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文档简介
DB34DB34/T3121—2018技术规程TechnicalRegulationsofPCRAssayforDetectionofFowlAviadenovirusSerotype4NucleicAcid安徽省质量技术监督局发布I1）：PCR（PolymeraseChai）：25.1510×ExTaqbuffe根据GenBank登录的FAdV-4(GenBank:GU188428.1)Hexon基因核苷酸序列，设计用于扩增下游引物P2：FAdV-4（5'-TCGCAGGAAGTCGTAGTGGA-3'扩增核酸片段大小为951bp。如果制备的核酸模板中有FAdV-4，PCR产物电泳后在951bp处出现条带，即为阳性，反之即为3），制备的样品在2℃-8℃条件下保存应不超过24h，如需长期保存应置-70℃以下，并应避免反复8.2.3每管加入待检样品（已研磨好的被检样品上清，阳性对照样品和阴性对照样品）取出离心管，室温融化，4℃,20000g离心15min。8.2.7取出离心管，用50μL灭从ExTaq试剂盒中取出相应的10×ExTaqbuffer(Mg2+plus)、ExTaq酶和dNTPMixture，同时421ExTaq酶2μL样品加入配制好的琼脂糖凝胶中，同时加入DL2000DNAMarker，之后在电压100V下，经15~5样本对应的泳道在951bp位置处出现明显的条带，表示样品中存在Ⅰ群血清4型禽腺病毒核酸6A.1.320％十二烷基硫酸钠（SDS）溶液（pH71mol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸（Tris-HCLpH8.0）2mL0.5mol/L乙二铵四乙酸二钠（EDTA）7A.550×TAE（三羟甲基氨基甲烷-乙酸）电泳缓冲液）（0.2mol/L磷酸氢二钠水溶液：磷酸氢二钠（Na2HPO4*7H2O）53.A.6.30.01mol/L、pH7.2磷酸盐缓
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