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文档简介
ICS65.020.20CCSB15团 体 标 准T/HSPP0018—2024含多肽腐植酸水溶肥料Water-solublefertilizercontainingpolypeptideandhumic-acids(发布稿)2024-08-24发布 2024-09-24实施湖北省植物保护学会 发布II目 次前 言 Ⅱ1、围 12、范引文件 13、语定义 24、术求 25、验法 36、验则 57、识 68、装运和存 6附录A溶中多肽含量的测定 7II前 言《标准化工作导则第本文件由武汉绿之缘生物科技有限公司提出。本文件由湖北省植物保护学会归口。PAGEPAGE1含多肽腐植酸水溶肥料范围本标准规定了含多肽腐植酸水溶肥料的术语和定义、要求、试验方法、检验规则、标识、包装、运输和贮存。本标准适用于将以动物源、植物源、微生物发酵的蛋白质为主要原料经提取后制备的多肽添加到固体或液体腐植酸水溶肥料中制成的含多肽腐植酸水溶肥料。规范性引用文件(适GB190 GB/T191 GB/T6680 GB/T8170 GB/T8569 GB/T9969 GB18382 -GB/T19524.1 GB/T19524.2 GB/T22924 )GB38400 NY/T887 NY1106 NY/T1110 NY/T1973 pHNY/T1976 NY/T1978 NY/T3831-2021 《定量包装商品计量监督管理办法》术语与定义下列术语与定义适用于本文件。多肽 polypeptide15%5000animalderivedpolypeptideplantderivedpolypeptide植物源多肽是大豆、小麦、玉米等植物来源的蛋白质通过水解获取的肽链及肽链片段。microbialmetabolicpolypeptide微生物代谢多肽是微生物菌利用培养基底物合成代谢获取的肽链及肽链片段。humicacidswater-solublefertilizercontainingpolypeptide含有适量动物源多肽、植物源多肽、微生物代谢多肽的腐植酸水溶肥料。技术要求外观均匀的固体或均相的液体,固体分为粉状和颗粒状,无明显机械杂质;液体无明显沉淀和杂质。技术指标含多肽腐植酸水溶肥料应符合表1或表2的要求。限量指标含多肽腐植酸水溶肥料限量指标应符合NY1110的要求。表1()项目固体产品液体产品多肽含量≥0.5%5克/升腐植酸含量≥3.0%30克/升大量元素含量1≥20.0%200克/升水不溶物含量≤5.0%50克/升水分(H2O)含量2≤5.0%/pH值(1:250)4.0~10.04.0~10.01、大量元素指N+P2O5+K2O含量的总和,产品应至少包含两种大量元素。单一大量元素含量不低于2.0%或20克/升。2、水分以生产企业出厂检验数据为准。表2()项目指标多肽含量≥0.5%腐植酸含量≥3.0%微量元素含量1≥6.0%水不溶物含量≤5.0%水分(H2O)含量2≤5.0%pH值(1:250)4.0~10.01、微量元素指铜、铁、锰、锌、硼、钼含量的总和,产品应至少包含一种微量元素,含量不低于0.05%的单一微量元素均应计入微量元素含量中,钼元素含量不高于0.5%。2、水分以生产企业出厂检验数据为准。试验方法一般规定HG/T2843HG/T2843外观目视法测定。1977按NY/T1977的规定执行。19771974197419741974 1974 1974 1978 1978 1978 1978 1978 A 按NY1106。 按NY/T1115水溶肥料pH的测定按NY/T1115水溶肥料水分的测定按GB/T8576或GB/T8577的规定执行,GB/T8577为仲裁法。 按NY/T1976检验规则:(袋GB/T6680的规定执行。1000mL6.6 GB/T8170-2008中4.3.36.7 袋)标记及使用说明书GB18382。GB/T9969GB/T8569GB/T8569GB190和GB/T1912附录 A (规范性)水溶肥料中多肽含量的测原理试样用IEC氨基酸分析法(离子交换色谱法)测定游离氨基酸总含量。试样用三氯乙酸预处理,去除沉淀大分子蛋白质,提取多肽氨基酸和游离氨基酸,然后用盐酸溶液全部水解得到酸溶蛋白,用IEC氨基酸分析法测定酸溶蛋白含量。多肽即为酸溶蛋白含量与游离氨基酸总含量的差值。试剂试验用水应符合GB/T6682中一级用水的规格。使用试剂除特殊规定外,均为分析纯。柠檬酸钠(Na3C6H5O7·2H2O)。盐酸(优级纯):12mol/L。