2024 年甘肃省职业院校技能大赛高职教师组医药卫生类检验检疫技术赛项竞赛规程

2024年甘肃省职业院校技能大赛高职教师组

医药卫生类检验检疫技术赛项竞赛规程

一、赛项名称

赛项名称：检验检疫技术(InspectionandQuarantineTechnology)

赛项组别：高职教师组

专业大类：医药卫生类

项目类别：个人赛

二、竞赛目的

贯彻落实《关于2024年甘肃省职业院校技能大赛赛项承办单位和

有关事项的通知》要求,以技能大赛为抓手，深化职业教育教学改革，

着力弘扬工匠精神，检验参赛人员专业技能水平。通过技能竞赛，评

价医学检验技术专业教师操作技能和综合素养，打造行企院校相互交

流学习的平台，加强专业师资队伍建设，推进医学检验技术专业的教

育教学改革，为产教融合提供更多思路和方案，实现医学检验技术专

业高素质技能型人才的培养。

三、竞赛时间、地点

竞赛时间：2024年1月上中旬

竞赛地点：甘肃卫生职业学院（兰州新区职教园区九龙江街1666

号）

四、竞赛内容

结合我省高职医学检验技术专业教学实际，综合专业核心课程的

基本技能与知识，检验检疫技术赛项旨在考查参赛教师的专业技能、

专业知识及职业综合素养。竞赛设置3个分赛项，每个分赛项包括理

论考核和技能操作考核2项内容。每名参赛选手选报1个分赛项，完

成该分赛项的理论考核和技能操作考核。

（一）技能操作考核

针对检验临床岗位设置3个分赛项：临床基本检验（A）、微生物

学检验（B）、生物化学及免疫学检验（C）。

1.临床基本检验包括血液常规检验（30分）、手工白细胞计数

（40分）、血涂片制备及观察（30分）3项内容，总分100分，比赛

操作总时长30分钟，设1个工位。

2.微生物学检验包括细菌分区划线操作（30分）、细菌分离结

果（20分）、细菌革兰染色（50分）3项内容，总分100分，比赛操

作总时长22分钟，设1个工位。

3.生物化学及免疫学检验包括血清总蛋白测定（50分）乙肝病

毒表面抗体检测（ELISA）（50分）2项内容，总分100分，比赛操作

总时长55分钟，设2个工位。

技能操作试卷、答题纸见附件1。

（二）理论考核

分赛项的理论考核内容与技能操作考核内容相对应。理论考核包

括临床检验理论考核、微生物学检验理论考核、生物化学及免疫学检

验理论考核3项内容，每项内容提供3套样题。分赛项的理论考题由

公开的样题抽题（85%）和裁判专家现场命题（15%）组成，共100题

单项选择题，每题1分，满分100分。生物化学及免疫学检验理论考

核，生物化学检验和免疫学检验各占50题。理论考核范围对接临床医

学检验技术师资格考试，参考临床医学检验技术师资格考试大纲。理

论考试在机房的考试系统进行，计算机阅卷、评分，考试时长45分钟。

五、竞赛方式

（一）参赛对象

须为高等职业院校医学检验技术专业在职教师。未尽事宜以2024

年甘肃省职业院校技能大赛竞赛规程总则为准。

（二）组队要求

1.本赛项为个人赛，每名参赛教师限报1个分赛项，同一院校每

个分赛项的参赛选手不得超过3名。

2.参赛选手报名获得确认后不得随意更换。如备赛过程中参赛选

手因故无法参赛，须由院校行政部门于相应赛项开赛10个工作日之前

出具书面说明，经大赛执委会办公室核实后予以更换。

3.未尽事宜以2024年甘肃省职业院校技能大赛竞赛规程总则为准。

（三）比赛抽签

1.抽取选手号由赛项组委会按照竞赛流程召开领队会议，按照

