吕梁市重点中学2025届高三第三次模拟考试生物试卷含解析

吕梁市重点中学2025届高三第三次模拟考试生物试卷请考生注意：1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列关于细胞器的描述正确的是（）A．内质网中的蛋白质运输到高尔基体，高尔基体中的蛋白质运输到细胞外或细胞内B．线粒体中的核糖体是由大亚基和小亚基组成，可通过认读密码子合成线粒体所需的全部蛋白质C．叶绿体中的色素和液泡中的色素都可能与叶的颜色有关D．中心体存在于部分植物细胞中，溶酶体存在于所有植物细胞中2．图示为真核细胞内蛋白质的合成过程，下列叙述正确的是（）A．②链为编码链，转录时RNA聚合酶与启动部位结合后沿整条DNA长链运行B．合成的RNA要在细胞溶胶中加工成熟后才能通过核孔C．④tRNA、⑥多肽、组成⑤的rRNA和蛋白质都是基因表达的产物D．翻译时有氢键的形成和断裂，③从左向右移动直至遇到终止密码子3．如果一个指导蛋白质合成的基因的中部增加了1个核苷酸对，不可能的后果是（）A．无法转录出mRNAB．编码的蛋白质的氨基酸数量可能减少C．所控制合成的蛋白质可能增加多个氨基酸D．翻译的蛋白质中，增加部位以后的氨基酸序列发生变化4．科学研究发现，雄激素不应症患者的Y染色体上决定睾丸发育的SRY基因正常，但位于X染色体上的控制雄激素受体合成的“AR基因”发生了突变。下列叙述错误的是()A．雄激素具有促进骨骼生长的作用B．雄激素不应症患者体内雄激素含量很低C．雄激素受体的合成需经转录和翻译的过程D．和正常的AR基因相比，发生突变的AR基因碱基排列顺序发生变化5．线粒体中的[H]与氧气结合的过程需要细胞色素c的参与。细胞接收凋亡信号后，线粒体中的细胞色素c可转移到细胞质基质中，并与Apaf-1蛋白结合引起细胞凋亡。下列说法错误的是（）A．无氧呼吸中消耗[H]的场所为细胞质基质B．在有活力的细胞中，细胞色素c主要定位在线粒体内膜上C．细胞色素c功能丧失的细胞将无法合成ATPD．若细胞中Apaf-1蛋白功能丧失，细胞色素c将不会引起该细胞凋亡6．叶色变异是由体细胞突变引起的芽变现象。红叶杨由绿叶杨芽变后选育形成，其叶绿体基粒类囊体减少，光合速率减小，液泡中花青素含量增加。下列叙述正确的是A．红叶杨染色体上的基因突变位点可用普通光学显微镜观察识别B．两种杨树叶绿体基粒类囊体的差异可用普通光学显微镜观察C．两种杨树叶光合速率可通过“探究光照强弱对光合作用强度的影响”实验作比较D．红叶杨细胞中花青素绝对含量可通过“植物细胞的吸水和失水”实验测定二、综合题：本大题共4小题7．（9分）甜菜碱存在于多种植物中，能减轻低温对光合作用的抑制，从而提高植物对低温环境的适应性。回答下列问题。（1）低温会破坏叶绿体的类囊体薄膜，导致光反应合成的___________减少，直接影响暗反应中___________的还原，从而对光合作用产生抑制作用。（2）研究发现野生型番茄不含甜菜碱，施加甜菜碱后，低温对其光合作用仍具抑制作用，但抑制程度较轻。设计实验验证以上结论。要求写出实验思路和预期结果___________。8．（10分）人体血糖调节的部分过程如下图所示。回答下列问题：（1）健康人在饭后血糖浓度升高，可直接刺激胰岛B细胞使胰岛素分泌增多，胰岛素通过____等作用效应，促使血糖浓度降低。胰岛素的作用效果反过来又会影响胰岛素的分泌，这种调节机制叫做____。（2）研究表明，在人体血管壁等处存在着感受血糖浓度变化的感受器，血糖调节的神经中枢在下丘脑。请用文字和箭头，补充完整血糖升高后机体通过神经调节和体液调节使血糖恢复正常的概念模型：血糖浓度升高→感受器兴奋→传入神经→____→血糖浓度恢复正常。（3）人体内产生了图中的抗体1或抗体2，血糖浓度都可能出现异常。若要通过前后对照实验诊断某患者的血糖浓度异常是由抗体1还是抗体2引起的，请简要写出实验思路、并预期结果及结论：____。9．（10分）人类遗传病调查中发现某家系具有甲遗传病（基因为A、a）、乙遗传病（基因为B、b）和丙遗传病（基因为D、d）患者，系谱图如下。己知甲病是伴性遗传病，I-1和I-2均不含丙病致病基因，在不考虑家系内发生新的基因突变的情况下，请回答下列问题：（1）甲病的遗传方式为_________，丙病所属的遗传病类型是_________。（2）若Ⅱ-7携带乙病致病基因，Ⅱ-6的基因型是_________，导致III-13患两种遗传病的变异发生的时期是_________。Ⅱ-6与Ⅱ-7的子女中，同时患两种病的概率是_________。（3）若Ⅱ-7无乙病致病基因，II-6的基因型是_________。导致Ⅲ-13患两种遗传病的变异发生的时期是_________。（4）如果III-18与d基因携带者结婚并生育一个表现型正常的儿子，则儿子携带d基因的概率为_________。10．（10分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。11．（15分）在冬季部分城市出现雾霾，这与秸秆野外焚烧有-定关系。微生物学家试图通过微生物降解技术使秸秆尽快腐烂，以增加上壤肥力并缓解环境污染。请回答下列有关问题：（6）微生物学家试图从富含纤维索的土壤中筛选出纤维素分解菌，应使用以纤维素为唯一碳源的培养基进行筛选，再采用___________进行鉴定，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，发酵方法有__________和______两种。（3）纤维素酶是一种复合酶，其中_________可以将纤维素分解成纤维二糖，继而在_________作用下分解成葡萄糖。（3）最终在培养基中筛选出了如下表所示的两种纤维素分解菌，其中降解纤维素能力较强的是____________________。菌种菌落直径：C（mm）透明圈直径：H（mm）H/C细菌Ⅰ6．63．33．3细菌Ⅱ4．65．06．6（4）若想将纤维素分解菌中的纤维素酶提取出来用于工业生产，需要先将其固定化，一般_______（适宜或不适宜）采用包埋法，原因是______________________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

