质检仪器室培训教材-基础知识篇

仪器室培训教材C-)

「基础知聚篇)

目录

第一部分：化验员的基本职责和行为规范…

第二部分：化验分析的基础知识与基本操作

第三部分：化学分析

第四部分：仪器分析

第一部分：化验员的基本职责和行为规范

一、基本职责

1、遵守公司的规章制度

1.1遵守总公司的各项规章制度，按时上下班，不迟到不早退，有事请假。

1.2操作中，应注意安全，加强个人保护意识，使用易燃易爆、剧毒等危险品及消毒锅、电炉、电烤箱等高

温设备时，严格按章行事。

1.3每天下班前检查实验室的安全情况，切记关好水电门窗，保证安全。

2、严格执行质量标准及操作规程，及时准确完成检验

2.1严格按取样规定取样，保证抽样的代表性，并按规定分样和留样

2.2要认真学习并掌握检验操作规程和仪器操作细则，严格按规程操作，保证检验结果准确无误，不得错检、

漏检、误检。

2.3接到样品必须及时检测，保证在检验周期或规定时间内检出•如有特殊情况，必须向有关领导汇报。

3、准确及时填写各种记录

3.1按要求真实、及时、正确填写各种仪器使用记录及批化验记录。化验记录应如实记录操作过程中的数据

及现象，并计算结果，操作人签名后，复核人要认真复核并签名。

3.2及时、准确填写试剂领用记录、仪器使用记录、流动相配制记录、色谱柱使用记录、标准品、对照品

领用及使用记录等

4、提高业务水平

认真参加公司、处、室组织的业务技术培训，积极钻研业务，努力提高技术水平

5.及时汇报异常情况

5.1熟练掌握各产品检验标准，对不合格或边缘检测数据及时向室主任、工程师汇报，并及时组织复测。

5.2实验时有异常情况及时汇报给本室工程师或室主任，并协同查找原因，妥善处理

6、自觉遵守定置定位管理

6.1做好各种检测仪器的日常维护及保养。

6.2实验室内各种物品放置不能随意更换地方，不能随便在实验台

摆放东西，各种物品、试剂用完后立即放回原处。

7、完成领导交给的各项任务

服从安排，及时准确完成临时安排的工作任务

二、行为规范

见QC质量管理文件（文件登记号：QC-7001A）»

第二部分：化验分析的基础知识与基本操作

一、化验室的常用设备与仪器：

1:电热设备：

1.1电炉、电热套、电热板：是化验室中常用的加热设备，靠电阻丝通电来加热。

注意事项：1：电压电压应和设备本身规定的电压相符；2：加热容器是玻璃制品和金属制品时，电炉

上应垫上石棉网；3：防止液体溅落导致漏电；

1.2马弗炉：主要用于炽灼残渣的测定，灼烧完毕后，先切断电源，再将炉门打开一条小缝，使温度

慢慢降下来；夜间无人时不要用。

1.3电热恒温干燥箱：放入供试品时不能排列太密，散热板上不能放置样品；禁止烘易燃、易爆、易

挥发及有腐蚀性的物品。

L4恒温水浴锅：水位一定不能低于电热管，一般不高于水浴锅容量的2/3。

1.5真空干燥器：

2、常用玻璃仪器及洗涤方法

2.1常用玻璃仪器

名称主要用途注意事项

烧杯配制溶液，溶样加热时置石棉网上

锥形瓶加热处理样品，滴定分析加热时置石棉网上，打开塞子

碘量瓶碘量法，挥发性物质滴定分析加热时置石棉网上，打开塞子

量筒粗略量取一定体积的液体不能加热

容量瓶配制准确体积的溶液漏水的不能用，不能直接火加热，可水浴加热

活塞要原装，漏水不能用，不能加热，不能长期

滴定管容量分析的滴定操作

存放碱液，碱管不能放与橡皮作用的标准溶液

移液管准确移取一定量的体积

扁形用于测定水分或在烘箱中

称量瓶不可盖紧磨口塞烘烤

烘干基准物；高形用于称量物质

分液漏斗主要用于萃取分离和提取磨口塞必须原配，不能加热

普通试管离心管可在离心机中分离溶液普通试管可直接在火上加热，不能骤冷；离心管

和离心管和沉淀只能水浴加热

比色管光度分析不可直接在火上加热，不可用去污粉刷洗

抽滤瓶抽滤时接受液体属于厚壁容器，能耐负压；不可加热

研钵研磨固体试剂及试样不能研磨与玻璃作用的物质，不能撞击和烘烤

保持烘干或灼烧过的物质的干底部放变色硅胶或其他干燥剂，盖磨口处涂凡士

干燥器

燥林，不可将红热的物体放入

砂芯玻璃

过滤必须抽滤，不能骤冷骤热，不能过滤HF、碱等

漏斗

2.2玻璃仪器的洗涤方法【参见质量管理文件文件编号：】

洗涤步骤：水刷洗一一再用低泡沫洗涤液刷洗(不可用去污粉)一一冲洗洗涤剂，再用自来水洗3遍

一用蒸储水洗三遍一一洗净的仪器倒置时，水流出后，器壁应不挂水珠。

几种常用的洗液

洗液使用方法

工业盐酸(浓或1+1)用于洗去碱性物质及大多数无机物残渣

纯酸洗液

用于除去微量的离子

(1+1)、(1+2)或(1+9)的盐酸或

常规方法洗净的仪器浸泡浴纯酸洗液中24h

硝酸(除去Hg、Pb等杂质)