各院校报名顺序，由选手抽取“选手号”，签字确认抽签信息。“选

手号”唯一，是比赛检录的重要信息凭证，根据实际报名人数，按照

J1、J2、J3……JXX顺序编号。

2.抽取选手技能操作场次号和工位号选手比赛前30分钟到达

指定地点检录，比赛前20分钟，在分赛项候赛室由选手抽取各技能操

作分赛项的“场次号”；生物化学及免疫学检验分赛项还需抽取“工

位号”。接到比赛通知后，志愿者带领选手顺序进入相应的比赛试室

完成操作比赛。

3.理论考核的考场及座位号选手理论考核由组委会统一分配考

场及座位号，并于赛前公示。

（四）竞赛流程

1.理论考核

图1理论考核流程图

2.技能操作考核

图2技能操作考核流程图

（五）赛项规则

1.参赛选手须按比赛安排时间及时到比赛场地熟悉场地及有关比

赛事项。

2.大赛期间，参赛院校须为每位参赛选手办理意外伤害保险，未

办理保险者，不得参加比赛。

3.参赛选手必须携带比赛规定的有效证件（参赛证、有效身份证、

教师资格证、工作证明）参加比赛。

4.选手理论考核着便装，技能操作考核着大赛统一提供的服装（赛

后须交回），选手不得在参赛服饰上作任何标识，不得携带任何通讯

工具进入赛场，违规者取消本次比赛成绩。

5.选手需提前30分钟到达指定地点检录，选手凭参赛号由工作人

员组织引导选手到指定的侯赛室抽签、侯赛，比赛结束在休息室等待

离场指令。

6.参赛选手不得向评委报告或者暗示自己的姓名、学校等相关信

息，否则按违纪处理。

7.竞赛过程中，选手须严格遵守操作流程和规则，并自觉接受裁

判的监督和警示。若因突发故障原因导致竞赛中断，应提请裁判确认

其原因,并视具体情况做出裁决。

8.选手竞赛开始、终止时间由赛室裁判记录在案；比赛时间到，

由裁判示意选手终止操作。选手提前结束竞赛后不得再进行任何操作。

选手在竞赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判同意

后作特殊处理。

六、竞赛环境

（一）理论考核区

设置机房试室，安装考试系统。试室、机位数、备用机位数根据

实际报名选手人数确定。

（二）技能操作考核区

在承办院校医学检验技术专业实验室进行比赛，每个分赛项设置

赛室1间；临床基本检验、微生物学检验赛室设置1个比赛工位，1

个备用工位；生物化学及免疫学检验赛室设置2个比赛工位，1个备用

工位；每个比赛工位配备2名裁判。比赛全程监控摄像。另外设置分

赛项的候赛室、赛前等候区、休息室。

（三）赛场周边

设有卫生间、医疗等公共服务区和紧急疏散通道，并在赛场周围

设置隔离带。

七、技术规范

（一）行业、职业技术标准

临床血液与体液检验基本技术标准（WS/T806—2022）、《血液分

析仪》（YY/T0653-2017）、《血细胞分析参考区间》WS/T405-2012、

《红细胞和白细胞计数参考方法》WS/T245-2005、《临床微生物检验

基本技术标准》（WS/T805—2022）、《临床化学检验基本技术标准》

（WS/T804—2022）、《白蛋白测定试剂盒》（YY/T1444-2016）、《临

床常用生化检验项目参考区间第2部分：血清总蛋白、白蛋白》

（WS/T404.2-2012）、《乙型病毒性肝炎诊断标准》（WS299-2008）。

（二）职业资格标准

1.中国合格评定国家认可委员会.《CNAS-CL02：医学实验室质量

和能力认可准则》。

2.尚红、王毓三、申子瑜.《全国临床检验操作规程（第4版）》.

