医学微生物学-247

MedicalMicrobiology医学微生物学病原生物学医学微生物学各论第二篇病毒学各论第24章人类疱疹病毒病毒亚科潜伏细胞单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)α神经元细胞单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)α神经元细胞水痘－带状疱疹病毒(VSV)α神经元细胞EB病毒(EBV)γB淋巴细胞巨细胞病毒(CMV)β单核吞噬细胞，淋巴细胞人疱疹病毒6，7型β淋巴组织人疱疹病毒8型γ病毒种类HHV-1HHV-2HHV-3HHV-4HHV-5HHV-6HHV-7HHV-8共同特点

1.形态、结构：球形，有包膜，dsDNA病毒，直径120-200nm，162个壳粒组成，20面体立体对称；2.复制：除EBV及HHV－6和HHV－7外，均可在2倍体细胞增殖；产生明显CPE；核内有嗜酸性包涵体；病毒可通过细胞间桥直接扩散；感染C、未感染C融合成多核巨C。3.多种感染方式：

显性感染、潜伏感染、整合感染和先天性感染第一节单纯疱疹病毒Herpessimplexvirus典型的疱疹病毒科病毒的形态学特征球形，120-150nm，双链线状DNA，衣壳是20面立体对称分型：2个血清型：HSV-1、HSV-2包膜：多种糖蛋白：至少11种：

gB，gD—

吸附有关；

gD—

诱导中和Ab作用最强；

gG—HSV-2型特异；

gC—HSV-1型特异；培养：易感动物：家兔、豚鼠、小鼠、鸡胚；易感细胞：兔肾、人胚肺、人胚肾、人羊膜细胞一、生物学性状

二、致病性与免疫性1、传染源：患者、健康带毒者2、传播途径：

HSV-1：密切接触、呼吸道、胎盘

HSV-2：性接触、产道、皮肤、口腔、呼吸道、破损皮肤

3、感染方式：机体绝大多数：隐性感染；少数：皮肤粘膜局部疱疹；极少数：全身性感染，死亡；

4、感染类型：HSV1：疱疹性龈口炎、湿疹、甲沟炎、角膜结膜炎、脑炎潜伏：三叉神经节、颈上神经节

HSV2：生殖器疱疹潜伏：骶神经节潜伏（1）原发感染：多见隐性感染

（2）潜伏感染和复发:

HSV-1,2→神经节→病毒激活→神经纤维 ↓复发性局部疱疹←皮肤粘膜 ↓

HSV-1：最多见口唇部疱疹

HSV-2：最多见生殖器疱疹（3）先天性感染：

HSV-1：胎盘→胎儿流产，早产，死胎，先天畸形

HSV-2：产道感染→新生儿疱疹HSV-2感染与子宫颈癌的发生有密切关系。其根据是：

①患过生殖器疱疹的妇女，宫颈癌的发病率高；

②宫颈癌患者抗HSV-2抗体阳性率高，效价也高；

③用免疫荧光检查子宫颈癌脱落细胞涂片可在细胞中查到

HSV-2抗原；

④HSV-2作用于地鼠胚成纤维细胞培养可引起细胞转化，将转化细胞注射地鼠可诱生肿瘤；

⑤宫颈疱疹与宫颈癌好发部位相似，都在鳞状上皮和柱状上皮交界处；

⑥分子杂交试验证明宫颈癌细胞中有HSV-2的基因片断并有特异性mRNA存在。

（4）HSV-2与子宫颈癌的关系

（5）免疫性原发感染后1周左右血中可出现中和抗体3-4周达高峰，可持续多年细胞免疫起更重要作用

病毒的分离与鉴定

三、微生物学检查

分离HSV较易成功。采取水疱液、唾液、角膜试子或刮取物、阴道棉拭子等接种于兔肾、人胚肾等易感细胞进行培养。一般2－3d即出现CPE，特点是细胞肿胀、变圆、相互融合等，据此可初步判定。单克隆抗体间接免疫荧光染色法以及DNA酶切分析等方法进行鉴定或分析。微生物学检查用电镜直接检查水疱液中的病毒颗粒;用免疫荧光技术、免疫酶染色等观察细胞内特异性抗原。在标本接种细胞后，在出现细胞病变之前，做免疫荧光或免疫酶染色进行快速诊断;用核酸杂交或PCR方法检测标本中HSV病毒核酸进行诊断。

