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文档简介
临床分子生物学检验技术试题及答案
1、分子生物学检验技术:是以核酸或蛋白质为分析材料,
通过分析基因的结构、表达的变化和由此而导致的基因功能
的改变,为疾病的研究和诊断提供更准确、更科学的信息和
依据的一门学科。
2、请说明分子生物学检验技术在临床试验诊断中的应用。
(1)感染性微生物的检测。如:用PCR技术进行甲型肝炎病
毒的检测、乙型肝炎病毒的检测和解腺腺原体的检测等。
(2)基因突变的检测。如:用PCR一限制性片段长度多态性
(RFLP)技术检测地中海贫血基因突变。
(3)法医学检测。如:用PCR微卫星检测技术进行亲子关系
的鉴定和个体识别。
(4)基因异常表达的检测。如:用cDNA表达的芯片技术进
行基因异常表达的检测。
(5)基因定位。如:用原位杂交技术进行组织与细胞中基
因表达的定位。
3、基因组:是一个细胞或一种生物体的整套遗传物质。
4、基因:是基因组中一个功能单位,是贮存有功能的蛋白
质多肽链信息或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部
核甘酸序列。
5、原核生物:是细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋
体、放线菌和蓝绿藻等原始生物的总称,是最简单的细胞生
物体。
6、操纵子结构:是原核生物基因组的功能单位。
7、质粒:是指细菌细胞染色体外,能独立复制并稳定遗传
的共价闭合环状分子。
8、转座因子:又称为转座元件,是一类在细菌染色体、质
粒和噬菌体之间自行移动并具有转位特性的独立的DNA序
列。
9、原核生物基因组的结构特征:
(1)原核生物基因组通常仅由一个DNA分子构成,基因组中
只有一个复制起点,具有类核结构。
(2)具有操纵子结构,模板mRNA为多顺反子mRNA。编码区
远远大于真核生物基因组,但又远远小于病毒基因组。在基
因组中存在多功能的识别区域,如复制起始区、转录启动区
和终止区等,这些区域常常含有反向重复序列。
(3)结构基因通常为单拷贝基因,编码顺序一般不重叠。
(4)具有编码同工酶的基因。
(5)含有可移动的DNA序列。
10、病毒基因组的结构特点:
(1)与细菌和真核生物基因组相比,病毒基因组结构简单,
基因数少,所含信息量也少。
(2)病毒基因组的核酸类型较多,有双链DNA、单链DNA、
双链RNA和单链RNA;有环状分子,也有线性分子。但无论是
哪种核酸类型,一种病毒颗粒中核酸成分只能为一种,或
DNA,或RNA。
(3)基因组中有基因重叠现象,这种结构的意义在于使较
小的基因组能携带较多的遗传信息。
(4)基因组中具有操纵子结构。
(5)病毒基因可连续也可间断。
(6)基因组中重复序列少。
(7)基因组中非编码区少。
(8)病毒基因组是单倍体。
(9)病毒基因组核酸序列中功能相关的蛋白质基因往往丛
集在基因组的一个或几个特定部位,形成一个功能单位或转
录单元。
(10)病毒基因组含有不规则的结构基因。
11、真核生物基因组的结构特点:
(1)真核生物基本上不存在操纵子结构,一个结构基因转录
生成一条mRNA,即mRNA是单顺反子,许多蛋白是由相同或不
同的亚基构成,因此涉及多个基因的协调表达。
(2)基因组中非编码的区域多于编码区域,并且,编码蛋
白质的基因一般是不连续的断裂基因,即有外显子和内含
子,在转录后经剪切成成熟mRNA后,才能翻译成蛋白质。
(3)基因组DNA有重度、中度和低度三种重复序列。(4)