人民卫生出版社，2015年3月。

八、技术平台

比赛环境及软硬件设备对接《2023年全国职业院校技能大赛高职

组检验检疫技术赛项》要求，赛项所使用的仪器、设备、耗材等，均

为国赛指定品牌、型号，或为全国高等职业院校医学检验技术专业实

验通用器材。比赛仪器、设备、耗材详见附件2。

九、评分办法

（一）成绩评定

比赛以公开、公平、公正的原则全面考量参赛选手的基本技能和

基本知识的运用水平。评委由医学检验临床专家、医学检验技术专业

资深教师担任。理论考核由计算机阅卷、评分；操作技能考核由评委

依据评分标准评判选手得分（技能操作评分标准详见附件3），选手最

终得分取两名裁判的算术平均分。

选手总成绩=理论考核得分×40%+操作技能考核×60%

选手成绩排名按照每个分赛项全部参赛选手成绩由高到低排序确

定，若成绩相同，则技能操作所用时间少者排名在前。

（二）成绩审核及公布

赛项记分员对评分表进行核对，无误后交由赛点执委会指定的专

人复核。经复核无误后公示，公示时间为2小时。公示无异议后公布

竞赛成绩。

十、奖项设定

按照实际参赛人数的10%、20%、30%（小数点后四舍五入）分别设

置一、二、三等奖。其他情况按照竞赛规程总则执行。

十一、申诉与仲裁

（一）各参赛队对不符合大赛和赛项规程规定的仪器、设备、服

装、竞赛使用耗材、用品，竞赛执裁、赛场管理，以及工作人员的不

规范行为等，可向赛项仲裁组提出申诉。申诉主体为参赛队领队。

（二）仲裁人员的姓名、联系方式、工作地点在竞赛期间向参赛

队和工作人员公示，确保信息畅通并同时接受大众监督。

（三）申诉启动时，由参赛队领队向赛项仲裁工作组递交亲笔签

字同意的书面申诉报告。申诉报告应对申诉事件的现象、发生时间、

涉及人员、申诉依据等进行充分、实事求是的叙述。非书面申诉不予

受理。

（四）提出申诉的时间应在比赛结束后（选手赛场比赛内容全部

完成）2小时内。超过时效不予受理。

（五）赛项仲裁工作组在接到申诉报告后的2小时内组织复议，

并及时将复议结果以书面形式告知申诉方。

（六）申诉方不得以任何理由拒绝接收仲裁结果。仲裁结果由申

诉人签收，不能代收。

（七）如在约定时间和地点申诉人离开，视为自行放弃申诉；申

诉方可随时提出放弃申诉。

（八）申诉方必须提供真实的申诉信息并严格遵守申诉程序，不

得以任何理由采取过激行为扰乱赛场秩序。

十二、安全预案

（一）赛场安全准备工作

1.赛点执委会须在赛前组织专人对比赛现场、住宿场所和交通保

障进行考察，确保工作安全。赛场的布置，赛场内的器材、设备，符

合国家有关安全规定。

2.赛场周围设立警戒线，防止无关人员进入，发生意外事件。比

赛现场内参照相关职业岗位的要求为选手提供必要的劳动保护。

3.制定开放赛场和体验区的人员疏导方案。赛场环境中对存在人

员密集、车流与人流交错的区域，除了设置齐全的指示标志外，增加

引导人员，并开辟备用通道。

4.大赛期间，赛场设置医疗点，建立安全管理日志。

5.参赛选手、赛项裁判、工作人员严禁携带通讯、摄录设备和未

经许可的记录用具进入比赛区域。

（二）竞赛准备工作

1.赛前对全体人员进行安全教育，并明确每个人的相关职责，熟

悉比赛环节，做到心中有数。

2.召集竞赛执委会成员、裁判员、工作人员、各领队会议，说明

竞赛事宜和工作要求，明确安全责任及注意事项。

3.赛点执委会和专家组应在赛前再次检查竞赛器材及场地，保证

参赛选手比赛安全。

（三）组织过程安全责任

1.竞赛期间，裁判员、工作人员应各司其职，保证所在场地区域

内参赛选手的安全，确保比赛正常进行。

2.领队为参赛院校所有选手安全的第一责任人，应按照竞赛要求

组织本参赛队选手在指定位置就位；参赛选手有事须向领队请假。

3.参赛选手检录后方能进入比赛场地，认真进行准备活动，比赛

完毕立即退场，不得在赛场内逗留围观。

4.竞赛期间，赛场内设置安全责任岗，加强对赛场内的安全巡查