碱性洗液10%Na0H水溶液加热使用，去油效果较好

清洗油污或其他有机物质，洗后容器玷污处有二氧化

碱性高锌酸钾洗液30g/L高镒酸钾

镭析出，再用浓盐酸或草酸洗液、硫酸亚铁、亚硫酸

溶液&lmol/L的NaOH的混合溶液

钠等还原剂去除

酸性草酸或酸性羟胺洗液

10g草酸或1g盐酸羟胺，溶于100ml洗涤氧化性物质如二氧化锦

(1+4)盐酸溶液中

碘-碘化钾溶液

洗涤用过硝酸银滴定液后留下的黑褐色玷污物，也可

1g碘和2g碘化钾溶于水中，用水稀

用来擦洗沾过硝酸银的白瓷水槽

释至100ml

3、天平

3.1工作原理

天平从构造原理可分为机械天平和电子天平两大类。

机械天平的工作原理是杠杆原理；

电子天平采用电磁力平衡的原理，它是将被称物的质量产生的重力通过传感器转换成电信号来表示被

称物的质量的，称量结果实际上是被称物重力的大小，与重力加速度有关，因此在安装后或移动后必须校

准。

3.2电子天平的使用方法：

使用前检查天平是否水平，调整水平一一预热至少30分钟一一校准一一称量一一清洁。

3.3电子天平使用注意事项：

在称量之前必须要校验：可采用5点校验法，分别用10mg、50mg、lOOmg、1g、10g或其他重量的祛码

进行校验，误差应符合规定;

天平内不得放入超出称量范围的物品，称量前可在托盘天平上粗称一下；

带磁性的物品不得接近天平；

称量腐蚀性、易挥发性的化学物品，应放入密闭的容器内称量：热冷的物品先放在干燥器至恒温，再

称量；

称量时物品要轻拿轻放，玻璃门轻开轻关，称量完毕后及时清扫托盘。

3.4电子天平的日常维护

天平内硅胶应呈兰色，如有1/3变为红色，应马上更换硅胶并关门平衡半小时后再使用；

每次称样完毕后及时清扫托盘；

天平如不水平，用天平防护罩后部的水平调节脚，将气泡调节至水平中央；

电子天平长时间不用时应每隔一段时间通电一次，保持电子元器件干燥，特别时湿度大时更应该通电。

二、溶液的配制与浓度计算

1、标准溶液的配制与标定

1.1几个基本知识点：

①溶液的定义：一种以分子、原子或离子状态分散于另一种物质中构成的均匀而又稳定的体系叫溶液。

溶液有溶质和溶剂组成。物质在水中溶解能力的大小可用溶解度来衡量，即在一定稳定下，某种物质在100g

溶剂中达到溶解平衡状态时所溶解的克数。

②化学试剂的分类：无机、有机、基准、特效、仪器分析试剂、生化试剂、指示剂、高纯物质、标准

物质、液晶。

溶液浓度的表示方法：在国际标准和国家标准中，A-溶质，B-溶剂。

常用的有：B的物质的量浓度（单位：mol/L）、B的质量分数（单位如：mg/g）、比例浓度（如：（1+5）

HC1溶液一表示1体积市售浓盐酸与5体积蒸镯水混合而成的溶液）。

常用酸、碱试剂的密度和浓度

质量分数物质的量浓

名称化学式分子量密度(g/ml)