基因组DNA具有多基因家族与假基因。
(5)基因组DNA结构存在不同程度的差异,即基因多态性。
(6)基因组DNA也有基因重叠现象。
(7)真核细胞的染色体末端存在一种由DNA片段和蛋白质组
成的独特结构,即端粒。它能维持染色体的稳定性。
12、乙型肝炎病毒(HBV)基因组的结构:HBV基因组的长度
为3.2kb,是带有部分单链区的环状双链DNA分子,是目前已
知感染人类最小的DNA病毒。HBV的两条链长度不等,长的链
为负链,用“L(-)”表示,其长度是固定的,携带有病毒
全部的编码信息;短的为正链,用“S(+)”表示,正链在不
同的分子中长度不等,一般长约1.6-2.8kb,大约是负链的
50%-100%,并且短链的5'端位置是固定的,而3'端的位置
是可变的。在负链的5'端有一低分子量的蛋白质,在正链
的末端则有一段短RNA,它们是引导DNA合成的引物。两条链
的5'端有约250-300bp可互补结合,所以也称为黏性末端,
这种互补结合是DNA保持双链环状的基础。此外,这部分核
甘酸序列也是HBV最常整合到肝细胞染色体DNA中得序列。在
黏性末端的两侧还各有11个核甘酸构成的顺向重复序列,分
别称为DR1和DR2,DR1在负链5'端,DR2在正链5'端,中间
相隔223个核甘酸。DR区域是DNA成环及病毒复制的关键区
域。HBV基因组已经确定在负链DNA核甘酸序列为模板转录的
RNA上含有4个公认的开放阅读框,分别成为S、C、P、X区。
13、丙型肝炎病毒基因组(HCV)的结构:呈球形颗粒,直径
约50rlin,有一脂质包膜。基因组为单链正链RNA病毒,链长
约9.5kb,整个基因组只有一个ORF,编码3011或3010个氨基
酸。5'端和3'端分别有短的非编码区(UTR)o5'端UTR
由324-341个核甘酸组成,可能在病毒的复制和翻译过程中
起重要的调节作用。5'端UTR的核昔酸序列保守性强,可用
于基因检测诊断。3'端UTR由27-55个核甘酸组成,其长度
取决于病毒的来源,由病毒固有顺序与各种长度的“多U序
列”组成,是HCV的独特结构。HCV基因产物均来自一个大的
多蛋白前体,经宿主与病毒编码的蛋白酶的联合作用,在翻
译中或翻译后被加工成为结构蛋白及非结构蛋白。结构蛋白
包括两种:核心蛋白和包膜糖蛋白。非结构蛋白包括四种:
NS2、NS3、NS4、NS5。
14、人类免疫缺陷病毒基因组(HIV)的结构:(主要有两
型:山丫-1和口川-2。两型病毒的核甘酸序列差异超过40%,
世界范围的AIDS大多由HIVT所致,HIV-2只在西非呈地区性
流行。)HIV基因组由2条相同的正链RNA在5'端通过氢键互
相连接在一起形成二聚体,其单链RNA含有9749个核甘酸。
HIV基因组共有9个基因,其中3个是结构基因,6个是调控基
因。在病毒基因组的5'端和3'端各有相同的一段核昔酸序
列,称为长末端重复序列(LTR)。LTR中含有启动子、增强
TATA序列等,它们对病毒基因组转录的调控起关键作用。
15、质粒的一般性质:质粒作为一个完整的复制子,在转化
菌细胞后能自主复制,并对细菌的一些代谢活动和抗药性表
现具有一定的作用。在质粒只有在宿主细胞内才能完成自我
复制,一旦离开宿主细胞就无法复制和扩增,相反,宿主细
胞失去了质粒依旧能存活。质粒也是一种游离基因,既可整
合到细菌染色体中,又可在游离出来。质粒具有不相容性。
16、基因结构异常:广义上是指染色体畸变和基因突变,狭
义上一般是指基因突变。
17、基因结构异常的类型:通常分为单基因病和多基因病。
