人体组织的检验教学教程

第十六章

人体组织的检验一、毛发检验

毛发结构：毛发是皮肤的一种特殊的附属器，是皮肤毛囊细胞产生的一种富有弹性角质体。

毛尖-----是毛干的游离末端，毛干向毛尖逐渐变细而尖

毛干-----是裸露于皮肤外部的部分，由角化上皮细胞组成，中心向外可以分为：

毛小皮：人----毛小皮花纹通常为细小波浪状。

毛皮质：人----皮质发达，

毛髓质：人---髓质不发达、而且髓质不连续

毛根-----是埋在皮肤内的部分。

毛

球：毛根起始端膨大和球状的部分

毛

囊：包裹毛根的一管状结构，内层为上皮根鞘、外层为纤维组织鞘

毛乳头：毛球和毛囊末端膨大，底面内凹，含毛细血管和神经的结缔组法医意义：

1毛发容易脱落，在凶杀、强奸、抢劫等案件中均可遗留2毛发理化性质稳定，其主要成分为角蛋白，不易腐蚀和毁坏，可长期保存3毛发可以进行个人识别鉴定注意：1毛发容易丢失，检验时应该特别小心，最好带口罩2选择合适的背景进行观察毛发与其他纤维的鉴别

肉眼观：毛尖、毛干、毛根显微镜：毛小皮、毛皮质、毛髓质燃烧法：毛发由特殊的臭味----角蛋白中含有

3%~5%的硫人毛与其他动物毛的鉴别

毛小皮毛皮质毛髓质

形态边缘宽度色素宽度连续性末端人

毛细而不规则花形细锯齿状较宽2/3均匀较窄1/4~1/5不连续部分缺如动物毛形状多变粗锯齿状较窄1/2~1/3不均匀较宽》1/3连续直至毛尖毛发部位的确定毛发其他特征鉴别

5%~10%亚硝基铁氰化钠溶液

脱落----毛根完全角化，干燥萎缩，无根鞘附着，根部色素少。染色不颜色反应拔出----毛囊组织附着、毛球湿润，毛球下端开放呈钩状，染色呈红色。钝器损伤----钝器作用部位变宽扁平，皮质纤维分离，部分或完全断裂锐器损伤----断端平滑整齐、毛干不碎裂、皮质纤维不分裂

长

度直径横断面

头发~2m《0.1圆形或椭圆形

胡须~30cm0.15钝的三角形

阴毛3~6cm0.1~0.2长椭圆形

毛发的个人识别

形态学检查：长度---

色泽---黑色、浅褐色、灰色、白色---色素：白色、黑色、红色

形态---直发、波状发、卷发

断端---剪切或切割、部分撕裂或完全撕裂免疫学检查：ABO血型----解离试验

特征：1血型物质含量少；2毛小皮没有血型物质，只有皮质和髓质才有方法：毛发洗净--乙醇脱色--充分压扁--加抗体吸收---涤、解离、RBC注意：1毛发压扁，原宽度地~4倍；2抗血清效价》128；3吸收时间充分，过夜4毛发对照

生化学检查：有毛根和毛囊的毛发可以检测ESD、GLOI、PGM1、ORM等分子生物学：带毛囊---DNA提取用chelex-100，STR基因座分析，性别基因鉴定

毛

干---线粒体DNA多态性分析

化学分析：微量元素的检测

应用：可以推测可能的生活环境、从事的职业、判断是否中毒

方法：原子发射光谱析、原子吸收分光光度、中子活性、气相色谱、质谱二、软组织检验1种类鉴别

肉眼观察

适合于组织块比较大的检材的识别组织切片

HE染色后，在显微镜下观察，鉴别***如果干燥组织可以用5%醋酸浸软组织以恢复正常形态皮肤----复层鳞状上皮细胞的表层结构+真皮层的毛囊和皮脂腺，及皮下脂肪脑组织----神经细胞和神经胶质细胞肝

脏----肝细胞及胆管构成发肝小叶结构肾

脏----肾小球、肾小管、消化道----粘膜层、粘膜下层、肌层、外膜2种属鉴定免疫学方法：抗人血清---沉淀反应、凝集反应、酶免疫分析**法医检验中的组织经常受各种因素的影响，变性或分解，易产生误判。分子生物学：

Alu序列

含有AluI酶切位点

散在重复序列，由300bp重复单位，该序列为人类和灵长类特有-----种属特异性PCR-AFLP：人类130bp的扩增产物

28srRNArRNA=60s（28s+5.8s+5s+50多种多肽）+40

保守区中的可变区进化较快，种属之间差异很大

人类108、104、101、99bp，不同动物的扩增产物长度不同

细胞色素b基因

位于线粒体上的具有种属差异的遗传标记

人和哺乳类动物区别

AluI酶切位点--酶切片断的长度不同

人和鸟类的动物区别—NcoI酶切位点---人类不含有该酶切位点

SON基因

3个人识别检验基础：正常情况下，同一个体不同组织的血型、酶型、DNA分型结果相同

例外：癌变的组织；腐败组织----获得性B物质影响因素：环境因素，干燥能保存，潮湿易破坏温度、酸碱

烧熟（但未焦）的组织可以检出，自溶和腐败

使组织的血型物质及其他的遗传标记更容易被破坏送检注意：1尽快送检---2妥善保存---所有检材不宜用甲醛固定3合理选材---肝脏和脾脏中核酸分解酶丰富，蛋白质和DNA降解快，不宜首选，肌肉和脑是提取DNA较理想的检材血型：ABO血型

ABH抗原不仅分布于人类红细胞

上，也存在于人体各种上皮细胞、血管与淋巴管的内皮细胞、心内膜及神经组织的神经细胞及突触。

有些组织的ABH抗原发育较红细胞早

方法：吸收试验---凝集抑制试验

解离试验---热解离试验

混合凝集---红细胞粘连试验

免疫组化---酶标抗体的应用

基因分型---PASA、PCR-RFLP、ASO-PCR酶

型测定

检材处理：组织制成匀浆，DNA分析

DNA提取：冷冻组织---常规有机溶剂，量少用Chelex-100

DNA分析

STR或HLA基因分型三、其他组织检验

1指甲检验—由表皮细胞角化而成，由多层连接牢固的角化细胞构成，细胞内充满角质蛋白。

ABO血型

特点：ABH为水溶性血型物质，但不受分泌型的影响，存在于所有的个体。成人和新生儿指甲中的ABH含量无明显的差异。方法：洗净---用肥皂水充分的洗涤，再用蒸馏水冲洗数次

软化---生理盐水中2小时，晾干

脱脂---丙酮或乙醇脱脂

压碎---加大抗血清接触的面积

mtDNA检测

测定mtDNA多态性的灵敏度比检测核DNA的多态性高

2骨及牙检验--