工作，责任到人。严禁非本赛项人员未经允许私自进入观看比赛或滋

事。

5.竞赛期间有医护人员坚守现场，随时准备处理可能发生的竞赛

伤害，并提前备好相应急救药品和器械。

（四）赛场预案

1.火灾安全事故紧急处理预案

若发生火灾，及时通知安保负责人,组织人员疏散、切断电源，将

易燃易爆物品及时转移到安全地带，同时组织人员使用适宜的灭火器

材灭火。若有伤员合理处置。

2.电力供应事故紧急处理预案

若比赛过程中突发临时停电，安保负责人维持秩序的同时，积极

调配专业电工，查明停电原因，采取相应措施。

3.赛场人员突发伤病紧急处理预案

赛场指定区域配备医护人员以及相应的药品，现场不能处理的及

时送120急救中心。

（五）应对突发事件的措施

比赛期间一旦发生突发性事件，赛点执委会必须立即做出反应，

及时了解和分析事件的起因和发展态势，采取措施控制事件的发展和

影响范围，将损失降低到最小限度。

1.当遇到突发事件时，参赛人员按照方案要求坚守岗位，各司其

职，听从赛点执委会统一指挥；相关人员开展救护工作，将事故的危

害降低到最低程度，严禁私自行动。

2.事件发生后，裁判组成员、各参赛代表队的领队及指导教师应

配合积极处理，严禁擅离职守、先行撤离。

3.比赛中，如果出现各种不可预知的紧急情况，由相关项目责任

人与各参赛代表队的领队、指导教师及时组织好参赛选手，听从赛点

执委会的统一指挥，按指定的路线有序撤离。

十三、其他规定

（一）选手着装要求

理论考核选手着便装，技能操作项目着承办院校提供的统一服装

（白大褂、手套、帽子、口罩，赛后白大褂须交回）。选手自备黑色

长裤、黑色无装饰皮鞋、白色无图案长袖圆领T恤衫。

（二）赛场参观

承办院校按照赛项日程安排表所规定的时间组织参赛代表队（选

手）参观赛场。

（三）注意事项

1.参赛选手必须持本人身份证并佩戴组委会统一签发的参赛证参

加竞赛，证件不全者视作弃权处理。

2.参赛选手应于赛前30分钟到达赛项指定地点接受检录，3次检

录不到者，按弃权处理。

3.竞赛过程中，须严格遵守操作流程和规则，并自觉接受裁判的

监督和警示。比赛中，选手各项目口头报告流程说明及示例见附件3。

4.各参赛队应自觉遵守各项赛事规定，竞赛期间不得私自接触裁

判，不得在服饰上作任何泄露身份信息的标识。

附件：1.高职教师组技能操作试卷、答题纸

2.高职教师组比赛仪器、设备、耗材

3.高职教师组技能操作评分标准

附件1：

甘肃省职业院校技能大赛高职教师组检验检疫技术赛项

临床基本检验试卷

一、竞赛说明

1.主要考核医学检验技术专业及相关专业教师规范操作血细胞分析仪、血常规结果审核、

复检规则应用（手工白细胞计数）、血涂片制备和观察等专业能力。

2.项目满分100分，完成时间30分钟。

3.独立完成，不得相互询问或讨论。

4.考核成绩为操作过程、操作结果、操作时间和职业素养评分之和。

5.全部操作过程时间和操作后处理时间计入时间限额，超过规定时间将终止操作。

二、实验原理

1.血细胞分析仪工作原理：吸入一定体积的抗凝全血，血标本在稀释液和溶血剂的作用下

制成一定浓度的白细胞悬液，根据流体力学鞘流技术原理，当细胞通过仪器检测器受到固定

波长的激光照射，根据光的折射、反射、前向角等信号识别和计数细胞。分别在仪器内WBC

计数区和RBC/PLT计数区及Hb测定区检测分析，得出每升血液中WBC、RBC、PLT和Hb

结果，并通过内置软件运算处理，计算出血细胞相关参数。

2.手工白细胞计数原理：用白细胞稀释液将抗凝全血稀释一定的倍数，同时破坏溶解红细

胞。将稀释的血液注入血细胞计数板，在显微镜下计数.一定体积的白细胞数，经换算求出1L

血液中的白细胞总数。

3.血涂片制备原理：将一小滴血液均匀涂在玻片上，呈单层分布，制成薄血片。用瑞氏染

液进行染色。细胞中的碱性物质如红细胞中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞中的嗜酸性颗粒等与