单基因病包括:三联体重复、血红蛋白病、苯丙酮尿症和遗
传性原发痛风。多基因病包括:原发性高血压、糖尿病和实
体瘤。
18、端粒:真核细胞染色体末端存在着一种由DNA片段和蛋
白质组成的独特结构,即为端粒。它对维持染色体的稳定性
具有重要作用。
19、端粒的主要作用:
(1)维持染色体的稳定性,防止染色体重组及末端被降解。
(2)保证细胞在有丝分裂时染色体准确的分离,在减数分
裂是保证染色体的成对及运动。
(3)端粒在细胞生长中有很大的作用,其与肿瘤和衰老有
关。
20、人类基因组:包括细胞核内的核基因组和细胞质内的线
粒体基因组。核基因组由3.16X109bp组成,线粒体基因组
由16569bp组成。
21、核酸:是以核甘酸为基本组成单位的生物信息大分子。
(天然存在的核酸有两类,即DNA和RNA。)
22、核酸分离纯化应遵循的原则:一是保证核酸一级结构的
完整性,因为完整的一级结构是核酸结构和功能研究的基本
要求;二是尽量排除其他分子的污染,保证核酸样品的纯度。
23、简述核酸分离纯化技术路线的设计:
(1)核酸的释放:①细胞破碎方法中机械剪切法不能用于
基因组DNA的提取;②非机械法常用化学试剂或酶细胞溶解
法。
(2)核酸的分离与纯化:①除去蛋白质、多糖、脂类等大
分子物质;②除去非目的核酸组分;③除去实验溶液和试剂。
(3)核酸的浓缩、沉淀于洗涤:①浓缩:提高样品浓度;
②沉淀:常用的浓缩方法,如醋酸钠、醋酸铁等;③洗涤:
除去共沉淀的盐,常用70275%的乙醇。
24、简述酚抽提法分离纯化基因组DNA的方法,并绘制出流
程示意图:
(1)将分散好的真核生物组织、细胞在含EDTA、SDS及无DNA
酶裂解缓冲溶液裂解细胞,破坏细胞膜、核膜,EDTA能抑制
细胞中DNA酶的活性,使DNA分子完整地以可溶形式存在于溶
液中。SDS主要引起细胞膜的降解并能乳化脂质和蛋白质,
并使它们沉淀,同时还有降解DNA酶的作用。再经蛋白酶K处
理后,用PH8.0的Tris饱和酚抽提DNA,重复抽提至一定纯度
后,得到的DNA溶液经乙醇沉淀进一步纯化,此法可获得
100-200kb的DNA片段。
(2)书本82页
25、简述低熔点琼脂糖凝胶挖块回收法如何回收基因组DNA,
有何优点:本方法是从低熔点琼脂糖凝胶中切出含待回收的
DNA凝胶块,利用其纯度高、熔点低及凝固温度低的特点,
对DNA片段回收的方法。该法对高分子量的DNA特别有用,也
能有效的分离小分子量的DNA片段。
26、质粒DNA纯化的主要方法与原理:
(1)cscl-EB法:是一种沉降平衡离心法。经超速离心,离
心介质cscl形成一连续的密度梯度,在过量EB存在的条件
下,各种不同密度的物质经离心平衡后得以分开。该法主要
用于纯化容易出现切口的极大质粒DNA和具有某些特殊用途
的闭环质粒DNA。
(2)聚乙二醇沉淀法:是一种分级沉淀法。质粒DNA的粗制
品首先用LiCl沉淀大分子RNA,并用RNase消化小分子RNA,
然后在高盐条件下,用PEG选择性地沉淀大的质粒DNA,沉淀
的质粒DNA进一步用酚/氯仿抽提和乙醇沉淀。PEG沉淀法简
单、经济、试用广泛,尤其对碱裂解法提取的质粒纯化效果
好,适用于分子克隆中所有常规的酶学反应,也能用于高效
的哺乳动物细胞学的转染。但不能有效分离带切口的环状质
粒DNA与闭环质粒DNA。
(3)柱层析法:柱层析法纯化质粒DNA的关键是用于填充层
析柱的树脂。树脂可分两类:一类是利用疏水的相互作用纯
化质粒DNA样品;另一类是通过离子交换与吸附的相互作用
进行纯化。以硅基质作为填充材料的柱层析作用原理是:在