（W%）度（mol/L）

浓硫酸H2S0498.081.849618

浓盐酸HCL36.461.193712

浓硝酸HN0363.011.427016

浓磷酸H3PO498.001.698515

冰醋酸CII3COOI160.051.059917

高氯酸HCL04100.461.677012

浓氢氧化钠NaOH40.001.434014

浓氨水NH317.030.902815

③滴定度：T

T------是指1ml标准溶液相当于被测物的质量，mg/ml或g/ml表示。

1.2、滴定分析用标准溶液的一般规定：

制备标准溶液用水，未注明其他要求时，应符合国标三级水的规格。

所用试剂纯度应在分析纯以上；

所用天平、滴定管、容量瓶及移液管均需要定期校正；

标定标准溶液所用的基准试剂应为容量分析工作基准试剂；

制备标准溶液的浓度系指20℃时的浓度，在标定和使用时，如温度有差异，应进行补正；

标定标准溶液时，平行实验不得少于8次,两人各做4次平行测定,4次测定结果的极差不得大于0.1%。

标定结果取平均值，浓度值取4位有效数字；

制备的标准溶液浓度与规定浓度相对误差不得大于5%；

配制浓度等于或低于0.02mol/L时，应于临用前将高浓度的标准溶液用煮沸并冷却的水稀释，必要时

重新标定。

碘量法反应时，溶液的温度不能过高，一般在15〜20"C之间；

标准溶液的有效期一般为3个月。

1.3常用的基准物质

名称化学式式量使用前的干燥条件

碳酸钠NaC03105.99270〜300C

邻苯二甲酸氢钾KHC8H404204.22105〜110℃

重格酸钾K2Cr207294.18120℃

三氧化二碑As203197.84浓硫酸干燥器中干燥至恒重

草酸钠Na2C204134.00105〜110C

碘酸钾KI03214.00130℃

漠酸钾KBrO3167.00130℃

用2%乙酸，水，乙醇依次洗涤后，放干燥

铜Cn63.546

器中保存24h以上

用1+3HCL,水，乙醇依次洗涤后，放干燥

锌Zn65.38

器中保存24h以上

氧化锌ZnO81.39800〜900℃

碳酸钙CaCO3100.09110℃

氯化钠NaCL58.44500〜600℃

氯化钾KCL74.55500〜600℃

硝酸银AgN03169.87浓硫酸干燥器中干燥至恒重

1.4标准溶液的配制&标定

标准溶液一般按照物质的量浓度来进行配制&计算。

标定的方法一般有两种：直接标定一一准确称取-定量的基准物质，溶于水后用待标定的溶液滴定，至反

应完全。根据所消耗的待标定溶液的体积和基准物质的质量，计算出待标定溶液的准确浓度。

间接标定一一有一部分标准溶液，没有合适的用以标定的基准试剂，只能用另一已知浓度的标准溶液来标

定。如乙酸溶液用氢氧化钠溶液来标定，草酸溶液用高锦酸钾溶液来标定。

1.5.配制溶液注意事项

分析实验所用的溶液应用纯水配制，容器应用纯水洗三遍，特殊要求的溶液应事先做纯水的空白值校

验，如配制硝酸银，应检查水中无氯离子，EDTA应检查水中无阳离子。

溶液要用带塞的试剂瓶盛装，见光易分解的溶液要用棕色瓶，挥发性的溶液瓶塞要紧，浓碱溶液要放

在塑料瓶中，不能用玻璃塞子；

每瓶试剂必须有表明名称、浓度、配制日期、配制温度、标定人员的标签；

配制硫酸、磷酸、硝酸、盐酸等溶液时，都应把酸倒入水中；

配制有机溶剂时，应不断搅拌，可水浴加热，最好在通风厨中进行；

不能用手接触腐蚀性及有剧毒的溶液。剧毒废液应做解毒处理，不可直接倒入下水道。

2、缓冲溶液、试液

缓冲溶液是一种能对溶液的酸度起稳定作用的溶液。向缓冲溶液中加入少量强酸或强碱（或因化学

反应产生了少量酸或碱），或将溶液稍加稀释，溶液的酸度基本保持不变，这种作用称为缓冲作用，具有缓

冲作用的溶液称为缓冲溶液。

参照药典进行配制，详见2005版药典附录。

3、指示剂

参照药典进行配制，详见2005版药典附录。

第三部分：化学分析

一、滴定分析

1、几个术语：

标准溶液：已知准确浓度的溶液；

滴定：将标准溶液通过滴定管滴加到被测物质溶液中的操作；

化学计量点：在滴定过程中，滴定剂与被测组分按照滴定反应方程式所示剂量关系定量地完全反应时称为

化学计量点。

指示剂：指示化学计量点到达而能改变颜色的一种辅助试剂；

滴定终点：因指示剂颜色发生明显改变而停止滴定的点；

终点误差：滴定终点与化学计量点不完全吻合而引起的误差，也称滴定误差。

酸：根据质子理论能够给出质子的称为酸；

酸：根据质子理论能够接收质子的称为碱。

2、滴定分析分类：酸碱滴定、配位滴定、氧化还原滴定、沉淀滴定

3、酸碱滴定:

1.1方法概述：酸碱滴定法是以酸碱反应为基础的滴定方法，滴定剂通常是强酸或强碱，被测物是以酸碱

及能与酸碱直接或间接起反应的物质。

酸碱滴定主要掌握三点：学会判断那些物质能用酸碱滴定法测定；了解滴定过程中溶液pH的变化，尤

其是化学计量点附近溶液pH的变化；正确选择指示剂。

酸碱滴定一般没有外观变化，常需借助指示剂的颜色改变来确定滴定终点。

3.2酸碱指示剂

变色原理：酸碱指示剂一般是结构复杂的有机弱酸或弱碱，它们的酸式和其共扼共舸碱式具有不同的

颜色。在滴定过程中，溶液pH改变时，指示剂或给出质子有酸式变为其共规碱式，或接收质子有碱式变为

其共扼酸式，引起结构的变化。结构的改变引起颜色的变化。

变色范围：指示剂开始变色至变色终了时所对应的pH范围称为指示剂的变色范围。

常用的酸碱指示剂

指示剂变色范围颜色pKnin（理PT实际浓度

酸色碱色论变色滴定终点

点）

百里酚蓝（第一1.2-2.8红黄1.62.60.1%（20%乙醇溶液）

次变色）

甲基黄2.9——4.0红黄3.33.90.1%（90%乙醇溶液）

甲基橙3.1——4.4红黄3.440.05%水溶液

澳酚蓝3.1—4.6黄紫4.140.1%（20%乙醇溶液），

或指示剂钠盐的水溶液

澳甲酚绿3.8—5.4黄蓝4.94.40.1%水溶液,每100mg

指示剂加

0.05mol/LNa0H2.9ml

甲基红4.4—6.2红黄5.05.00.1%（60%乙醇溶液）,

或指示剂钠盐的水溶液

滨百里酚蓝6.0—7.6黄蓝7.370.1%（20%乙醇溶液）,

或指示剂钠盐的水溶液

中性红6.8—8.0红黄橙7.40.1%（60%乙醇溶液）

酚红6.7—8.4黄红8.070.1%（60%乙醇溶液）,

或指示剂钠盐的水溶液

酚酸8.0—9.6无色红9.10.1%（90%乙醇溶液）

百里酚蓝（第二8.0—9.6黄蓝8.990.1%（20%乙醇溶液）

次变色）

百里酚酷9.4—10.6无蓝10.0100.1%（90%乙醇溶液）

混合指示剂：在酸碱滴定中，有时需要将滴定终点限制在很窄的pH范围内，可采用混合指示剂。

酸碱指示剂由于它们的指示剂常数不同，其变色范围、理论变色点&实际滴定终点不同；各种指示剂

的变色范围的幅度各不相同，一般不大于2个pH单位，也不小于1个pH单位；在酸碱滴定中，有时需要

将滴定终点限制在很窄的pH范围内，可采用混合指示剂。

3.3应用实例略

4、配位滴定

4.1、方法介绍：利用形成配合物反应为基础的滴定分析方法成为配位滴定法，也叫络合滴定。常用的滴定

剂为EDTA滴定液。常用的指示剂为金属指示剂，如铝黑T（EBT）、钙指示剂（NN）、二甲酚橙（X0）、PAN、K-B

指示剂、磺基水杨酸（SS）.

4.2应用实例

5、氧化还原滴定法

5.1方法介绍：以氧化还原反应为基础的滴定分析法。它是以氧化剂或还原剂为标准溶液来测定还原性或氧

化性物质含量的方法。根据所用标准溶液，将氧化还原法分为以下几类：

高镒酸钾法一一以高镒酸钾为标准溶液

重倍酸钾法一一以重铭酸钾为标准溶液；

碘量法一一以碘&硫代硫酸钠为标准溶液；

澳酸钾法一一以澳酸钾一一溪化钾为标准溶液

酸碱反应是离子互换反应，氧化还原反应是电子转移反应，反应速度快慢不一，受外界影响较大。

5.2应用实例

6、沉淀滴定法

沉淀滴定法是以沉淀反应为基础的滴定分析法，应用较多的是银量法.根据所用指示剂不同可分为：

莫尔法一一以重铭酸钾为指示剂

佛尔哈德法一一以铁铁矶为指示剂

法扬司法一一采用吸附指示剂

7、滴定分析计算与数据处理

7.1.直接滴定法计算略

7.2反滴定法德计算略

二、常用理化检测仪器与检测方法

1、熔点测定

1.1熔点是按照规定的方法测定物质有固体转为液相时的温度。它可以鉴别&检查样品的纯杂程度。根据

待测物性质的不同可分为3种方法：测定易粉碎的固体药品：测定不易粉碎的固体药品（如脂肪酸、石

蜡、羊毛脂等）；测定凡士林或其他类似物质.

