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文档简介
实验十五微生物间的拮抗作用一、实验背景及目的:自然环境中存在着大量的微生物。微生物与环境、微生物与其它生物以及微生物与微生物之间存在着各种各样的关系微生物间的关系如:共生、互生、寄生、拮抗等。微生物间的拮抗,一般是指:一种微生物的生命活动或其代谢产物,抑制或干扰另一种微生物的生命活动的现象。拮抗作用常存在专一性或特异性。版权所有未经作者同意请勿使用实验十五微生物间的拮抗作用本实验以产黄青霉(Penicillium
chrysogenum)为实验菌株,了解、考察其次生代谢产物——青霉素的抑菌谱,并加深对不同细菌细胞壁结构和组成差异及特性的理解。
版权所有未经作者同意请勿使用实验十五微生物间的拮抗作用二、基本原理:1.产黄青霉在相应的培养基中生长到一定时期,会通过复杂的代谢途径合成其次生代谢产物——青霉素。若产黄青霉在固体培养基平版上生长并产生、积累青霉素,就会在培养基平版中形成青霉素的浓度梯度。青霉素的存在,会抑制接种在该平版上的细菌的生长(拮抗)。版权所有未经作者同意请勿使用实验十五微生物间的拮抗作用2.青霉素是通过抑制细菌细胞壁的合成而抑制细菌的生长;具有不同细胞壁结构和组成的细菌对青霉素的敏感性不同;可表现不同的生长状态,形成长短不一的菌苔,从而可了解青霉素的抑菌谱。
版权所有未经作者同意请勿使用实验十五微生物间的拮抗作用三、实验材料:
1.实验菌种及培养基:产黄青霉(Penicillium
chrysogenum),金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus),G+细菌,大肠杆菌(Escherichiacoli),G-细菌,枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis),G+,产芽孢细菌;豆芽汁培养基,营养琼脂培养基;版权所有未经作者同意请勿使用实验十五微生物间的拮抗作用2.实验设备及器材:恒温培养箱;恒温干燥箱;高压蒸汽灭菌锅;培养皿;试管;洁净工作台等。版权所有未经作者同意请勿使用实验十五微生物间的拮抗作用四、实验步骤:1.
培养皿标记:标签贴在培养皿底部外侧的边缘处;2.
制备豆芽汁平板,以无菌操作技术,将已融化并适当冷却的培养基倒入培养皿的底部,每皿约15ml,轻摇匀,静置冷却,凝固后备用;版权所有未经作者同意请勿使用实验十五微生物间的拮抗作用3.
用无菌接种环取少量产黄青霉的孢子,在豆芽汁平板的一边轻划一条线,将产黄青霉接到平板上;4.
接种后的平板,倒置于28-30℃培养箱中培养3天;5.3天后,在已长好的产黄青霉菌苔的垂直方向,分开一定的间隔,分别接三种细菌,做好标记,平板倒置于37℃培养箱中培养24hr;6.24hr后,观察、分析、记录实验结果;版权所有未经作者同意请勿使用实验十五微生物间的拮抗作用五、实验结果及讨论:1.记录培养三天时,产黄青霉菌苔特征;2.记录培养四天时,各细菌菌苔生长情况;3.图示并分析实验结果;4.整理实验设备,清理实验台。讨论题:1.供试的三种细菌中,哪一种细菌对青霉素敏感,为什么?2.青霉素对处于休止状态的细菌有抑制作用吗?为什么?实验十五
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