内质网中的蛋白质运输到高尔基体或其他地方；线粒体中的核糖体只能合成线粒体所需的一部分蛋白质；液泡的色素和某些叶片的颜色有关；溶酶体存在于部分植物细胞中。【详解】A、内质网中的蛋白质运输到高尔基体或其他地方，A错误；B、线粒体中的核糖体只能合成线粒体所需的一部分蛋白质，B错误；C、叶绿体的色素与绿色叶片有关，液泡的色素和某些叶片的颜色有关，比如红色的叶片等，C正确；D、溶酶体存在于部分植物细胞中，D错误。故选C。2、C【解析】

基因表达是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程，基因表达产物通常是蛋白质。基因表达包括转录和翻译。转录过程由RNA聚合酶进行，以DNA的一条链为模板，按照碱基互补配对的原则，合成相对应的RNA分子。翻译过程是以信使RNA（mRNA）为模板，指导合成蛋白质的过程。每个mRNA携带由遗传密码编码的蛋白质合成信息即三联体。图中①为模板链，②为编码链，③为mRNA，④为tRNA，⑤为核糖体，⑥为多肽链。【详解】A、②链为编码链，转录时RNA聚合酶与启动部位结合后并不是沿整条DNA长链运行，A错误；B、合成的RNA要在细胞核中加工成熟后才能通过核孔，B错误；C、基因形成RNA产物以及mRNA被翻译为蛋白质的过程都称为基因表达，④tRNA、⑥多肽、组成⑤的rRNA和蛋白质都是基因表达的产物，C正确；D、翻译时有氢键的形成（mRNA的密码子和tRNA的反密码子的配对）和断裂（tRNA离开时），⑤沿着③从左向右移动直至遇到终止密码子，D错误。故选C。3、A【解析】