1.2仪器：熔点仪-----加热用容器、电磁搅拌器、毛细管（内径0.9—1.1mm,厚度0.10—0.15mm,厂

9cm以上）、温度计；

传温液：测定80C以下的样品，用水，用前加热至沸脱气，放冷。测定80℃以上的样品，用硅油或液

状石蜡。

药品检验用熔点标准品专供测定熔点时校正温度计用。

1.3第一法的操作要点&注意事项：

1.3.1供试品的预处理一般取“干燥失重”项下的样品测定。若不检查干燥失重，对熔点低限在135℃以

上而受热不分解的品种，可采用105℃干燥；对熔点在135℃以下或受热分解的品种，可在五氧化二磷干燥

器中干燥过夜。

13.2取两端熔封的毛细管，用前据掉一端，装入供试品，借助玻璃管，使供试品紧密集结于底部，高度约

为3mmo

1.3.3温度计悬挂于加热容器中，使温度计汞球的底端处于加热面的上方2.5cm以上；升温速率1.0~1.5℃

（熔融同时分解的样品升温速率为2.5〜3.0℃）。

1.3.4当传温液的温度上升至规定的熔点低限10℃时，放入装有供试品的毛细管，记录供试品在毛细管内

开始局部液化并出现明显的液滴时的温度作为初熔温度，全部液化时的温度作为全熔温度。

1.3.5传温液的升温速率必须严格按照规定操作。

1.3.6初熔之前，毛细管内的供试品可能出现发毛、收缩、软化、出汗等现象，在未出现局部液化的明显液

滴和持续熔融过程时，均不作初熔判定。

1.3.7全熔时毛细管内的液体应完全澄清。

1.4结果与判断

1.4.1对熔点的温度读数时都要估读到0.1℃,每一个样品至少测定3次，3次读数的极差不大于0.5℃,

且不在合格与不合格的边缘时，可取3次的平均值；若3次读数超过0.5℃,可重复测定2次，取5次的平

均值。

1.4.2测定结果的数据按照0.5℃间隔进行修约：0.1~0.2℃舍去，0.3〜0.7℃修约为0.5℃,0.8~0.9℃

修约为1℃,并按照修约后的数据进行报告。

1.4.3经修约后的初熔、全熔或分解突变时的温度均在各品种项下规定的范围以内时，判为符合规定，否则

不符和规定。

2、旋光度测定

2.1旋光度：许多化合物具有光学活性，即平面偏振光通过其液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的

平面向左或向右发生旋转，偏转的度数称为旋光度。使偏振光向右旋转者称为右旋物质，以“+”表示；使

偏振光向左旋转者称为左旋物质，以“一"表示；

比旋度：当偏振光通过长1dm,每1ml中含有旋光物质1g的溶液，测定的旋光度称为该物质的比旋度。以

[a]J表示。通常测定温度为20℃,使用钠光谱的D线（589.3nm）,[a]/。表示。

2.2旋光仪：2005版药典规定使用度数精度达到0.01°的旋光仪。

2.3比旋度的测定：

测定温度20C±0.5℃,使用波长589.3nm的钠D线（汞的404.7nm和546.Inm也有使用）。

纯液体样品测定时以干燥的空白测定管校正仪器零点，溶液样品则用空白溶剂校正仪器零点。供试液

与空白溶剂用同一测定管，每次测定应保持测定管方向、位置不变。

旋光度读数应重复3次，取其平均值，以干燥品或无水物来计算结果。

2.4注意事项：

开机前取出样品室内的物品，预热20min；

温度对物质的旋光度有一定影响，必要时可对样品进行恒温处理。

测定应使用规定的溶剂，供试液如果不澄清，应滤清后再用，加入测定管时，应先用供试液冲洗数次;

如果有气泡，应使其浮于测定管凸径处；旋紧螺帽，用力不要过大；两端的玻璃窗应用滤纸与镜头纸擦干。

测定管不可以在干燥箱中加热，使用酸碱溶剂或有机溶剂后，必须立即洗脱晾干，以免造成金属腐蚀

或橡胶垫圈老化。仪器不用时样品室内可放置硅胶以保持干燥。

按规定或根据读数精度配制供试品溶液，通常是读数误差小于±1.0%。若供试品溶解度小，尽量使用

2dm的测定管，提高旋光度，减小测定误差。供试液配好后及时测定。

2.5计算与结果判定：供试品的比旋度计算公式：

a

液体样品[a]J=

Id

100a

固体样品[a]J=

lc

式中：A为使用光源的波长；t为测定温度；1为测定管的长度，dm；a为测得的旋光度；d为液体的

相对密度；c为100ml溶液中含有被测物质的重量，g（按干燥品或无水物计算）。

结果的判定：药典规定的比旋度多有上下限度或最低限度，根据公式计算得出供试品的比旋度，判定是

否合格。测定含量时，取2份供试品测定，读数结果其极查应在0.02°以内，否则重做。

3、pH测定法

3.1、pll测定法：是测定水溶液中氢离子活度的一种方法，pH值即水溶液中氢离子活度（以每1000ml中摩

尔数计算）的负对数，pH=Toga”,。pH值测定常用的电极为玻璃电极和保护甘汞电极，现在广泛使用指示

电极与参比电极组合一体的复合电极。

3.2、酸度计：主要有pH测量电极和pH指示器（电位计）两部分组成.