乙二胺四乙酸二钠溶液:10g/L。盐酸水解溶液(6mol/L):将500mL盐酸(A.2.2)与500mL水混合,加1g苯酚,混匀。三氯乙酸溶液(150称取150g三氯乙酸,加水溶解并定容至1000mL,混匀。柠檬酸钠缓冲液[pH=2.2,C(Na+)=0.2mol/L]:称取19.6g柠檬酸钠(A.2.1),用水溶解并转移至1000mL容量瓶中,加入16.5mL盐酸(A.2.2),硫二甘醇5.0mL,苯酚1g,用水定容并过滤。氨基酸标准储备溶液:含天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸和精氨酸共17种氨基酸,各组分浓度均为2.5μmol/mL,应使用有证标准溶液。氨基酸标准工作溶液:准确移取2mL的氨基酸标准储备溶液(A.2.6)置于50mL容量瓶中,以柠檬酸钠缓冲溶液(A.2.5)定容,各氨基酸组分浓度为100nmol/mL,用安瓿分装密封,每支约1mL,在2℃~8℃下保存,有效期3个月。不同pH值和离子强度的柠檬酸钠缓冲溶液与茚三酮溶液:按照仪器说明书配制或购买。液氮。天平:感量0.1mg和0.01mg。570nm和440nm光度检测器。离心机:转速不低于4000r/min。真空泵。喷灯。恒温干燥箱:温度可达110℃±2℃。旋转蒸发器或浓缩器:可在室温至65℃间调温,控温精度±1℃,真空度可低至33.3×10Pa(25mmHg)。固体样品经多次缩分后,取出约100g,将其迅速研磨至全部通过0.25mm孔径筛,混合均匀,置于洁净、干燥的容器中,用于测定。称取上述固体试样5g,精确至1mg,置于250mL具塞三角瓶中。在10℃~35℃件下,准确加入100mL三氯乙酸溶液(A.2.5)(如样品形成小球或者团块,先均质后再振荡提取)。对于固态试样,摇匀后,于150r/min振荡30min。将上层溶液倒入100mL离心管中,在4000r/min条件下离心5min,上清液为试样提取液;如上层溶液有漂浮物,需过滤。量取上述试样提取液0.5mL~5.0mL(精确至0.1mg),置于20mL安瓿或水解管中,加适量水至溶液总体积为5mL,再加入10mL盐酸水解溶液(A.2.4),置于液氮(A.2.10)中冷冻,使用真空泵抽真空至7Pa(≤5×10-2mmHg)后用喷灯封口或充氮气1min后旋紧管盖。将安瓿或水解管放在110℃±2℃恒温干燥箱中,水解22h。冷却、混匀、开管、过滤,用移液管精确吸取适量的滤液,置于旋转蒸发器或浓缩器中,在60℃下抽真空蒸发至干,必要时,加少许水,重复蒸干1次~2次。加入3~5柠檬酸钠缓冲溶液(A.2.6)复溶,使试样溶液中氨基酸浓度达到50~250nmol/mL,摇匀,过滤或离心,上清液待上机测定。注:当试样中含有金属元素时,则在“冷却,混匀,开管”后吸取水解液2mL,准确加入10g/L的乙二胺四乙酸二钠溶液(A.2.3)2mL,混匀,然后按“过滤,用移液管精确吸取适量的滤液……上清液待上机测定”进行操作。将氨基酸标准工作溶液(A.2.8)注入氨基酸分析仪,以不同pH值和离子强度的柠檬酸钠缓冲溶液与茚三酮溶液(A.2.9)作为流动相和衍生剂,适当调整仪器操作程序及参数和洗脱用缓冲溶液试剂配比,应符合JJG1064氨基酸分析仪检定规程的要求,并保证苏氨酸-丝氨酸,甘氨酸-丙氨酸以及亮氨酸-异亮氨酸分离度分别不得小于85%90%80%。注入制备好的试样溶液和相应的氨基酸标准工作溶液进行测定,每5个样品(即10个单样)为一组,组间插入氨基酸标准工作溶液(A.2.8)进行校准。以保留时间定性,单点外标法定量。试样中氨基酸的峰面积应在标准工作溶液相应峰面积的30%~200%,否则应用柠檬酸钠缓冲溶液(A.2.6)稀释后重测。按NY/T1975的规定测定游离氨基酸的含量,检测结果保留两位小数。酸溶蛋白含量以质量分数ω1计,数值以百分率(%)表示,按式(A.1)计算:11式(A.1)中:k—氨基酸的种类数;n—试样水解溶液稀释倍数;Ai—试样溶液中第i种氨基酸的峰面积;Vhv—试样水解溶液体积,单位为毫升(mL);ci—标准工作溶液中第i种氨基酸的浓度,单位为纳摩尔/毫升(nmol/mL);Mi—第i种氨基酸的摩尔质量,单位为克/摩尔(g/mol);Vst0—氨基酸标准溶液进样体积,单位为微升(μL);Asti—氨基酸标准溶液中第i种氨基酸的峰面积;m—试样的质量,单位为毫克(mg);V0—试样溶液进样体积,单位为微升(μL);以两个平行试样测定结果的算术平均值报告结果,保留两位小数
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