1、基因突变是基因中碱基对的增添、缺失或替换而引起的基因结构的改变。碱基对的替换会引起个别密码子改变，碱基对的缺失或增添可能会引起多个密码子改变。2、基因突变后转录形成的密码子会发生改变，进而以mRNA为模板进行的翻译过程中氨基酸序列、种类、数量可能会发生改变。【详解】A、一个基因的中部增加了1个核苷酸对，但其之前的基因仍可进行转录形成mRNA，A错误；B、一个基因的中部增加了1个核苷酸对，可能使转录出的mRNA上终止密码子前移，导致所控制合成的蛋白质的氨基酸数量减少，B正确；C、一个基因的中部增加了1个核苷酸对，可能使转录出的mRNA上终止密码子后移，导致所控制合成的蛋白质增加多个氨基酸，C正确；D、基因中部增加1个核苷酸对，使信使RNA上从增加部位开始向后的密码子都发生改变，从而使合成的蛋白质中，在增加部位以后的氨基酸序列发生变化，D正确。故选A。【点睛】本题考查基因突变的相关知识，要求考生识记基因突变的概念，能正确分析替换、缺失和增添造成的影响，再结合所学的知识准确判断各选项。4、B【解析】

根据题意分析可知：雄性激素属于脂质，雄性激素受体属于蛋白质．雄性激素只有被其受体识别后才能发挥作用．由于位于X染色体上的控制雄性激素受体合成的“AR基因”发生了突变，导致雄性激素受体合成受阻，从而使雄性激素不能发挥调节作用而患“雄性激素不应症”。【详解】A、雄性激素可以促进生长发育，促进骨骼生长，A正确；B、“雄性激素不应症”患者是由于控制雄性激素受体合成的基因发生了突变，导致体内雄性激素没有受体识别，而不是雄性激素含量很低，B错误；C、雄性激素受体属于蛋白质，其合成需经转录和翻译的过程，C正确；D、基因突变是基因结构的改变，包括碱基对的增添、缺失或替换，所以和正常的“AR基因”相比，发生突变的“AR基因”碱基排列顺序发生变化，D正确。故选：B。5、C【解析】