3.3、测定方法：

严格按照说明书与注意事项操作；

测定之前，选择两种标准缓冲液进行校正。仪器校正用的标准缓冲液：草酸盐缓冲液（pHl.68）、苯二

甲酸盐缓冲液（PH4.00）、磷酸盐缓冲液（pH6.86）、硼砂缓冲液（pH9.18）、氢氧化钙缓冲液（pH12.45）。

按照规定取样或制备样品测定。

3.4注意事项

测定前选用两种pH约相差3个单位的标准缓冲液，使供试品溶液的pH处于两者之间。

配制标准缓冲液与供试液的水为新沸过的冷水，标准缓冲液最好新鲜配制，一般可保存2〜3个月。

每次更换溶液时，应用纯化水充分冲洗电极，然后将水吸干。

测定高pH供试品时，应注意碱误差的问题，平衡稳定后再进行读数。

仪器开关、插头应保持干燥，注意操作环境的温度，温度对电极电位影响较大

新玻璃电极应在水中浸泡24h后再用，甘汞电极中应充满饱和氯化钾溶液，不得有气泡，盐桥中应保

持少量的氯化钾晶体，但不可结块。

如用标准缓冲溶液校正不到规定值时，电极可能被污染，需更换。

4、氯化物检查法

略

5、硫酸盐检查法

略

6、重金属检查

6.1、重金属是指在规定试验条件下能与显色剂作用显色的金属杂质。2005版药典采用硫代乙酰胺试液或硫

化钠试液作显色剂，以铅的限量表示。

由于试验条件不同可分为4种方法：第一法适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中进行显色的重

金属限度检查；第二法适用于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残渣，经处理后在酸性溶液中进

行显色的重金属限度检查；第三法用来检查能溶于碱而不溶于酸（或在稀酸中即生成沉淀）的药品中的重

金属；第四法用微孔滤膜过滤，使重金属硫化物沉淀富极成色斑，用于有色溶液或重金属限度较低的品种。

重金属硫化物生成的最佳pH值是3.0~3.5,选用醋酸盐缓冲液（pH3.5）2.0ml调节pH值较好，显色

剂硫代乙酰胺试液用量以2.0ml最佳，显色时间为2分钟。以10~20ug的Pb与显色剂所产生的颜色为最

佳目视比色范围。

在药品生产中遇到铅的机会较多，以铅为重金属的代表，用硝酸铅配制标准铅溶液。

6.2标准铅溶液：硝酸铅溶液：每1ml中含有10ug的Pbo

6.3注意事项：

标准铅溶液应在用前新鲜配制，使用的玻璃容器均不得含有铅。

重金属硫化物生成的最佳pH值是3.5,配制醋酸盐缓冲液（pH3.5）时要用酸度计调节，硫代乙酰胺试

液用量以2.0ml最佳，显色时间为2分钟；第四法检测限量低2〜5ug的铅，硫代乙酰胺试液用量以1.0ml,

显色时间为10分钟。

标准铅溶液的用量（L2.3法）以2.0ml为宜，小于1.0ml或大于3.0ml,呈色太深或太浅，不利于目

视比较。

如果需要用炽灼残渣项下遗留的残渣做重金属时，灼烧温度必须控制在500〜600C；某些供试品（如

安乃近，诺氟沙星等）在灼烧时能腐蚀瓷用埸而带入较多的重金属，应改用石英用烟或伯生期。

灼烧残渣加硝酸处理，必须蒸干，至氧化氮蒸气除尽，否则会使硫代乙酰胺试液因水解生成的硫化氢,

因氧化析出硫，影响测定，蒸干后残渣加盐酸处理，使重金属转化为氯化物，在水浴上蒸干除去多余的盐

酸，加水溶解，加入酚献指示液1滴，再逐滴加入氨试液，边加边搅拌，至溶液刚显浅红色，再加入醋酸

盐缓冲液。

供试品中如有高铁盐，在若酸性溶液中会使硫代乙酰胺试液水解生成的硫化氢，因氧化析出硫，可加

入抗坏血酸将高铁离子还原为亚铁离子而消除干扰。

如果供试品自身为重金属的盐，在检查其他重金属时，必须先将供试品本身的金属离子除去，在进行

检查。

药物本身生成的不溶性硫化物，影响重金属检查，可加入掩蔽剂以避免干扰。

为了消除盐酸或其他试剂可能夹杂重金属，在配制供试品溶液时，使用盐酸超过L0ml,或使用氨试液

超过2.0ml,以及用硫酸或硝酸进行有机破坏，对照溶液应取同样量试液蒸干后，依法检查。

当采用第四法时，将注射器套于滤器上，让注射器内管自然下降，产生的压力比较均匀，过滤速度

Iml/min,对于粘稠的溶液，可加压达到此速度。注意排除气泡，&漏气。

5.5计算：

标准铅溶液的浓度：10ug/ml。

标准铅溶液的体积*标准铅溶液的浓度

重金属限量％=-----------------------------------------*100%

供试品的量

重金属的限度*供试品重量

标准铅溶液的取用量=-------------------------------------H00%

标准铅溶液的浓度

7、干燥失重

7.1方法简述：药品的干燥失重指药品在规定条件下干燥后所减失重量的百分率。减失的重量主要使水分、

结晶水及其他挥发性物质。

测定方法常采用烘箱干燥法（对热稳定的药品）、恒温减压干燥（对热不稳定或其水分较难除尽的药品）

及干燥器干燥（不能加热干燥的药品，减压有助于除去水分&挥发性物质）.