酸性染料伊红结合染成红色；细胞中的酸性物质如淋巴细胞胞质及嗜碱性粒细胞质中的嗜碱

性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色；中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲

蓝均可结合，染成淡紫红色。

三、实验器材和试剂

1.血细胞分析仪：五分类全自动血细胞分析仪，已大保养、已校准，可打印出三种血细胞

直方图。

2.数码摄像显微镜、计算器等。

3.耗材：一次性小试管、试管架、血细胞计数板、计数板专用血盖片、1.00ml刻度吸管、

洗耳球、20μl微量吸管、乳胶头（有孔和无孔可自选）、干棉球、镜油、镜头清洁剂、擦镜

纸、纱布、签字笔、记号笔、吸水纸、草稿纸、免洗消毒洗手液、面盆、抹布、废液缸、锐

器盒和医用污物缸、载玻片、推片、蜡笔、染色盘、染色架等。

4.试剂：

（1）血细胞分析仪配套试剂：溶血素、稀释液、清洗液等。

（2）白细胞稀释液：2%冰乙酸溶液中加入10g/L结晶紫（或亚甲蓝）3滴过滤后使用。

（3）瑞氏染色：Ⅰ液、Ⅱ液。

4.试剂：

（1）血细胞分析仪配套试剂：溶血素、稀释液、清洗液等。

（2）白细胞稀释液：2%冰乙酸溶液中加入10g/L结晶紫（或亚甲蓝）3滴过滤后使用。

（3）瑞氏染色：Ⅰ液、Ⅱ液。

四、实验标本

血细胞分析仪全血质控物、新鲜EDTA-K2抗凝全血。

五、操作步骤

1.血液常规检验（仪器法）

（1）开机前准备：

①检查稀释液、清洗液、溶血素是否充足，有无过期;试剂管路是否弯折，连接是否可靠。

②各电源线是否正确连接。

③废液桶是否清空。

④打印纸安装是否正确，是否足够。（以上内容需逐项口头报告）

（2）开机：按厂家培训进行，仪器初始化过程结束后，系统自动进入“计数”界面。（赛

时已开机选手需口头报告是否开机）

（3）稀释液本底检查：赛时已进行本底检测，（选手需口头报告本底是否正常）。

（4）检测模式选择：选全血模式。（选手需口头报告检测模式）

（5）全血质控物检测与审核：质控物放至室温15～30min，平衡至室温，手动混匀质控

物。结果在控时方可检测标本。（赛时质控已做需选手口头报告质控在控情况）

（6）标本检测与结果打印：取出标本观察有无凝集，无凝集时上下颠倒混匀5～8次，

上机检测并打印报告，检测后标本放原位。

（7）关机：一般以先清洗后关机为原则。（赛时无需关机但需口头报告清洗操作）

2．白细胞计数（手工法）

（1）准备稀释液：取小试管1支，加入白细胞稀释液0.38ml。

（2）取血：用微量吸管准确吸取EDTA-K2抗凝全血20µl。

（3）稀释：擦去管外余血，将其插入小试管中稀释液底部，轻轻将血放出，并吸取上清

液漱洗吸管2～3次，注意不能冲浑稀释液，最后轻摇试管，使之均匀。

（4）充池：检查计数板和血盖片，必要时用擦镜纸擦拭干净，将血盖片盖在计数板上，

待红细胞完全破坏，用微量吸管吸取混匀的白细胞悬液，充入计数池中，静置2～3min，待血

细胞下沉。

（5）计数：用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数，对压线的白细胞，按“数上不

数下，数左不数右”的原则计数。（此处显微镜已连电脑屏幕，选手需按评委指令把相应的计

数区域调到视野中央便于评委核对）

3．血涂片制备及观察