多盐条件下,依靠DNA与硅基质的可逆性结合进行纯化。多
盐造成磷酸二酯骨架的脱水,通过暴露的磷酸盐残基,是DNA
吸附到硅基质上。以50%的乙醇溶液洗去RNA和糖类等生物大
分子后,加入TE缓冲液或水溶液使DNA分子重新水合,并通
过离心洗脱出来。DNA与硅基质的吸附作用与DNA的碱基组成
和拓扑结构无关,因此可用于环形质粒DNA和线性DNA的纯
化。由于V100-20()bp的DNA分子与硅基质的吸附力很弱,因
此柱层析不能用于小分子DNA片段的纯化。
27、简述RNA提取的关键步骤:91页
28、DNA重组:不同来源的DNA通过磷酸二酯键连接而重新组
合成新的DNA分子的过程,称为DNA重组。
29、DNA重组技术(分子克隆或基因工程):用人工手段对
DNA进行改造和重新组合的技术。包括对DNA分子的精细切
割、部分序列的去除、新序列的加入和连接、DNA分子扩增、
转入细胞的复制繁殖、筛选、克隆、鉴定和序列测定等等,
是基因工程技术的核心。30、克隆:来自同一始祖的相同
副本或拷贝的集合。
31、DNA克隆:是指应用DNA重组技术,在体外对DNA进行重
组,构建成具有自主复制能力的重组DNA分子,再导入宿主
细胞,然后从单个细胞开始大量扩增,最终获得大量同一的
DNA分子。
32、限制性内切酶:是存在于细菌体内,能识别和水解双链
DNA分子内特定序列的核甘酸水解酶类。
33、DNA连接酶:催化双链DNA或RNA中并列的5'-磷酸和3'
-羟基之间形成磷酸二酯键的酶。
34、载体:时携带靶DNA(目的DNA)片段进入宿主细胞进行
扩增和表达的运载工具。
35、作为载体应具备的条件:
①在宿主细胞中具有自主复制能力或能整合到宿主染色体
上与染色体基因组一同复制的能力;
②有合适的限制性酶切位点供外源DNA片段插入;
③分子量不宜过大,以便于容纳较大的外源DNA片段并获得
较高的拷贝数,也有利于体外重组操作;
④具有合适的筛选标记,以便于区分阳性重组体和阴性重组
体,常用的筛选标记有抗药性、酶基因、营养缺陷型或形成
噬菌斑的能力等;
⑤配备与宿主相适应的调控元件,如启动子、增强子和前导
序列等。
36、用作克隆载体的理想质粒应具备的特点:①具有松弛复
制子,复制子是质粒自我增殖所必不可少的基本条件,并可
协助维持使每个细胞含有一定数量的质粒拷贝;②在复制子
外存在数个单一的酶切位点,以便目的DNA片段插入;③具
有插入失活的筛选标志,理想的质粒载体应具有两种抗生素
抗性标志;④分子量相对较小和较高的拷贝数。
*37、重组DNA的步骤::①获得目的基因;②与克隆载体连
接,形成新的重组DNA分子;③用重组DNA分子转化或感染宿
主细胞,并能在宿主细胞中复制和遗传;④对重组子的筛选
和鉴定;⑤DNA序列测定。
38、原核生物表达体系对外源目的基因的要求:要求真核生
物的目的基因不应具有5'端非编码区以及内含子结构。
39、原核生物表达载体的特点:①含大肠杆菌适宜的选择标
志;②具有能调控转录、生产大量mRNA的启动子;③含适当
的翻译调控序列;④含合理设计的多接头克隆位点,以确保
目的基因按一定的方向与载体正确连接。
40、真核生物基因在原核细胞中的表达类型:包括融合型表
达蛋白、非融合型表达蛋白和分泌型表达蛋白。
41、酵母重组表达蛋白的分离与纯化:
包括酵母细胞内表达的蛋白和分泌型蛋白的分离与与纯化。
(1)酵母细胞内表达的重组蛋白的分离与纯化:这种蛋白
质的分离与纯化过程比较简单,以a-蛋白酶抑制剂的纯化
为例:收集酵母细胞一玻璃珠破碎一离心取上清液一DEAE
Sepharose柱层析f梯度洗脱一收集活性部分一浓缩f葡聚