干燥器中常用的干燥剂为硅胶、五氧化二磷或无水氯化钙，恒温减压干燥箱中常用的干燥剂为五氧化

二磷。

7.2、注意事项

干燥失重的数据将直接影响原料的含量测定结果，样品有引湿性时，含量&干燥失重的取样最好放在

同一时间。

供试品如未达到规定的干燥温度即融化时，应先将供试品在较低的温度下干燥至大部分水分除去后,

在按照规定条件干燥。

设定烘箱的温度时，应注意加热温度有冲高现象，必要时先设定略低于规定温度，待温度稳定后，在

调高至规定温度。

减压干燥，除另有规定外，压力应在2.67kpa(20mmHg)以下，若瓶盖为双层中空，瓶盖应放在另一个

普通干燥器内。减压干燥内部为负压，开启前应注意缓缓旋开进气阀，并避免气流吹散样品。

初次使用新的减压干燥器时，应先将外部用厚布包住，以防破碎伤人。

恒温减压干燥时，除另有规定外，温度为60C,装有供试品的称量瓶尽量放在温度计附近，以免温度不均

匀产生温度误差。

多个供试品同时测定干燥失重时，不要混淆。

称定称量瓶&供试品以及干燥后的恒重，均应准确至0.Img位。

7.3计算：

W1+W2-W3

干燥失重％=--------------*100%

W1

8、费休氏水分测定

第四部分：仪器分析

一、分光光度法

二、色谱法

基本原理：色谱法作为一种分离方法，它利用物质在两相中吸附或分配系数的微小差异达到分离目的。

当两相作相对移动时，被测物质在两相之间进行反复多次的分配，这样使原来原来微小的分配差异产生了

很大的效果，达到分离、分析及及测定一些物理化学常数的目的。其特点是能将复杂的混合物分离为各个

有关的组成后，逐个加以检测。

分类：根据分离原理可以分为：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、与分子排阻色谱；按分离方法分

类：纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法等。

1、薄层色谱法

2、高效液相色谱法

HPLC法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法.注入的

供试品，由流动相带入色谱柱内，各成分在柱内被分离，并依次进入检测器，有数据处理系统记录色谱信

号。

2.1、几个重要的色谱参数：

固定相与流动相：色谱过程中不同组分在相对运动、不相混溶的两相间交换，其中相对静止的一方称

为固定相，另一个相对运动的相称为流动相。

保留时间(册)：组分从进样开始到柱后出现峰最大值所需的时间为保留时间，而在保留时间内流动相

流过的体积为保留体积。

死体积(Vo)与死时间(t。)：在色谱柱内不保留组分的流出时间为死时间，；当柱外体积可以忽略不计

时，死体积等于柱内流动相所占有的体积。

理论板数板N=5.54(t/Wh/2)%

分离度R：两个相邻色谱峰的分离程度，以两个组分保留值之差与其平均峰宽值之比表示，公式R=2

(加-tR1)/(W,+W2)，定量分析时,分离度R〉1.5。

托尾因子T：在峰高5%的峰宽与峰极大到前伸沿之间2倍距离之比，公式T=W°.蝴/2山，峰高法定量

时，T应在0.95〜1.05之间；峰面积定量时，T过大也会影响定量的准确度。

2.2高效液相色谱仪介绍：

高效液相色谱仪基本组成单元：输液系统、进样器、分离柱、检测器和数据处理系统。

2.2.1输液系统：

输液系统包括储液器及脱气装置、高压输液泵和梯度洗脱装置。

储液器：用于存储足够量的、符合HPLC要求的流动相。要求：足够的容积、与流动相不发生反应、便

于储存的流动相脱气、与其它部件连接方便。流动相常用的脱气方式：真空脱气、在线脱气和超声波脱气。

高压输液泵要求：流量稳定，输出的流动相基本无脉冲，流量精度和重复性优于0.3%；流量范围宽，

分析型一般可在0.1〜范围内连续可调；输出压力高，密封性好；泵死体积小，有利于流动相的

更换；耐腐蚀性好；具有梯度洗脱功能。高压输液泵按性能可分为恒压泵和恒流泵。恒压泵可以输出压力

稳定不变的流动相；恒流泵无论柱系统阻力如何变化都可以保证其流量基本不变。

梯度洗脱装置：采用两种不同极性的溶剂，在分离过程中按照一定程序连续改变流动相的浓度配比和

极性的一种洗脱模式。梯度洗脱可以通过流动相极性的变化来调整被分离样品的选择因子和保留时间，以

使柱系统具有最好的选择性和最大的峰容量。

2.2.2进样系统：

进样系统是将待分析样品引入色谱柱的装置。包括取样、进样两种功能，有手动和自动两种方式。手

动：注射器、阀进样装置；自动进样器。

2.2.3色谱柱：

色谱柱担负着样品的分离作用，柱效高、选择性好、分析速度快是对色谱柱的一般要求。常用的色谱

柱内径是2〜5mm,色谱柱填充剂为化学键合硅胶。

色谱柱的填料：反相色谱系统使用非极性填充剂，以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用；正相色谱系统