1、细胞是生物体结构与功能的基本单位。

2、细胞凋亡：由基因所决定的细胞自动结束生命的过程。又称细胞编程性死亡，属正常死亡。

3、蛋白质的功能-生命活动的主要承担者：

①构成细胞和生物体的重要物质，即结构蛋白，如羽毛、头发、蛛丝、肌动蛋白；

②催化作用：如绝大多数酶；

③传递信息，即调节作用：如胰岛素、生长激素；

④免疫作用：如免疫球蛋白（抗体）；

⑤运输作用：如红细胞中的血红蛋白。【详解】A、无氧呼吸第一阶段可产生[H]，场所为细胞质基质，A正确；

B、细胞色素c参与[H]与氧气的结合过程，该过程属于有氧呼吸第三阶段在线粒体内膜上完成，故在有活力的细胞中，细胞色素c主要定位在线粒体内膜上，B正确；

C、细胞色素c功能丧失影响有氧呼吸第三阶段，但有氧呼吸前两阶段也产生ATP，C错误；

D、由题意可知，细胞色素c可以与Apaf-1蛋白结合引起细胞凋亡，若Apaf-1蛋白功能丧失，其不能与细胞色素c结合，则无法引起细胞凋亡，D正确。

故选C。【点睛】本题以细胞色素c为素材，考察了细胞呼吸、细胞凋亡以及ATP合成的相关知识，本题难度不大，重点考察学生获取信息、分析问题的能力。

素养考查落实：细胞生命活动中物质、能量和信息变化的统一，细胞结构与功能的统一，生物体部分与整体的统一等生命观念。6、C【解析】

1、光学显微镜下能观察到的结构有：细胞壁、叶绿体、大液泡和经染色的细胞核和线粒体；基因突变和基因重组不能在光学显微镜下观察到，但染色体变异（染色体结构变异和染色体数目变异）可以在光学显微镜下观察到。2、影响光合作用强度的外界因素：空气中二氧化碳的浓度，土壤中水分的多少，光照的长短与强弱、光的成分以及温度的高低等，都是影响光合作用强度的外界因素。光合作用强度可以通过测定一定时间内原料消耗量或产物生成的数量来定量地表示。3、植物细胞的吸水和失水实验的观察指标：中央液泡大小、原生质层的位置和细胞大小。【详解】据分析可知，基因突变不可以用普通光学显微镜观察识别，因为基因是有遗传效应的DNA片段，DNA在普通光学显微镜下观察不到，A错误；叶绿体基粒类囊体由生物膜构成，不可用普通光学显微镜观察，B错误；由题干信息可知，要使红叶杨和绿叶杨的光合作用强度相等，红叶杨需要更强的光照，原因是红叶杨比绿叶杨的叶绿体基粒类囊体少，光合速率小，因此，两种杨树叶光合速率可通过“探究光照强弱对光合作用强度的影响”实验作比较，C正确；红叶杨细胞中花青素的相对含量可通过“植物细胞的吸水和失水”实验测定，若要测定花青素的绝对含量需要进一步实验，D错误；因此，本题答案选C。【点睛】解答本题的关键是：明确光学显微镜下能观察到的细胞结构和可遗传变异类型，影响光合作用强度的外界因素，植物细胞吸水和失水实验的应用，再根据题意作答。二、综合题：本大题共4小题7、[H]和ATPC3实验思路：将野生型番茄分为甲、乙两组，甲组先后在常温和低温条件下测定光合速率，分别记录为v1、v2，乙组施加甜菜碱后在低温条件下测定光合速率，记录为V3预期结果：v1>V3>V2【解析】

1.光合作用的具体的过程：

①光反应阶段：场所是类囊体薄膜

a．水的光解：2H2O4[H]+O2b．ATP的生成：ADP+PiATP

②暗反应阶段：场所是叶绿体基质

a．CO2的固定：CO2+C52C3b．三碳化合物的还原：2C3（CH2O）+C5+H2O【详解】（1）叶绿体的类囊体薄膜是光合作用光反应的场所，光合作用的色素就分布其上，低温会破坏叶绿体的类囊体薄膜，导致光反应合成的[H]和ATP减少，进而直接影响暗反应中C3的还原，从而对光合作用产生抑制作用。（2）实验设计要遵循单一变量和对照原则，实验的目的是为了验证甜菜碱能缓解低温对光合作用的抑制作用，因此单一的变量就是是否使用甜菜碱与温度的高低。故主要的实验思路如下：将长势相同的野生型番茄随机均分为甲、乙两组，甲组先后在常温和低温条件下测定光合速率，分别记录为v1、v2。乙组施加甜菜碱后在低温条件下测定光合速率。记录为V3，预期实验结果为v1>V3>V2。【点睛】熟知光合作用的过程是解答本题的关键，光合作用影响因素的相关实验设计也是本题的考查重点。关注实验设计的原则是解答本题的另一关键！8、加速组织细胞摄取、利用和储存葡萄糖反馈调节下丘脑血糖平衡调节中枢→传出神经→胰岛B细胞分泌胰岛素→肝细胞、肌细胞等靶细胞先检测该患者餐后血糖浓度作为对照，然后给其注射一定量的胰岛素，一段时间后检测血糖浓度（多日测量求平均值），并与注射前的血糖浓度进行比较。若血糖浓度能降低，则是抗体1引起的；若血糖浓度不降低，则是抗体2引起的【解析】

血糖是指血液中葡萄糖的含量，正常人在清晨空腹血糖浓度为80－120mg/100mL。维持血糖浓度的正常水平，需要神经系统和内分泌系统的协同作用。在内分泌系统中，胰岛素是现在已知的，唯一能降低血糖浓度的激素，能提高血糖浓度的激素则有胰高血糖素、肾上腺髓质激素等几种激素。在一般情况下，主要由于胰岛素和胰高血糖素等两类激素的作用，维持正常的血糖浓度水平。胰岛素降低血糖的作用，可归结为胰岛素促进肝细胞、肌肉细胞、脂肪细胞摄取、贮存和利用葡萄糖，胰岛素还抑制氨基酸转化成葡萄糖；胰高血糖素，它可促进肝糖原的分解，使血糖升高，还可使促进脂肪分解。胰腺中的胰岛是内分泌腺的一种，胰岛α细胞分泌胰高血糖素，胰岛β细胞分泌胰岛素。【详解】（1）胰岛素降低血糖的作用，可归结为胰岛素促进肝细胞、肌肉细胞、脂肪细胞摄取、贮存和利用葡萄糖，胰岛素还抑制氨基酸转化成葡萄糖。胰岛素的作用效果使血糖下降，反过来又会减弱胰岛素的分泌，这种调节机制叫做反馈调节。（2）神经调节的基本形式是反射，反射的结构基础是反射弧。激素调节属于体液调节，是内分泌系统分泌激素，通过体液的传送而发挥调节作用的一种调节方式。因此，完成血糖升高后机体通过神经调节和体液调节使血糖恢复正常的概念模型为：血糖浓度升高→感受器兴奋→传入神经→下丘脑血糖平衡调节中枢→传出神经→胰岛B细胞分泌胰岛素→肝细胞、肌细胞等靶细胞→血糖浓度恢复正常。（3）抗体1与葡萄糖结合，抗体2与胰岛素结合，抗体2的存在使得胰岛素无法正常发挥作用，使得血糖升高。人体内产生了图中的抗体1或抗体2，血糖浓度都可能出现异常。因此，先检测该患者餐后血糖浓度作为对照，然后给其注射一定量的胰岛素，一段时间后检测血糖浓度（多日测量求平均值），并与注射前的血糖浓度进行比较。若血糖浓度能降低，则是抗体1引起的；若血糖浓度不降低，则是抗体2引起的。【点睛】本题以神经调节和体液调节结合来考查血糖调节，要求学生有一定的识图能力，且能设计实验验证某一假设。9、伴X染色体显性遗传单基因遗传病DDBbXAXa减数第一次分裂后期1/8DDXABXab减数第一次分裂前期3/5【解析】