糖凝胶G75柱层析一收集、浓缩fSDS纯度鉴定。
(2)酵母表达分泌型重组蛋白的分离与纯化:以酵母表达
干扰素纯化为例:发酵液用0.45um孔径滤膜过滤浓缩一
DEAE-Trisacryl柱层析f梯度洗脱f收集干扰素部分f
SephadexG75柱层析f洗脱
一收集干扰素一稀释一层析聚焦缓冲液洗脱一电泳鉴定。
42、RNAi(小干扰RNA)的作用机制与设计原则:
(1)作用机制:①起始阶段:外源的DsRNA通过导入或者转
基因、病毒感染、转座子活化及特异重复序列或其他未知方
式进入细胞,被Dicer酶识别并将dsRNA切割成21-23个核甘
酸的由正反义链组成的小分子干扰RNA(siRNA);②效应阶
段:siRNAs的双链结构需被解螺旋后组装到RNA诱导的沉默
复合物中,该复合物中解旋酶活性将siRNA双链解开,并定
位到siRNA的反义链互补的靶mRNA转录本上,在距离
siRNA3'12个碱基的位置切割mRNA;③倍增阶段:仅需少量
siRNA即可引起强烈的同源基因表达抑制。
(2)设计原则:①siRNA中G+C碱基含量:一般为30%-70%,
50%时siRNA产生的沉默效应较高,但过高的G+C碱基含量会
降低沉默活性;②siRNA的作用位点:一般选择2-4个不同序
列针对目的DNA,3'端非编码区域可以作为目的序列,避免
选择起始密码下游500To0个碱基处、终止密码上游100碱基
处及5,端非编码区域,因为此区域中含有阻止靶向识别的
蛋白质结合位点;③siRNA序列:避免连续四个以上腺喋吟
及3个鸟喋吟或胞喀唳核甘酸的序列;④siRNA碱基数:选择
以A或G开始的21-23碱基大小的目的mRNA;⑤环碱基数:一
般为9个碱基,其序列为TTCAAGAGA;⑥对照系统:将以设计
的siRNA碱基序列随机排列,以保证与其他基因无同源性,
才可作为实验的对照系统。
43、核酸分子技术杂交:单链的核酸分子在合适的条件下,
与具有碱基互补序列的异源核酸形成双链杂交体的过程称
作核酸分子杂交。
44、探针:是用放射性核素或非放射性物质标记的一段单链
或双链核甘酸,可依碱基配对规律与具有互补序列的待测核
酸进行杂交,以探测它们的同源程度。
45、变性:在一定条件下,双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解
开,DNA分子成为单链,形成无规则线团,这一过程称作变
性。
46、融解温度:DNA的变性会在一个狭窄的温度范围内发生,
这一温度范围的中点被称为溶解温度。
47、复性:变性DNA只要消除变性条件,,具有碱基互补区
域的单链又可以重新结合形成双链,这一过程称之为复性。
48、杂交:将一种核酸单链标记成为探针,再与另一种核酸
单链进行碱基互补配对,可以形成异源核酸分子的双链结
构,这一过程称作杂交。
49、核酸分子杂交原理:互补的DNA单链能够在一定条件下
结合成双链,即能够进行杂交。这种结合是特异的,即严格
按照碱基互补的原则进行,它不仅能在DNA和DNA之间进行,
也能在DNA和RNA之间进行。因此,当用一段已知基因的核酸
序列作出探针,与变性后的单链基因组DNA接触时,如果两
者的碱基完全配对,它们即互补地结合成双链,从而表明被
测基因组DNA中含有已知的基因序列。
50、杂交核酸分子的种类:液相杂交、固相杂交、原位杂交
和基因芯片技术。
51、原位杂交:是应用核酸探针与组织或细胞中的核酸按碱
基互补配对原则进行特异性结合形成杂交体,然后应用组织
化学或免疫组织化学法在显微镜下进行细胞内定位的检测
技术。