（1）血涂片制备

选择载玻片，正确编号，左手拇指、食指和中指持载玻片的两端，右手拇指、食指和中

指握住推片的两边，将推片的前端下缘放于血滴的前方，然后从血滴前方向后慢慢移动，接

触血滴后左右轻轻摆动，使血液沿推片下缘散开，以30°～45°快速、平稳地将推片向前推

进至载玻片的另一端，则血液在载玻片上形成一厚薄适宜，头、体、尾分明，两端和两侧留

有空隙的舌型血膜。

（2）瑞氏染色

①加Ⅰ液制备好的血涂片充分干燥后，用蜡笔在血膜两端画线，以防染色时染液外溢。

然后将血涂片平放于染色架上，滴加适量Ⅰ液，以覆盖整个血膜为度，静置0.5～1min。

②加Ⅱ液按比例滴加Ⅱ液，轻轻摇动血涂片或用吸耳球对准血涂片吹气，使Ⅰ液和Ⅱ

液充分混合并完全覆盖血膜，室温下染色5～10min。

③冲洗平持血涂片，用流水缓缓冲去染液，直至冲洗干净。

④干燥（可用吸水纸）

（3）白细胞分类观察

①用10×物镜观察血涂片全片，观察染色及细胞分布情况。（显微镜连电脑屏幕）

②在体尾交界处、100×物镜下选择血涂片细胞分布均匀、着色良好的区域，按一定的方

向顺序找到不少于3种白细胞，如：中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞，请评委复核。

甘肃省职业院校技能大赛高职教师组检验检疫技术赛项

临床基本检验答题纸

场次号工位号标本号比赛日期年月日

一、血细胞分析仪检测结果

1.书写标本编号、粘贴检测结果

检验者签名（写选手工位号）

报告日期

得分

裁判签名

二、手工法白细胞计数

1．数据记录在下列空格中写上与计数板位置（以免与裁判计数不对应）相应大方格的白

细胞数。并计算出白细胞总数。（裁判抽查对角2个大方格WBC数,与选手相应大方格内WBC

结果进行比较，根据误差进行扣分）

12

43

2．计算白细胞浓度（写出计算公式及计算过程）（取小数点后2位）

WBC=

三、血涂片制备及观察

在体尾交界处，用100×镜下，按一定方向顺序对所见到的每一个完整白细

胞进行观察，找到不少于三种白细胞。

四、结果报告

1.仪器法白细胞计数：

2.手工法白细胞计数：

3.镜下找到不少于3种白细胞：

得分

裁判签名

甘肃省职业院校技能大赛高职教师组检验检疫技术赛项

微生物学检验试卷

一、竞赛说明

1.主要考核医学检验技术及相关专业教师对革兰染色、分区划线的熟练程度，在规定时间

内完成革兰染色和细菌分区（四区）划线的操作。

2.本题满分100分，完成时间22分钟，其中细菌分区划线6分钟，革兰染色16分钟。准

备时间各2分钟。

3.独立完成，不得相互询问或讨论。

4.考核成绩为操作过程、操作结果、考核时间、职业素养评分之和。

5.全部操作过程时间和操作后处理时间计入时间限额，超过规定时间将终止操作。

二、实验原理

（一）细菌分区（四区）划线

是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。

（二）革兰染色

G＋菌：细胞壁结构较致密，肽聚糖层厚，脂质少，乙醇脱色时不易渗入菌体，并能使细

胞壁脱水，间隙缩小，通透性下降，阻止结晶紫-碘复合物从胞内渗出，保留紫色。

G－菌：细胞壁结构较疏松，肽聚糖层薄，脂质多，易被乙醇溶解，使细胞壁通透性增高，

菌体内的结晶紫-碘复合物易被乙醇溶解逸出而脱掉紫色，经沙黄或稀释石碳酸复红复染后呈

