天然牧草青贮营养品质评价

1天然牧草青贮营养品质评价本文件规定了天然牧草青贮饲料的术语和定义、质量要求、卫生标准、检验方法及分级判定规则。本文件适用于以天然牧草为原料加工成的青贮饲料营养品质综合评价和质量分级。2规范性引用文件下列文件中内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6432GB/T6435GB/T6438饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法饲料中水分的测定饲料中粗灰分的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T10468水果和蔬菜产品pH值的测定方法GB13078饲料卫生标准GB/T20806饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定NY/T1459饲料中酸性洗涤纤维的测定NY/T2129饲草产品抽样技术规程3术语和定义3.1天然牧草nativegrass在天然草原生长的、可用于畜牧生产的饲草。3.2青贮ensiling在密封条件下，使青绿饲料在相当长的时间内保持其质量相对不变的一种保鲜技术。3.3青贮品质silagequality指青贮饲料的物理品质和化学品质。4质量要求24.1感官要求4.1.1气味酸香味、酒香味或醋酸味。4.1.2色泽接近原料的颜色，一般呈绿色、暗绿色、青绿色或黄绿色。4.1.3形态茎叶结构清晰或基本保持原状，松散、柔软湿润。4.2营养指标天然牧草青贮饲料的发酵指标及营养指标应符合表1的要求。pH>4.2，≤4.5>4.5，≤5.2>10.0，≤15.0>15.0，≤20.0≥65.075.0≥60.065.0>20.0，≤30.0>30.0，≤40.0->5.0，≤10.0≥8.010.0≥6.08.0>50.0，≤55.0>55.0，≤60.0>30.0，≤35.0>35.0，≤45.05卫生指标应符合GB13078的要求。6检测方法6.1抽样按NY/T2129的规定执行。6.2感官指标检验6.2.1气味在青贮常态下，贴近鼻尖嗅闻气味。其结果应符合4.1.1的要求。6.2.2色泽、形态在自然光下目测青贮样品的色泽、形态，用手指捻。其结果应符合4.1.2和4.1.3的要求。6.3营养指标检测6.3.1粗蛋白含量按GB/T6432的规定执行。6.3.2中性洗涤纤维含量按GB/T20806的规定执行。6.3.3酸性洗涤纤维含量按NY/T1459的规定执行。6.3.4粗灰分含量按GB/T6438的规定执行。6.3.5水分含量按GB/T6435的规定执行。6.3.6pH值按GB/T10468的规定执行。6.3.7氨态氮按照附录A的方法执行。6.3.8有机酸按照附录B的方法执行。7分级判别规则按如下规则进行分级判定：a）感官指标符合4.1要求后，根据分级指标定级；b）分级指标均同时符合某一等级时，则判定所代表的该批次产品为该等级；c）分级指标处于不同等级时，则按单项指标所处最低等级定级。4附录A氨态氮含量的测定方法A.1方法A.2原理试样直接用水提取后，浸提液中NH4+在强碱性介质与次氯酸盐和苯酚发生反应，生成水溶性染料靛酚蓝，其颜色深浅与溶液中NH4+含量呈正比。A.3试剂和材料A.3.1苯酚试剂将0.05g亚硝基铁氰化钠溶解在500mL蒸馏水中，再加入11mL苯酚溶液或9.0g结晶苯酚，混合均匀后定容到1000mL，贮藏于棕色试剂瓶中，低温避光保存。A.3.2次氯酸盐溶液将5.0g氢氧化钠溶解在700mL的蒸馏水中，再加入20.1g磷酸氢二钠，中火加热并不断搅拌至完全溶解。冷却加入14.7mL含8.5%活性氯的次氯酸钠溶液并混匀，定容到1000mL，贮藏于棕色试剂瓶中，低温避光保存。A.3.3标准铵溶液称取0.6607g经100℃条件下烘干24h的（NH4）2SO4溶于水中，定容至100mL，配置成0.1mol/L的铵储备液。将上述储备液稀释配置成1.0mmol/L、2.0mmol/L、3.0mmol/L、4.0mmol/L、5.0mmol/L五种不同浓度梯度的标准液。A.4仪器A.4.1分光光度计：配1cm石英比色皿。A.4.2天平：感量为0.0001g和0.01g。A.5分析步骤A.5.1标准曲线的制作取6个50mL容量瓶，分别吸取铵储备液0.5m、1.0m、1.5m、2.0m、2.5mL并定容。