52、试述Southern印记杂交的基本操作步骤:149页
53、简述核酸分子杂交过程:包括核酸分子与固相
介质的结合、杂交和杂交后信号的检测3个过程。而杂交又
可分为预杂交、杂交和洗脱三个步骤。
54、聚合酶链反应(PCR):一种在体外特异性地复制已知
序列的DNA片段的重要技术。
55、PCR反应原理及反应过程:
(1)原理:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,
其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核甘酸引物。
(2)反应过程:PCR由变性一退火一延伸三个基本反应步骤
构成:①变性:将被复制片段的DNA在94。095。(2条件下加热,
使DNA双螺旋的氢键断裂,形成单链分子作为反应的模板;
②退火:将温度降至寡核甘酸(引物)的融点温度以下55七
左右,使引物能与模板互补结合形成杂交链;③延伸:将温
度升至72七左右,反应体系按照模板链的序列以互补的方式
依次把dNTP加至引物的3'端,TaqDNA聚合酶使杂交双链不
断延伸,直至形成新的DNA双链。
56、PCR反应条件为:温度、时间和循环次数。
57、PCR的特点:特异性强。对标本的纯度要求低。灵敏度
高。
58、PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③TaqDNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
59、PCR反应的成分主要是:模板、引物、(脱氧核昔三磷
酸)dNTP、TaqDNA聚合酶和缓冲液等。
60、荧光定量PCR的原理和方法:176页
61、PCR产物的检测:185页
62、PCR引物的设计原则是什么?如何设计引物?
(1)原则:①用于PCR反应的引物需要有两条被扩增目的基
因的两端,并分别与模板正负链序列互补;②引物长度一般
以18-25个核甘酸为宜;③两条引物之间(尤其在3,端)的
序列不能有互补,以免形成引物二聚体;④引物的碱基组成
应平衡,避免出现喋吟、啥喔碱基堆积。⑤PCR扩增中得退
火温度是根据引物的Tm值决定的,两条引物的Tm值不能差别
太大;⑥根据需要,可以在合成引物时于其5'端加修饰成
分。
(2)设计引物最好用电脑软件进行分析,有助于综合考虑
上述各因素.
63、微卫星:又称短串联重复(STR),人类基因组中存在
6-12个核昔酸重复序列,它们可以以正向或反向方式串联,
并分布于基因的多个位点上,存在的重复序列数目不同,其
中2-6个核甘酸组成的重复序列称为微卫星。
临床分子生物学检验技术试题及答案
一、A型题(40小题,共40分)
1、人类肮病毒基因定位于
A、2号染色体
B、8号染色体
C、9号染色体
D、20号染色体
E,24染色体
答案:D
2、关于Col质粒下列哪项不对
A、可以产生大肠埃希菌素
B、分子量的范围波动很大
C、可以决定细菌的性别
D、小的Col质粒不能自传递
E、大的分子量可达6X10的7次方Da,属自传递型质粒
答案:C
3、大肠埃希菌tRNA基因的特点是
A、已鉴定的大肠埃希菌tRNA基因约有60个拷贝
B、转录单位在500bp以上
C、tRNA基因集中在染色体复制终点附近
D、转录单位大小不同,一般含有5〜6个tDNA
E、tRNA的拷贝数较多
答案:A
4、下列哪项不是端粒的功能
A、维持染色体的稳定
B、防止染色体重组
C、有丝分裂时染色体分离
D、细胞的生长
E、基因的调控
答案:E