快速诊断血清学诊断：

可用于HSV血清学诊断的试验有IFA及ELISA等。IgG抗体在体内持续时间长，不宜作为临床诊断，而主要用于血清流行病学调查，以了解HSV在人群中的感染率。IFA的优点在于可测出IgM、IgG或IgA型抗体。

ELISA测HSV抗体敏感性可达95%。微生物学检查尚无特殊方法。因HSV与癌症的发生可能有关，故一般不主张使用活疫苗或含有疱疹病毒DNA的疫苗。用gD制备亚单位疫苗正在研究中。如孕妇围产期产道有HSV-2感染，可进行剖腹产或对新生儿注射丙种球蛋白做应急预防。

四、防治原则（一）预防用5-碘脱氧尿嘧啶核苷(疱疹净)、阿糖胞苷(Ara-A)等治疗疱疹性角结膜炎有一定疗效。此外，近年发现无环鸟苷(acyclovir,ACV)

及其衍生物脱氧鸟苷(VACV)可选择地抑制HSV的复制，能缩短病程、减轻病状，且毒性较低，临床已用于治疗口唇疱疹、疱疹性脑炎、生殖器疱疹等。但不能防止潜伏感染再发。单独使用IFN对树枝状疱疹性角膜炎也有治疗效果，如与上述药物合用则效果更为显著。防治原则（二）治疗第二节水痘带状疱疹病毒

Varicella-zostvirusVZV概述人是VZV的唯一自然宿主。皮肤是病毒的主要靶细胞。可由同一种病毒引起两种不同的病症。儿童初次感染引起水痘。潜伏体内的病毒受到某些刺激后复发引起带状疱疹，多见于成年人和老年人。一、生物学性状似HSV只一个血清型对一般实验动物不敏感，在人胚成纤维细胞中增殖，并缓慢产生细胞病变

二、致病性传染源：患者（唯一天然宿主）患者急性期水疱内容物及上呼吸道分泌物带状疱疹水疱内容物传播途径：呼吸道传播接触传播（一）原发感染：水痘(ChickenPox)病毒经呼吸道、结膜、皮肤等处侵入人体先在局部淋巴结增殖进入血液散布到各个内脏继续大量增殖2～3周潜伏期，再次入血皮肤广泛发生丘疹，水疱疹和脓疱疹

儿童：斑丘疹,水疱疹,脓疱疹，偶见并发症

孕妇：较严重重,可致胎儿畸形,流产,死产免疫低下患者：重症水痘（二）潜伏感染和再发感染：带状疱疹

儿童时期患过水痘愈合病毒潜伏在脊髓后根神经节或脑感染神经节中机体免疫力下降等条件刺激病毒沿感觉神经轴索下行该神经所支配的皮肤细胞内增殖在皮肤上沿着感觉神经的通路发生串联的水疱疹，形似带状免疫力低下的成人和老人多见

zoster三、微生物检查及防治水痘一带状疱疹的临床症状典型，一般不需作微生物学诊断。VZV减毒活疫苗预防水痘感染和传播有良好效果。治疗可用无环鸟苷、阿糖腺苷和高剂量干扰素。第三节巨细胞病毒（Cytomegalovirus，CMV）概述感染的细胞肿大，并具有巨大的核内包涵体，故名。CMV具有典型的疱疹病毒形态，其DNA结构也与HSV相似。一、生物学性状：

有三种颗粒：典型颗粒、致密颗粒、包膜颗粒具备典型的疱疹病毒的形态结构直径180-250nm，有包膜线状双股DNA种属特异性高：只感染人复制周期长，增殖缓慢

CPE：细胞肿胀，核变大，形成巨细胞，核内/胞浆内嗜酸性包涵体，“猫头鹰眼”状包涵体。

嗜酸性包涵体“猫头鹰眼”状包涵体二、致病性与免疫性传染源：患者无症状的隐形感染者传播途径：密切接触：日常接触、性接触、早期哺乳等输血器官转移等感染类型原发感染：2岁以下常隐性感染（成人60-90%有抗体）潜伏感染：唾液腺、乳腺、肾脏、白细胞及其它腺体，与其它疱疹病毒不同之处——始终排毒（以上分泌物中）感染类型先天性感染：胎盘→先天感染→先天畸形重者流产，死产