配制成1.0mmol/L、2.0mmol/L、3.0mmol/L、4.0mmol/L、5.0mmol/L五种不同浓度梯度的标准工作液。取6支试管，分别向每支试管中加入50μL标准工作液，空白为50μL蒸馏水；向每支试管中加入2.5mL的5苯酚试剂，摇匀；再向每支试管中加入2mL次氯酸钠试剂，混匀；将混合液在95℃水浴中加热显色反应5min；冷却后,在630nm波长下比色。以吸光度与标准液浓度为坐标轴绘制标准曲线。A.5.2试样溶液的测定向每支试管中加入50μL经适当倍数稀释的试样溶液，重复2次，空白为50μL蒸馏水。按标准曲线的检测步骤测定试样溶液的吸光度。以样品的吸光度与标准曲线比较求出含量。A.6结果计算试样中氨态氮含量按式（A.1）计算：式中：X—试样中氨态氮的含量，单位为克每千克（g/kg）；C—由标准曲线求得试样溶液中氨态氮的浓度，单位为毫摩尔每升（mmol/LV—制备青贮饲料浸提液时水的体积，单位为毫升（mL）；m—制备青贮饲料浸提液所用青贮饲料质量，单位为克（gw—青贮饲料中水的质量分数；n—样品稀释倍数；1000—换算系数。计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算数平均值表示，结果保留两位有效数字。6附录B有机酸含量的测定方法B.1方法高效液相色谱法。B.2原理根据浸提液中离子交换体和离子溶质的静电相互作用（排斥）进行分离，以保留时间定性，外标法定量。B.3材料和试剂所用试剂均为优级纯，水为GB/T6682规定的一级水。B.3.1试剂B.3.1.1高氯酸溶液称取高氯酸0.8493g，加水定容至2000mL，混匀。B.3.2标准品B.3.2.1乳酸标准品（CH5CHCOOH），纯度≥99%。B.3.2.2乙酸标准品（CH5COOH），纯度≥99%。B.3.2.3丙酸标准品（CH5CH2COOH），纯度≥99%。B.3.2.4丁酸标准品（CH5CH2CH2COOH），纯度≥99%。B.3.3标准溶液B.3.3.1乳酸标准储备溶液（10mg/mL称取按其纯度折算为100%质量的乳酸0.1g（精确到0.0001g置于10mL容量瓶中，加超纯水至刻度，混匀，于4℃保存。B.3.3.2乙酸标准储备溶液（10mg/mL称取按其纯度折算为100%质量的乙酸0.1g（精确到0.0001g置于10mL容量瓶中，加超纯水至刻度，混匀，于4℃保存。B.3.3.3丙酸标准储备溶液（5mg/mL称取按其纯度折算为100%质量的丙酸0.05g（精确到0.0001g置于10mL容量瓶中，加超纯水至刻度，混匀，于4℃保存。7B.3.3.4丁酸标准储备溶液（5mg/mL称取按其纯度折算为100%质量的丁酸0.05g（精确到0.0001g置于10mL容量瓶中，加超纯水至刻度，混匀，于4℃保存。B.3.3.5乳酸、乙酸、丙酸、丁酸混合标准曲线工作液：分别吸取各单标储备溶液0.25mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL和2.5mL于6个10mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，混匀，于4℃保存。B.3.4材料离子排阻色谱柱B.4仪器和设备B.4.1高效液相色谱仪，带二极管阵列检测器或紫外检测器。B.4.2天平：感量为0.0001g和0.01g。B.4.3玻璃砂芯真空过滤装置。B.4.4水相型微孔滤膜：孔径≤0.45μm。B.4.5注射器。B.4.6水系针筒过滤器：孔径≤0.45μm。B.4.7超声波清洗器。B.4.8高速离心机。B.5分析步骤B.5.1试样处理青贮饲料浸提液12000r/min离心3min，取上清液经水相滤膜过滤，注入高效液相色谱仪分析。B.5.2仪器参考条件B.5.2.1色谱柱：ShodexRsparkKC-811柱，8mm×300mm或同等性能的色谱柱。B.5.2.2流动相：用3mmol的高氯酸溶液，经水相滤膜过滤，脱气。B.5.2.3柱温：50℃。B.5.2.4进样量：5μL。8B.5.2.5检测波长：210nm。B.5.2.6流速：1mL/min。B.5.3标准曲线的制作将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的峰高或峰面积。以标准工作液的浓度为横坐标，以色谱峰或峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。B.5.4试样溶液的测定将待测液注入高效液相色谱仪中，得到峰高或峰