使用极性填充剂，常用的填充剂是硅胶；离子交换填充剂用于离子交换色谱；凝胶或高分子多孔微球等填

充剂用于分子排阻色谱；手性键合填充剂用于对映异构体的拆分分析。

使用范围：以硅胶为载体的一般键合固定相填充剂适用pH2〜8的流动相。当pH>8时，可使载体硅胶

溶解，当pll<2时，与硅胶相连的化学键合相易水解脱落。色谱系统中需使用pll>8的流动相时，应选用

耐碱的填充剂，如采用高纯硅胶为载体并具有高表面覆盖度的键合硅胶、包裹聚合物填充剂、有机-无机杂

化填充剂或非硅胶填充剂；色谱系统中需使用pH<2的流动相时，应选用耐酸的填充剂，如具有大体积侧

链能产生空间位阻保护作用的二异丙基或二异丁基取代十八烷基硅烷键合硅胶、有机-无机杂化填充剂等。

2.2.4检测器：

最常用的检测器为紫外检测器，其它的有二极管阵列检测器（DAD），荧光检测器、示差折光检测器、

蒸发光检测器、电化学检测器和质谱检测器。

紫外、二极管阵列、荧光、电化学检测器为选择性检测器，其响应值不仅与待测溶液的浓度有关，还

与化合物的结构有关；示差折光检测器和蒸发光检测器为通用型检测器，对所有的化合物均有响应；蒸发

光散射检测器对结构类似的化合物，其响应值几乎仅与待测物的质量有关；二极管阵列检测器可以同时记

录待测物在规定波长范围内的吸收光谱，故可用于待测物的光谱测定和色谱峰的纯度检查。

紫外检测器工作原理：朗伯-比尔定律，即当一束单色光通过样品池时，若流动相不吸收光，则吸光度

与吸光组分的浓度和样品池的光径长度成正比。

优点：灵敏度高、噪音低、线性范围宽、对流速和温度的波动不灵敏，适用于梯度洗脱及制备色谱；

缺点：只能检测有紫外吸收的物质，流动相的截止波长必须小于检测波长。

适用范围：大多数有紫外吸收的化合物。

荧光检测器工作原理：具有某种特殊结构的化合物受到紫外光激发后能发射出比激发光源波长更长的

光，称为荧光。荧光强度与激发光强度及荧光物质浓度成正比。

优点：灵敏度高、选择性好，是微量组分和体内药物分析常用的检测器之一；缺点：只适用于能产生

荧光的物质的检测，影响因素较多，对溶剂的纯度、pH值、样品浓度，检测温度需要很好的控制。

适用范围：主要用于氨基酸、多环芳烧、维生素、留体化合物及酶的检测。

电化学检测器是测量物质的电信号变化，对具有氧化还原性质的化合物，如硝基、氨基等有机化合物

及无机阴阳离子等物质可采用电化学检测器。工作原理：在两电极之间施加一恒定电位，当电活性组分经

过电极表面时发生氧化还原反应，电量的大小符合法辣第定律：Q=nFNQ-电量，n为每摩尔物质在氧

化还原过程中转移的电子数，F为法辣第常数，N为物质的摩尔数。

优点：灵敏度很高，尤其适用于痕量组分分析；缺点：干扰比较多，电极寿命有限，对温度和流速的

变化比较敏感。

适用范围：应用范围广，凡具有氧化还原活性的物质都能检测，本身没有氧化还原活性的物质经过衍

生后也能检测。

蒸发光散射检测器工作原理：将色谱洗脱液引入雾化器与通入的气体混合形成均有的微小液滴，经过

加热的漂移管蒸发除去流动相而样品组分形成气溶胶，然后进入检测室，用强光或激光照射气溶胶产生光

散射，用光电二极管检测散射光。

优点：通用型检测器，对各种物质有几乎相同的响应；缺点：灵敏度相对较低，流动相必须是挥发性

的；适用范围：适用于挥发性低于流动相的组分，主要用于糖类、高级脂肪酸、磷脂、维生素、氨基酸、

甘油三酯等无紫外吸收或紫外末端吸收的化合物的检测。

2.2.5HPLC的使用：

操作前的准备：

流动相的制备：用高纯度的试剂，水应为新鲜制备的高纯水，凡规定pH值的流动相应使用酸度计调节,

配好的流动相应用0.45um的滤膜过滤，用前脱气。

供试品溶液的制备：

检查上次使用记录和仪器状态。

操作：

泵的操作：更换流动相，冲洗泵，调节至分析流速平衡色谱柱；

进样操作：把进样器置于LOAD位置，用平头注射器抽取不少于定量环容积5倍的样品，排除气泡，插

入进样器底部，注入供试品溶液后，将手柄转至INJECT位置。或采用自动进样器。

色谱数据的收集和处理：使用色谱工作站采集图谱处理数据。

清洗和关机

分析完毕后，关闭检测器，用适当的溶剂清洗色谱系统，正相柱一般用正己烷，反相柱如使用盐，则

先用水，然后用甲醇保存；冲洗完毕后，降低流速至0,关泵，进样器也应用相应的溶剂冲洗；关闭电源,

作好登记。

2.2.6系统适用性试验：

系统适用性试验通常包括理论板数、分离度、重复性和托尾因子四个指标。

色谱柱的理论板数(n)：在规定的色谱条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，

记录色谱图，量出供试品主成分峰或内标物质峰的保留时间tR和半高峰宽M2,按照n=5.54(tR/Wh/2)%

分离度(R)：无论是定性鉴别还是定量分析，均要求待测峰与相邻峰之间有较好的分离度，分离度的

计算公式为：R=2（tR2-tR1）/（W,+W2）；

重复性：取各品种项下的对照溶液，连续进样5次，除另有规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差

