确；B、由于Ⅰ1无致病基因，则Ⅱ3的致病基因来自Ⅰ2，B正确；C、设致病基因为a，Ⅱ3（XAXa）与一正常人（XAY）婚配，后代正常（XA_）的概率是3/4，C错误；D、致病基因长度为1．0，正常基因长度为2．1，前者小于后者，D正确。故选C。【点睛】本题结合图解，考查常见的人类遗传病，要求考生识记几种常见单基因遗传病的类型及特点，能根据图1和图2判断该遗传病的遗传方式及相应个体的基因型，再结合图中信息准确判断各选项。7、C【解析】

核酸包括DNA和RNA两大类，DNA一般为双链结构，RNA一般为单链结构，RNA包括mRNA、rRNA和tRNA三类。【详解】A、纤维素作为细胞内的结构多糖，不参与细胞的能量供应，A错误；B、单链DNA和单链RNA分子中嘌呤数和嘧啶数不一定相等，B错误；C、磷脂是膜结构的组成成分，存在于所有的活细胞中，C正确；D、细胞内翻译过程中搬运氨基酸的是tRNA，不是蛋白质，D错误。故选C。8、A【解析】

物质跨膜运输方式：比较项目离子和小分子物质大分子和颗粒性物质被动运输主动运输胞吞胞吐自由扩散协助扩散运输方向高浓度→低浓度高浓度→低浓度低浓度→高浓度细胞外→细胞内细胞内→细胞外特点不需要载体、不消耗能量需要载体、不消耗能量需要载体、消耗能量不需要载体、消耗能量不需要载体、消耗能量影响因素浓度差浓度差、载体种类和数量能量、载体种类和数量能量、温度能量、温度【详解】物质通过自由扩散进出细胞时，不需要载体蛋白协助，不需要消耗能量，运输速率与膜内外浓度差成正比，且不具有载体饱和效应，A正确。故选A。【点睛】本题考查物质出入细胞方式的相关知识，旨在考查考生的理解能力二、非选择题9、尿素、铵盐、硝酸盐、氮气将已知体积的水用滤膜过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养显微镜直接计数这些物质是不溶于水的多孔性材料无菌蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶不能除污布类型外，洗衣粉类型这一变量也会影响去污力（不同类型洗衣粉影响碱性纤维素酶的去污力）【解析】

统计菌落数目的方法：显微镜直接计数法，间接计数法（活菌计数法）；分析题图：若不考虑是否加酶，图中自变量有三种，即洗衣粉的种类、污布的种类及酶用量。【详解】（1）微生物的培养需要氮源，从微生物所能利用的氮源种类来看，一部分微生物是不需要利用氨基酸作为氮源的，它们能把等尿素、铵盐、硝酸盐、氮气等简单氮源用于合成所需要的一切氨基酸；

（2）“滤膜法”的操作思路是：将已知体积的水用滤膜过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养；稀释涂布平板法和显微镜直接计数法是测定微生物数量常用的两种方法；

（3）在固定化细胞实验中，明胶、琼脂糖、海藻酸钠等物质能作为包埋细胞载体的原因是这些物质是不溶于水的多孔性材料，便于细胞的包埋；在工业生产中，细胞的固定化是在严格无菌条件下进行的；

（4）加酶洗衣粉中目前常用的四类酶制剂，除纤维素酶外，还有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶；据图分析可知，图中自变量有三种，即洗衣粉的种类、污布的种类及酶用量，故由实验结果不能得出碱性纤维素酶对污布类型2的去污力最强，其原因是除污布类型外，洗衣粉类型这一变量也会影响去污力。【点睛】本题考查微生物培养基的成分、微生物数量的测定方法和酶活性的测定，要求考生识记统计菌落数目常用的两种方法，明确酶活性测定的方法，再结合所学的知识准确作答。10、95%的乙醇脱色果胶酶和果胶甲酯酶半乳糖醛酸一定量蔗糖对样品稀释，加入2，4-二硝基苯肼，然后用光电比色法测出光密度值，再利用预先制作的标准曲线算出样品中的维生素含量细口瓶保存、酒装满、瓶口密封物质的良性循环利用率套种充分利用土地和资源社会需求内部物质良性循环生态生态恢复【解析】

1、果胶酶的作用：能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，也使果汁变得澄清。

2、农业生态工程是应用农业生态系统中物种共生与物质再生产的原理，多种成份相互协调和促进的功能原理，以及物质和能量多层次、多途径利用和转化的原理，采用系统工程的最优化方法而设计的分层次多级别物质的农业生态系统。3、农业生态工程的主要技术：①物质的良性循环技术；②洁净可再生的新能源开发技术：太阳能、沼气、风能、潮汐能、水电能；③种植业和畜牧业合理优化技术。【详解】（一）（1）利用猕猴桃直接制成的猕猴桃汁较为浑浊，加入95%的乙醇之后，会出现絮状物，说明含有较多的果胶。猕猴桃酒中的光合色素含量较高，为获得无色澄清的果汁，需要首先进行脱色处理，然后再加入果胶酶和果胶甲酯酶，将果胶分解为可溶性的半乳糖醛酸，使果汁澄清，同时提高出汁率。（2）制作出的猕猴桃汁，加入活化的酵母悬液，再加入一定量蔗糖，加少量蔗糖的目的是使酵母菌迅速发生作用，并提高果酒的酒精度或甜度（含糖量）。由于维生素C与2，4-二硝基苯肼作用可形成红色产物，因此若要测定发酵产生的猕猴桃酒中维C的含量，可对样品稀释，加入2，4-二硝基苯肼，然后用光电比色法测出光密度值，再利用预先制作的标准曲线算出样品中的维生素含量。（3）醋杆菌为需氧型，在缺氧的环境下不能生存，家庭制作的猕猴桃酒存放的过程中容易被醋杆菌污染，为防止变酸，可用细口瓶保存或将酒装满或将瓶口密封，保证容器内为无氧环境，即可防止醋杆菌污染。（二）（1）对城市生活垃圾进行减量化、无害化和资源化处理，将生活垃圾中的有机部分、人畜粪便等转化成优质生态复合肥，是物质的良性循环（物质循环利用）​技术在城市生态系统中应用的具体体现。该技术能实现物质和能量的多级利用，提高能量的利用率。（2）针对我国北方地区，一年只种一茬小麦，热量有余，如果种两茬，则积温不足的问题，可以采用套种技术，提高农作物对阳光等环境资源的利用率。所以除了解决上述问题，该技术还有充分利用土地和资源的优点。（3）在农村地区，要根据当地的土地资源、水资源等实际情况，合理优化种植业和畜牧业的产业结构。优化过程中需要针对当地的粮油肉蛋奶等的社会需求，以农业生态系统内部物质良性循环为基础，尽量减少外部的化肥和农药，以求最大的经济效益和生态效应。（4）生态恢复工程指通过研究生态系统退化的原因，利用生态学、系统学、工程学的方法实现退化生态系统恢复与重建，以使一个生态系统恢复到较接近其受干扰前的状态的工程。所以在矿山废弃地，应该根据当地生态条件，积极发展草业、木业或林业的生态恢复工程，使其尽快恢复到受干扰前的状态。【点睛】本题考查果酒、果醋的制作和生态工程的相关知识，意在考查考生对所学知识的综合运用能力。11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××