5、在细胞运动、分裂、信息传递、能量转换、代谢方面具有重要作用的细胞癌基因是
A、sis基因
B、erb基因
C、src基因
D、ras基因
E、myb基因
答案:B
6、在酵母中也存在的细胞癌基因是
A、sis基因
B、erb基因
C、src基因
D、ras基因
E、myc基因
答案:D
7、人类结肠癌癌变的序列中哪一个发生最早
A、ras的突变
B、FAP的丢失
C、DCC的丢失
D、p53的丢失
E、c-myc基因的过度表达
答案:A
8、恶性肿瘤中最常见的基因突变是
A、APC突变
B,BRCA突变
C、DCC突变
D、p53突变
E,Rb突变
答案:D
9、与人类血小板衍生生长因子有很高同源性的细胞癌基因是
A^src基因
B、sis基因
C、ras基因
D、myb基因
E、myb基因
答案:B
10、对结缔组织细胞及神经胶质细胞的生长、分裂和分化有重要调控作用的细胞癌基因是
A、erb基因
B、ras基因
C、sis基因
D、src基因
E、myb基因
答案:C
11、癌基因H-ras发生密码子突变时会诱发下列哪种肿瘤
A、膀胱癌
B、肺癌
C、结肠癌
D、肝癌
E、神经母细胞瘤
答案:A
12、下列哪种癌基因编码的氨基酸顺序有85%的同源性,均为P21蛋白
A、sis
B、erb
C>src
D、ras
E、myc
答案:D
13、细胞癌基因通常是根据什么分类的
A、癌基因类别
B、细胞类别
C、宿主
D、表达产物
E、所致疾病
答案:D
14、哪种癌基因的染色体易位可导致慢性粒细胞白血病的发生
A^c-myc
B、c-abl
C、c-sis
D、bcl-1
E、bcl-2
答案:B
15、关于蛋白质结构分类数据库(SCOP)以下哪项描述不对
A、这主要是描述蛋白质之间的关系
B、SCOP不包括PDB-ISL中介序列库
C、家族、描述相近的进化关系
D、超家族、描述远源的进化关系
E、折叠子、描述空间几何结构关系
答案:B
16、若DNA的样品中含盐,必须以A260与什么的差值作为计量的依据
A、A270
B、A280
C、A290
D、A300
E、A310
答案:E
17、紫外分光光度法只用于检测浓度大于多少的核酸溶液
A、0.25ug/mL
B、0.20ug/mL
C、0.15ug/mL
D、0.lOug/mL
E、0.05ug/mL
答案:A
18、关于酚抽提法提取基因组DNA,下列哪种说法是错误的
A、最初于1976年由Stafford及其同事提出
B、所用试剂含有EDTA,SDS
C、Tris饱和酚pH为8.0
D、从5X10的8次方个培养基的Hela细胞中大约可以制备500ugDNA
E、从20mL血液中可以获得250ugDNA
答案:D
19、RNA中mRNA占百分之多少
A、1-5
B、15-20
C、40-50
D、60〜75
E、80-85
答案:A
20、碱基与戊糖、磷酸形成核甘酸后,其最大吸收波长发生什么变化
A、增加
B、减少
C、不变
D,增加或不变
E、减少或不变
答案:C
21、下列关于PAGE纯化DNA样品的说法,哪一项是错误的
A、可分辨相差0.1%的DNA
B、电泳容量比琼脂糖凝胶小
C、回收的核酸浓度很高
D、制备与操作比琼脂糖凝胶困难
E、只适合小片段DNA的分离
答案:B
22、下列关于甲酰胺解聚法的说法,哪项是不正确的
A、1987年由Kupiec等报道
B、不进行酚的抽提
C、所获得的DNA一般为100〜150kb
D、由此法所获得的DNA浓度低
E、从IX10的8次方个培养基的Hela细胞中大约可以制备Img高分子量的DNA
答案:C