甲病是伴性遗传病，如果是X染色体隐性病，则Ⅱ-6患病，儿子都要患病，但Ⅲ12没有患病，所以该病是X显性遗传病，Ⅱ-6和Ⅱ-7都不患乙病和丙病，但Ⅲ-12患乙病，所以该病是隐性遗传病，Ⅱ-10和Ⅱ-11生下了患丙病的Ⅲ-17的女儿，所以该病是常染色体隐性遗传病。【详解】（1）根据分析，甲病的遗传方式，伴X染色体显性遗传，丙病是常染色体隐性遗传病，属于单基因遗传病。（2）乙病是隐性遗传病，若Ⅱ-7携带乙病致病基因，则乙病是常染色体隐性遗传病；从甲病分析，Ⅱ-6是患者，同时其母亲和女儿都正常，所以其基因型是XAXa，从乙病分析该人和Ⅱ-7生下了III-12患乙病的孩子，所以其基因型是Bb，而其父母都不携带丙病的致病基因，所以其基因型是DD，综上所述，其基因型是DDBbXAXa；Ⅱ-7其甲病的基因型XaY，乙病Bb，所以III-13患两种遗传病（bbXAY），是由于其父母上甲病和乙病的基因发生了自由组合，产生了bXA和bY的配子，发生在减数第一次分裂后期。Ⅱ-6和Ⅱ-7婚配，不可能患丙病，所以二者甲病和乙病的基因型分别是BbXAXa和BbXaY，二者生下患两病的孩子的可能性bbXA_的概率为1/4×1/2=1/8。（3）若Ⅱ-7无乙病致病基因，则乙病是X染色体隐性遗传病，从甲病分析，Ⅱ-6是患者，同时其母亲和女儿都正常，所以其基因型是XAXa，从乙病分析该人和Ⅱ-7生下了III-12患乙病的孩子，本人不患病，所以其基因型是XBXb，由于其父亲患甲病但不患乙病（XABY），因此Ⅱ-6的基因型是XABXab，结合丙病，其基因型是DDXABXab；III-13患两种遗传病，其基因型是XAbY，所以发病的原因是其母亲在减数分裂产生配子是X染色体发生交叉互换，产生了XAb的配子，发生在减数第一次分裂前期。（4）III-18的姐妹III-17是丙病的患者，其基因型是dd，所以其父母基因型是Dd和Dd，III-18表现正常，其基因型是1/3DD和2/3Dd，当其和Dd（d基因携带者）结婚，III-18可以产生2种配子D∶d=2∶1，d基因携带者产生两种配子，D∶d=1∶1所以该正常孩子的基因型有2/5DD，3/5Dd，所以儿子携带d基因的概率3/5。【点睛】本题结合遗传系谱图考查遗传学的定律，考上需要掌握在遗传系谱图中各种病的遗传方式，结合遗传学定律计算其概率。10、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根据实验中的对照原则，若要比较新蛋白A的表达效率是否提高，则需设置三组实验实验变量的处理分别为：仅含新