围产期感染：产道→新生儿感染，哺乳免疫功能低下者感染：再发感染→严重感染（致死性疾病）间质肺炎、视网膜炎、食管炎、结肠炎、脑膜脑炎等输血感染：输血后单核细胞增多症，肝炎接触感染：接吻、性接触、哺乳与肿瘤关系：宫颈癌前列腺癌结肠癌Kaposi肉瘤三、微生物学检查细胞学检查：多核巨细胞典型的包涵体病毒分离：接种到人胚肺成纤维细胞查核酸：PCR、杂交血清学ELISA查IgM抗体，宫内感染四、治疗与预防治疗：丙氧鸟苷（ganciclovirGCV）有防止CMV扩散作用耐丙氧鸟苷的CMV感染可选用磷甲酸，但效果比前者差预防：CMV病毒活疫苗致癌潜能的问题有待解决CMV包膜糖蛋白的亚单位疫苗是研究的方向第四节EB病毒

（Epstein-Barrvirus，EBV

）概述Epstein和Barr于1964年首次成功地将Burkitt非洲儿童淋巴瘤细胞时发现，故名。为一种嗜B淋巴细胞的疱疹病毒，结构与其它疱疹病毒相似。不能用常规方法培养。主要侵犯B细胞。一、生物学性状形态结构与其他疱疹病毒相似。病毒直径150-180nm。核心为双链线状DNA，长约173kb。衣壳由162个壳粒排列成二十面体构成。有包膜。EBV特异性抗原

1、潜伏感染：EBV核抗原（EBNA）：有6种，感染和转化的B细胞核内均可检出潜伏感染膜蛋白（LMP）：潜伏感染B细胞的表面抗原

LMP1LMP22、增殖性感染：

早期抗原（EA）：非结构蛋白，具DNA多聚酶活性衣壳抗原（VCA）：与病毒DNA组成EBV的核衣壳膜抗原（MA）：EBV的中和抗原（gp320）二、致病性与免疫性EB病毒在人群中广泛感染。我国3～5岁儿童感染率达90%以上。主要通过唾液传播，也可经输血传染。EB病毒在口咽部上皮细胞内增殖，然后感染B淋巴细胞。感染B细胞进入血循环可造成全身性感染。病毒可长期潜伏。

传染源：患者、隐性感染者传播途径：唾液传播，偶尔输血感染感染类型：增殖性感染：

初次感染：幼儿隐性感染多见。青春期原发性感染：50%引起传染性单核C增多症

非增殖性感染：潜伏感染→引起细胞转化→恶性转化1、传染性单核细胞增多症一种急性淋巴组织增生性疾病，多见于青春期初次感染EBV后发病。三个典型症状为发热、咽炎和颈淋巴结肿大。随病情发展可出现肝脾肿大、肝功能异常，外周血单核细胞增多，并出现异型淋巴细胞（可杀伤表面有EBV抗原表达的B细胞）

所致疾病2、非洲儿童淋巴瘤（即Burkitt淋巴瘤）于中非、新几内亚和美洲温热带地区呈地方性流行。多见于5～12岁儿童。好发部位为颜面、腭部。所有BL病人血清均含EBV抗体，其中80%以上滴度高于正常人。在肿瘤组织中发现EBV基因组。3、鼻咽癌我国南方（广东、广西）及东南亚是鼻咽癌高发区。多发生于40岁以上中老年人。EBV与鼻咽癌

在所有病例的癌组织中有EBV基因组存在和表达。病人血清中有高效价EBV抗原（主要VCA和EA）的lgG和lgA抗体病情好转后，这些抗体的滴度也随之下降。三、微生物学检查EBV分离培养困难可用核酸杂交和PCR等方法检测细胞内EBV基因组及其表达产物血清学诊断

EBV特异性抗体的检测检测病毒VCA－IgA或EA－IgA抗体，滴度≥1：5～1：10有