人教版高中生物选修一知识点总结（不全）

微生物的培养技术及应用

一、微生物的培养基

1、概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

2,营养成分

（1）确定原则：根据微生物的需要。

（2）主要营养物质：碳源、氮源、水和无机盐。

（3）其他条件:PH、特殊营养和氧气。

3、种类

（1）根据物理性质可分液体培养基、固体培养基和半固体培养基，固体培养基和液体培养

基的区别是是否添加琼脂等凝固剂。

（2）根据功能可分为选择培养基和鉴别培养基，区别如表：

种类制备方法用途举例

选择培养基培养基中加入某些化从众多微生物中分离加入青霉素分离得到

学物质或某种特殊的所需的微生物酵母菌和霉菌

营养物质

鉴别培养基培养基中加入某种指鉴别不同种类的微生用伊红美蓝培养基鉴

示剂或化学药品物别大肠杆菌（菌落呈

黑色）

4、培养基的制备

步骤：计算、称量、溶化、调PH、灭菌、倒平板

思考1、培养基用什么方法灭菌？培养基灭菌后需要立即进行倒平板操作吗？

提示1、培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌。为防止烫伤，培养基需要冷却到50°C左右才能

用来倒平板。

思考2、倒平板为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

提示2、通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

思考3、平板冷凝后为什么要将平板倒置？

提示3、可以防止冷凝的水滴污染培养基，冲散菌落。

二、无菌技术

项目条件结果常用方法应用范围

消毒较为温和的物理仅杀死物体表面煮沸消毒法日常用品

或化学方法或内部的部分微

巴氏消毒法不耐高温的液体

生物

（如牛奶）

化学药剂消毒法用酒精擦拭双手

用氯气消毒水源

项目条件结果常用方法应用范围

灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所灼烧灭菌接种工具

有的微生物，包

干热灭菌玻璃器皿、金属

括芽抱和抱子

用具

高压蒸汽灭菌法培养基及容器

三、大肠杆菌的纯化培养

1、原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个菌落，这个菌落就是纯

化的细菌菌落。

2、两种微生物纯化培养的方法

项目平板划线法稀释涂布平板法

纯化原理通过连续划线实现将菌液进行一系列的梯度稀

释和涂布平板操作实现

注意事项每次划线前后均需灼烧接种稀释度要足够高

环

菌体获取在具有显著的菌落特征的区从适宜稀释度的平板上的菌

域菌落中挑取菌体落中挑取菌体

优点可以根据菌落的特点获得某既可以获得单细胞菌落，又能

种微生物的单细胞菌落对微生物计数

缺点不能对微生物计数操作复杂需要涂布多个平板

3、菌种的保藏方法

（1）临时保藏法：对于频繁使用的菌种，先接种到固体斜面培养基上培养，然后放入4℃

的冰箱中保藏。

（2）甘油管藏法：对于需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，混合后放在

-20℃冷冻冰箱中保存。

思考1、微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗？

提示1、不是。微生物的接种方法还包括斜面接种、刺穿接种等。微生物接种的核心是防止

杂菌的污染，保证培养物的纯度。

思考2、平板划线法中有那几次灼烧接种环？其目的相同吗？

灼烧时间目的

取菌种前杀死接种环上原有微生物

每次划线前杀死上次划线后接种环上残留菌种，使本

次划线的菌种直接来自上次划线末端，使

每次划线菌种数目减少，达到分离菌株的

目的。

接种结束后杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染

环境和感染操作者

思考3、在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？

提示3、以免接种环温度太高，杀死菌种。

思考4、在做第二次及其以后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？目

的是什么?

提示4、划线后，线条末端细菌的数目要比线条起始处少，每次从上一次划线的末端开始，

能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

这样做的目的是将聚集的菌落逐步分散以便获得单个菌落。

四、微生物的选择培养与计数

1、微生物的选择培养

原理人为提供有利于目的菌种生长的条件，同时抑制其他微生物的生长

实例①培养基中加入青霉素分离得到霉菌和酵母菌

②培养基中加入高浓度食用盐用于分离金黄色葡萄球菌

③培养基放在高温环境中培养能得到耐高温的微生物

④以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离能分解尿素的细菌

⑤以纤维素作为唯一碳源的培养基用于分离纤维素分解菌

⑥以石油作为唯一碳源的培养基用于分离能消除石油污染的微生物

2、微生物的计数方法

(1)显微镜直接计数法:

原理利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计数一定容积的样品中微生物

的数量

方法用计数板计数

缺点不能区分死菌与活菌而使计数结果偏大

(2)间接计数法(活菌计数法)：

原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中

的一个活菌落，通过统计平板上的菌落数，计算样品中的活菌数

计算公式每ml样品中的菌落数=(c/v)xM,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均

菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml),M代表稀释倍数。

操作设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果的准确，一般选

择菌落数在30~300的平板进行计数

缺点当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计结果

可能偏小

3、土壤中分解尿素的细菌的计数

实验原理(1)能合成版酶的细菌才能分解尿素

(2)配置以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌

数量统计(1)直接计数法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板)

(2)间接计数法：稀释涂布平板法

实验流程土壤取样---->配置土壤溶液和制备培养基----->系列稀释

涂布平板与培养----->菌落计数

传统发酵技术与发酵工程

一、果醋与果酒的制作

1、制作原理与条件

果酒制作果醋制作

菌种酵母菌醋酸菌

原理无氧呼吸产生酒精(1)。2、糖源充足：糖—>醋酸

(2)有。2、缺少糖源：乙醇—乙醛

醋酸

条温度酒精发酵18-25℃最适为30-35℃

件

空气前期：需氧需充足的氧气

后期：不需氧

时间10-12d7-8d

2、制作流程

3、果酒、果醋发酵装置

(1)通用装置

装置图结构目的

进气「充气口醋酸发酵时连接充气泵，

输入无菌空气；制酒时关

排气口

闭充气口

排气口用来排出C0

月2

-超J——

出料口£_-•,■长而弯曲的胶管防止空气中微生物的污染

图1出料口便于取料，及时检测发酵

进行的情况

（2）装置分析

a、因酵母菌的繁殖需要空气，醋酸菌是好氧菌，所以在果酒制作的前期和果醋制作的

整个过程中都需氧。因酵母菌产生酒精是在无氧条件下进行的，故应控制充入氧的量，应在

充气口设置开关。

b、由于酒精发酵过程中产生CO2,因此又需设排气口；为防止空气中微生物的污染，排气

口应连接一个长而弯的胶管。

C、因要对发酵的情况进行及时监测，故应设置出料口便于取料。

思考1、你认为应该先冲洗葡萄还是先出去枝梗？为什么？

提示1、应该先冲洗葡萄然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污

染的机会。

思考2、你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？

提示2、要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁机、发酵装置要清洗干净，并进行酒精消毒；每

次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。

思考3、制葡萄酒时，为什么要将温度控制在18~25支?制葡萄醋时，为什么要将温度控制在

30~35℃?

提示3、温度是酵母菌、醋酸菌生长和发酵的重要条件。20。（：左右最适合酵母菌的繁殖和发

酵，因此制葡萄酒时一般将温度控制在18~25。（：；醋酸菌的最适生长温度为30~35度，因此

制葡萄醋时要将温度控制在30~35。口

思考4、为什么葡萄酒常呈深红色？

提示4、在发酵过程中，随着酒精度数的提高，红葡萄皮的色素进入发酵液，使葡萄酒呈深

红色。

二、腐乳的制作

1、菌种：主要是霉菌

2、原理

雷白酶

（1）蛋白质_________________>肽、氨基酸

（1）脂肪脂肪