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文档简介
15I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定h)增加了瓶装液体菌种检验要求(见6——2016年首次发布为DB15/T11香菇菌种制作技术规程3.13.2通过生产试验验证具有特异性、均一性和稳定性,丰产性好、抗性强的香菇菌株或品种,生长在适宜基质上具结实性的菌丝培养物,包括母种、原种和栽3.3试管和培养皿为培养容器和使用单位,也称为一级种、试3.423.53.63.7在液体培养基中,通过摇瓶震荡培养或深层发酵技4.2厂房冷却室、接种室,培养室都要有净化设施。菌种生产厂房条件符合NY/T174.3生产设备超净工作台或接种箱、恒温培养箱、培养架、摇床、液体菌种灌(30L~250L)、冰箱、显微镜等设马铃薯200g加水1200ml煮沸20min,滤液定容至1000ml,加入葡萄糖1麦粒100g加水1200ml煮沸20min,滤液定容至1000ml,加入葡萄糖10g、蔗糖10g、蛋白胨53试管选用18mm×180mm或者20mm×200mm;培养皿选用直径7cm~9cm玻璃培养皿或一次性塑分装培养基至试管1/4处,用棉塞或硅胶塞子封闭试管口,每5支试管为1把,牛皮纸包棉塞,橡皮培养基装入300ml~500ml三角瓶至刻度的2/3处,用带滤膜的封口膜封口后灭菌。培养皿用报纸包好,放入灭菌锅。121℃~122℃(0.11MPa~0.12MPa)恒温灭菌25min。5.4检测5.5接种超净工作台或接种箱内紫外灯照射30min后吹风,之后用75%酒精进行表面消毒。接菌过程严格执5.6培养在通风避光、22℃~26℃下培养。粮食培养基:谷粒、麦粒或玉米粒89%,柠过磷酸钙%,水分含量(60±2)%,石灰水调节pH6.0柠条粉60%,玉米芯20%,麸子18%,石膏1%,过磷酸钙1%,水分含量(60±2)%,石灰水调节pH值4豆秸粉60%,玉米芯20%,麸子18%,石膏1%,过磷酸钙1%,水分含量(60±2)%,石灰水调节pH值硬杂木屑87%,麦麸12%,石膏1%,水分含量(60±2)%,石灰水调节pH值到6~6硬杂木屑84%,麸皮12%,高粱壳3%,石膏1%,水分含量(60±2)%,石灰水调节pH值到6~6.1.5cm深度为8cm~12cm,每袋(瓶)装培养基500g~60每批接种应为单一品种,如中途换品种时采用75%酒精对超净工作台或接种箱及接种工具进行表面通风避光、22℃~27℃下培养。原种和栽培种0℃~4℃下贮存,贮存期不超过50d。6.2液体菌种生产在121℃~122℃(0.11MPa~0.12MPa)保持25min。5取3mm~5mm大小母种10~15块接r/min~160r/min下振荡培养6d~10接种后第3天对三角瓶逐个进行纯度检验,及时清理未活或污染的140r/min~180r/min,灌格执行无菌操作,每袋接种10m
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