应不大于2.0%；

托尾因子（T）：为保证分离效果和测量精度，应检查待测峰的托尾因子是否符合各品种项下的规定，

托尾因子计算公式为：T=W°®/2di,峰高法定量时，T应在0.95〜1.05之间；峰面积定量时，T过大也会

影响定量的准确度。

2.2.7测定结果处理

内标法：校正因子f=（A内/C内）/（A对/C对）

含量（C样）=f*A样/（A内/C内）

含量%=C对*（A样/A样内）/C样/（A对/A对内）*100%

外标法：含量%=（C对*A样）/（C样*A对）*100%

峰面积归一化法：含量%=A主峰/A总*100%

杂质检查法：

加校正因子的主成分自身对照法

不加校正因子的主成分自身对照法

2.2.8注意事项

色谱柱于进样器及出口端应为无死体积连接，以免试样扩散影响分离。

新柱或被污染的柱子用适当溶剂冲洗时，断开检测器，以免污染。

使用的流动相应与仪器系统的原保存溶剂能互容，否则用异丙醇过渡；

压力表无压力显示或压力波动时不能进行分析，应检查泵中气泡是否已排除，连接处有无渗漏，排除

故障后方能进行操作。

发现基线波动，出现毛刺等现象，可检查流通池内是否有气泡或污染，同时检查接地是否良好；

进样前，色谱柱应用流动相充分平衡：

使用色谱柱时，在规定的pH范围内选用流动相。

个色谱柱的使用应予以登记；

分析完毕后，应充分冲洗色谱系统。

3、高效液相色谱柱

色谱柱是色谱分析系统的核心部分，装有不同类型填料的色谱柱与相对应的流动相形成了不同的分离

机制，对绝大多数有机化合物进行分离分析。

根据内径不同可分为微径柱、分析柱、快速柱、半制备柱、制备柱。常用的普通分析柱，内径通常为

4.6mm,柱长15〜25cm,填料粒径5〜10um。色谱柱按照固定相化学组成可分为微粒硅胶、高分子微球、微

粒多孔碳、微粒氧化铝、微粒氧化错等。

3.1常见色谱柱填料类型：

3.1.1硅胶：

是最早普及使用的色谱柱填料，主要缺点：化学稳定性较差、热稳定性较差、残留硅羟基导致第二效

应。

改进技术：峰尾：对残留硅羟基进行峰尾；空间保护：采用具有较大空间位阻的异丙基或异丁基硅烷

化试剂衍生硅胶，在低pH条件下不被水解；杂化颗粒技术：用有机硅氧烷取代一部分硅羟基占据固定相颗

粒内部及表面的位置，拓宽pH范围；极性基团嵌入技术：将极性管能团嵌入到烷基键合相中，使固定相表

面形成一层亲水层，降低碱性化合物的保留；多相键合技术：将一层细密的丙烯桥双配位C18硅胶键合到

硅胶上，抑制硅胶在高pH下溶解。

3.1.2化学键合固定相：

非极性键合相：包括不同链长的烷基Cl、C2、C3、C4、C5、C6、C8、C18、C22等和苯基。其中C18最

为常用。

极性键合相：常用的有鼠基、二醇基和氨基键合相。鼠基键合相的分离特性与硅胶相似，但极性相对

较弱，优点是梯度洗脱或流动相组成改变时平衡快，对双键异构体或含不等量双键数目的环状化合物有很

好的分离能力；二醇基键合相对有机酸和某些高聚物有较好的分离，也可用于某些蛋白质的水系体系排阻

色谱；氨基键合相首先表现为强的氢键结合能力，其次在酸性介质中为弱阴离子交换作用。

离子交换键合相：指键合的有机硅烷分子中带有固定的阳离子或阴离子交换基团，可分为阳离子交换

剂和阴离子交换剂两类。

手性固定相：特指利用一定的作用机制，能选择性分离对映体的填料。

3.1.3高分子微球：

高分子微球基体主要有苯乙烯-二乙烯苯共聚物，也有聚乙烯醇、聚酯等类型。主要优点是pH范围宽，

化学惰性好，热稳定性好。

包裹聚合物：

是在无机载体的表面形成固载化的有机聚合物薄层，聚合物薄层表面还可以键合上C18、C8、NH2、CN

等，色谱过程中仅聚合物层于流动相和组分接触，兼顾了无机载体的刚性和有机聚合物的化学稳定性。分

离性能和使用范围类似硅胶柱。

3.1.4微粒多孔碳填料：

微粒多孔碳填料如石墨化碳的表面是完全非极性的均有表面，是一种天然的反相填料，化学稳定性和

热稳定性均很好，但机械强度较差，对强保留组分柱效较低。

3.2色谱柱的使用

3.2.1使用前注意事项：

色谱柱的储存液若无特殊说明，均为有机溶剂，反相柱常用甲醇、乙懵或者高比例的甲醇/乙月青-水溶

液，正相柱常用脱水处理后的纯正己烷。

使用前，一定要注意色谱柱的储存液与待分析样品的流动相之间是否互溶，若不互溶，必须先用异丙

醇置换掉；

反相色谱中，如果流动相中有缓冲盐，必须先用低浓度的甲醇/乙睛-水（10〜20%）冲洗，否则缓冲

盐在高浓度的有机相中很容易析出，从而使色谱柱堵塞。

3.2.2色谱柱的使用方向：

装色谱柱时应使流动相流路的方向与色谱柱标签上箭头所示方向一致。

3.2.3流动相：

配制时尽可能使用色谱纯的试剂，水最好用超纯水或重蒸水，流动相经0.45um或0.22um的滤膜过滤;

流动相的pH必须符合色谱柱的pH值使用范围。

3.2.4样品

样品溶液最好经0.45um或0.22um的滤膜过滤；若样品成分复杂，最好使用前置保护柱。正相色谱时,

样品和溶剂最好脱水。

3.3色谱柱的保养

3.3.1反相色谱柱用后的保存：如果使用缓冲液或缓冲盐作为流动相，每天试验结束后，应用10倍柱体积

的低浓度的甲醇/乙懵-水（10〜20%）冲洗，使色谱柱内的盐完全溶解洗脱出来，再用较高浓度的甲醇/乙

懵-水（50%）冲洗，最好用高浓度的甲醇/乙睛-水（80〜100%）冲洗，使色谱柱中的强吸附物质冲洗出

来。

3.3.2色谱柱的长期保存：反相柱，可以储存于甲醇或乙月青中，正相柱可储存于经脱水处理的正己烷中，离

子交换柱可以贮存于含5%甲醇或含0.05%叠氮钠中，并将色谱柱两端的堵头堵上。

3.4色谱柱的维修

色谱柱使用一段时间后，会发生柱压上升，柱效降低的现象。这主要是柱床上端或过滤片处积累了污

染物，可通过再生予以消除。

如果柱压突然增大，可将色谱柱出、入口端颠倒过来，用10〜20倍柱体积的流动相冲洗，如果柱压仍

然很高，可能是柱入口处的过滤片堵塞，需更换。

如果峰形变坏，表明柱入口柱床可能有塌陷，可用同型号的填料和流动相配成匀浆，将塌陷处填平。

3.5色谱柱的再生

正相柱按照极性增大的顺序：依次用20〜30倍柱体积的正己烷、二氯甲烷和异丙醇冲洗色谱柱，然后

按照反顺序冲洗，最后用干燥的正己烷平衡。

反相柱首先用蒸储水冲洗，再用20〜30倍柱体积的甲醇和二氯甲烷冲洗，然后按照反顺序冲洗，最后

用流动相平衡。

离子交换柱在低离子强度的缓冲液中长期使用会导致色谱柱失活，用稀酸缓冲液冲洗可使阳离子交换

柱再生，用稀碱缓冲液冲洗可使阴离子交换柱再生。

分析糖类的氨基柱可用0.02mol/L的磺酸溶液冲洗，然后用水平衡。

4、气相色谱法：

气相色谱法系采用气体为流动相（载气）流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或

其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用数据处理系统记录色谱信号。

4.1气相色谱仪的介绍

气相色谱仪由载气源、进样系统、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。

4.1.1载气源气相色谱仪的流动相