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工业菌种（二）工业生产常用的微生物及要求工业菌种的选育工业菌种的保藏、衰退与复壮生产菌种的改良种子的扩大培养优良菌种选育

选种:从自然界或生产中选择符合生产要求的菌种。

菌种选育

育种：用人工方法引起菌种变异，再筛选出符合生产要求的菌种。（一）菌种选育方法1.自然选育:生产中根据菌种自发突变的特点进行菌种筛选的过程。优良菌种选育方法：1.通过表现形态来淘汰不良菌株2.通过目的代谢物产量考察3.进行遗传基因型纯度试验4.传代的稳定性试验

常采用单菌落分离法。

优良菌种选育2.诱变育种：用各种物理、化学的因素人工诱发基因突变进行的筛选，称为诱变育种。诱变剂：能够提高生物体突变频率的物质称为诱变剂

常用诱变剂

{

物理：紫外，快中子化学：硫酸二乙酯，亚硝基胍优良菌种选育诱变原理：

点突变:碱基对置换和移码。染色体畸变:在染色体上发生大的变化如断裂、重复、缺失、易位和染色体数目变化等结构变化。突变优良菌种选育优良菌种选育诱变育种工作程序优良菌种选育3.体内基因重组育种：指重组过程发生在细胞内。即采用转化、转导、接合和原生质体融合等遗传学方法和技术，使微生物细胞内发生基因重组（染色体或基因的重新组合），改变遗传物质的成分、数量和结构，从而获得优良菌株的一种育种方法。优良菌种选育4.DNA体外重组技术（基因工程技术）：根据需要用人工方法取得供体DNA上的基因，在体外重组于载体DNA上，再转移入受体细胞使其复制、转录和翻译，表达出供体原有的遗传性状。菌种保藏目的保证菌种不发生遗传变异、无污染和保持活力。核心人工创造条件（如低温、干燥、缺氧、和缺乏营养物质），使菌种的代谢活动处于不活动状态。方法斜面低温保藏法、石蜡油封保藏法、砂土保藏法、冷冻干燥法、液氮超低温冻结法菌种保藏酵母菌:一般采用定期移植斜面低温保藏法，将酵母接种于麦芽汁琼脂斜面上，放置低温处，每隔几个月移植一次。也可采用石蜡油封藏法。

霉菌：采用砂土管保藏法。此法特别适宜于产孢子或芽孢的微生物。细菌和放线菌:

一般细菌采用冻干法为佳，放线菌可采用冻干法和砂土管法保藏。菌种退化及其防治菌种退化:指在较长时期传代保藏后，菌株的一个或多个生理性状和形态特征逐渐减退或消失的现象。1.菌种退化的原因：保藏方法不妥、保藏操作不当、传代不当、培养基不适、回复突变。回复突变：凡是变异菌因遗传组成的自身修复，原有的遗传障碍解除，导致代谢途径再变化，恢复原有特性，表现出已获得的优良性状退化。菌种退化及其防治2.防止菌种退化的措施：从菌种选育方法上考虑（1）进行充分的后培养及分离纯化；（2）增加突变位点，减少基因回复突变的几率。从菌种保藏方式上考虑（1）尽量减少传代次数（2）选择适宜的保藏培养基菌种退化及其防治2.防止菌种退化的措施：从菌种培养适宜条件上考虑（1）结构类似物抗性菌株在保藏培养基中应添加相应药物及时淘汰回复突变细胞。（2）基因工程菌添加抗生素于培养

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