可见分光光度计的原理如何 光度计工作原理

第第页可见分光光度计的原理如何光度计工作原理可见分光光度计广泛应用于医药卫生、临床检测、生物化学、石油化工、环保监测、食品生产和质量掌控等部门作定性、定量分析，还可作为大、专院校和中学相关课程的教学演示和试验仪器。

分光光度计是目前化验室中使用比较广泛的一种分析仪器，其测定原理是利用物质对光的选择性吸取特性，以较纯的单色光作为入射光，测定物质对光的吸取，从而确定溶液中物质的含量。

其特点是灵敏度高；精准度高；测量范围广；在确定条件下，可同时测定水样中两种或两种以上的物质组分含量等。

分光光度计按其波长范围可分为可见分光光度计（工作范围360～800nm）、紫外—可见分光光度计（工作范围200～1000nm）和红外分光光度计（工作范围760～400000nm）等。

可见分光光度计的原理是：

当一束单色光照射待测物质的溶液时，当某确定频率（或波长）的可见光所具有的能量（hf）恰好与待测物质分子中的价电子的能级差相适应（即ΔE=E2—E1=hf）时，待测物将对该频率（波长）的可见光产生选择性的吸取。

用可见分光光度计可以测量和记录其吸取程度（吸光度）。

由于在确定条件下，吸光度A与待测物质的浓度C及吸取地长度l的乘积成正比，即A=KCL，所以，在测得吸光度A后，可接受标准曲线法、比较法以及标准加入法等方法进行定量分析。

可见分光光度计是一种结构简洁、使用便利的单光束分光光度计，基于样品对单色光的选择吸取特性可用于对样品进行定性和定量分析。

其定量分析依据相对测量原理工作，即选定样品的溶剂（或空气）作为标准试样，设定其透射比为100%，被测样品的透射比则相对于标准试样（或空气）而得到；

在确定的浓度范围，各参量遵奉并服从朗伯—比耳定律：A=lg1/T=KCL

T=I/I0

A:吸光度

T:相对于标准试样的透射比

I:光透过被测样品后照射到光电传感器上的强度I0:光透过标准试样后照射到光电传感器上的强度

K:样品溶液的比消光系数

L:样品溶液在光路中的长度

C:样品浓度紫外可见光光度计的测试我们该如何使用紫外可见光光度计进行杂光散光测试呢？下面跟我一起来了解一下吧。

据了解，有的紫外可见光光度计只测试220nm处的杂散光，不测试340nm处的杂散光，这样是不正确的，需测试220nm处杂散光是由于：

①依据仪器学理论中的电光源理论，氘灯在220nm处能量很小，即信号很小，简单显现杂散光；

②依据仪器学理论中的光电发射理论，光电倍增管在220nm处的光谱响应（灵敏度）低，简单显现杂散光。

③依据量子光学理论，波长是能量的倒数，波长短能量大，简单产生杂散光，而220nm处属于短波部分；

而测试340nm处杂散光的原因是完全不同的，由于340nm处一般是氘灯换钨灯和仪器调换滤光片的地方，此时最简单产生杂散光。所以，对于紫外可见光光度计来讲，应当测试220nm和340nm两处的杂散光。

紫外可见光光度计杂散光测试步骤：

1、首先将参比液注入配对石英石吸取池，分别放置在参比池座和试样池座内。再测定波段扫描基线并使之平滑。

2、将减光片插入试样光路的滤光片槽内，其读数即为减光片的衰减值K，然后将减光片插入参比光路的滤光片座内，

3、将石英吸取池中的蒸馏水依次换成上述截止滤光液，插入试样试样池座中，在相应的波段内扫描、打印；在记录纸的作标上量取测定波优点的透光度，乘以衰减值K，即得各测定波优点的杂散光值。

紫外可见光光度计仪器设计的理论依据是比耳定律。讨论的是物质对光的吸取。比耳定律的真正物理意义可以描述为：当一束平行的单色