23、常规方法分离基因组DNA时,大于多少的DNA分子很容易断裂
A、20kb
B、40kb
C、80kb
D、lOOkb
E、15Okb
答案:E
24、下列哪种为最常用的沉淀剂
A、70%乙醇
B、95%乙醇
C、100%乙醇
D、醋酸胺
E、EDTA
答案:C
25、欲回收PFGE低熔点琼脂糖凝胶中高分子量DNA,下列哪种方法较好
A、DEAE纤维素膜插片电泳法
B、电泳洗脱法
C、冷冻挤压法
D、酚/氯仿抽提法
E、琼脂糖水解酶法
答案:E
26、质粒纯化的标准方法是哪种
A、CsCl-EB法
B、PEG法
C、柱层析法
D、电泳法
E、磁珠分离法
答案:A
27、PAGE对基因组DNA分辨率可达多少
A、0.1%
B、0.5%
C、1%
D、1.5%
E、5%
答案:A
28、要分离大片段的DNA,可用下列哪种方法
A、PAGE
B、AGE
C、PFGE
D、IEF
E、CAME
答案:C
29、内切酶作用的最佳pH一般为
A、4
B、5.5
C、7.5
D、9.5
E、10
答案:C
30、内切酶通常保存在何种温度条件下最恰当
A、4℃
B、0℃
c、-io0c
D、-20℃
E、一70℃
答案:D
31、通常酶切反应体系中的甘油浓度要求
A、<5%
B、5%〜10%
C、10%〜20%
D、20%〜50%
E、<50%
答案:A
32、催化内切酶反应常雷同,何种金属离子作为辅助因子
A、Mg2+
B、Ca2+
C、K+
D、Na+
E、Fe2+
答案:A
33、酶切分析用的靶DNA量一般为
A、0.l~10ug
B、10〜20ug
C、20~30ug
D、30〜50ug
E、50〜lOOug
答案:A
34、决定PCR扩增中的退火温度的是
A、模板链的长度
B、模板链C+G组成
C、引物的Tm值
D、TaqDNA聚合酶浓度
E、引物的长度
答案:C
35、在PCR反应中,Tm等于
A、4(A+T)+2(C+G)
B、2(A+T)+4(C+G)
C、(A+T)+(C+G)
D、2(A+C)+4(T+G)
E、2(A+G)+4(C+T)
答案:A
36、关于滤膜烘烤固定核酸下列何项不正确
A、温度为80%
B、时间为2小时
C、防止膜爆裂
D、非共价结合核酸
E、共价结合核酸
答案:E
37、32P的半衰期是
A、7天
B、14天
C、21天
D、28天
E、35天
答案:B
38、ISH是指的哪一种分子杂交的缩写
A、Southern印迹杂交
B、Northern印迹杂交
C、斑点印迹杂交
D、狭缝印迹杂交
E、原位杂交
答案:E
39、细胞无明显变化是
A、程序性细胞死亡的形态学特征
B、细胞死亡的形态学特征
C、程序性细胞死亡的生化特征
D、细胞死亡的生化特征
E、程序性死亡的免疫学特征
答案:A
40、无凋亡小体是
A、程序性细胞死亡的形态学特征
B、细胞死亡的形态学特征
C、程序性细胞死亡的生化特征
D、钿胞死亡的生化特征
E、程序性死亡的免疫学特征
答案:B
二、判断题(10小题,共10分)
1、SV40病毒早期转录基因按逆时针方向。
答案:对
2、假基因是指无功能性基因产物的基因。()
答案:对
3、外显子和内含子共同组成结构基因的编码区。()
答案:对
4、基因诊断可作为肿瘤的第一诊断手段。()
答案:错
5、p53基因和Rb基因的产物都能结合DNA和被磷酸化。()
答案:对
6、一个有机体没有一个确定的基因组。()
答案:错
7、凝胶滞后实验既可检测DNA结合蛋白,又可检测RN
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