红色。

三、实验器材和试剂

（一）分区（四区）划线法

标本（7cm血平板培养物）、9cm血平板、记号笔、不干胶标签（约2cm×3cm方形）、生

物安全柜、酒精棉球、酒精缸、镊子、接种环、试管架、计时器、恒温培养箱等。

（二）革兰染色

载玻片、试管架、红蓝铅笔、接种环、记号笔、酒精灯、打火机、生理盐水、吸水纸、

冲洗瓶、计时器、纱布（可用于拭擦玻片）、显微镜、镜油、镜头清洁液、擦镜纸、染色盘、

染色架、消毒洗手液、洗面盆、抹布、锐器盒、普通污物缸、废液缸、标本盒等。

四、实验试剂

革兰染液、结晶紫染液、碘液、脱色液（95%乙醇）、复染液。

五、实验标本

7cm血平板细菌培养物

六、操作步骤

（一）细菌分区（四区）划线法

1.标记：在9cm平板底部粘贴上不干胶标签，并用签字笔在标签上正确标记。

2.取菌：右手持接种环（执笔式）伸入红外线灭菌器腔内6～8秒，外移接种环，离开红

外线灭菌器内腔，待冷却后挑取少许标本。

3.划线：左手持琼脂平板适当倾斜，用拇指打开皿盖，使其与皿底间分开2cm～3cm宽的

缝隙，右手持取标本的接种环深入皿内，先将细菌标本在培养基一角涂成直径约一厘米薄膜，

并以此为起点，使接种环与接种平板面呈30°～40°角，以腕力在平板表面进行，连续不重

叠划线，作为第一区，其范围不能超过平板的1/4；灭菌接种环，待冷却后，转动平皿至适合

操作的位置（各区的交角应为120°左右，即平板转动一定角度约60°，以便充分利用整个

平板的面积），将接种环通过第一区3～4次，连续不重叠划线，作为第二区。同法依次划完

第三、四区，第四区切勿重新接触第一、二区。注意每区的划线须有数条线与上区交叉接触，

每区线间需保持一定距离，线条要密而不重复；划第三至第四区间可不灭菌接种环。

4.培养：划线完毕，盖好皿盖，倒置放入37℃恒温培养箱中培养18h～24h。

5.观察结果：培养18～24h后，从恒温培养箱中取出，观察菌落生长情况并计数单个菌落

数量。

（二）革兰染色

1.标记：选择玻片并正确编号。

2.涂片：用灭菌接种环挑取菌落与载玻片上预先滴加的生理盐水涂布成1cm2或蚕豆大小

的均匀半透明菌膜。

3.干燥：涂片制成后，在空气中使其迅速干燥，以免菌体皱缩变形（若需加快干燥速度，

将涂布面朝上，置于火焰上方，不烫手的位置，慢慢烘干，切勿紧贴火焰）。

4.固定：玻片干燥后用火焰加热法固定，即玻片（菌膜面向上）以中速（钟摆速度）来回

通过火焰外焰3次进行固定，以玻片反面接触手背皮肤，热而不烫为宜。

5.初染：加结晶紫染液，染60s，细流水冲洗，并倒去玻片上积水。

6.媒染：加碘液，染60s，细流水冲洗，倒去玻片上积水。

7.脱色：加脱色液，脱色10～30s，不时摇动至无紫色逸出为止，细流水冲洗，倒去玻

片上积水。

8.复染：加复染液，染30～60s，细流水冲洗，倒去玻片上积水。

9.镜检：待已染色的细菌标本片自然干燥或用吸水纸吸干后，再用显微镜进行观察。

甘肃省职业院校技能大赛高职教师组检验检疫技术赛项

微生物学检验答题纸

场次号工位号标本号比赛日期年月日

一、革兰染色结果

1.绘出镜下形态

2．镜下结果描述

参赛选手填写复核裁判填写

菌体颜色

菌体形态

染色性

染色色彩是否清晰选手不填

3.初步报告

（如：找到革兰阳性球（杆）菌或找到革兰阴性杆菌）

得分

裁判签名

二、分区（四区）划线结果

得分

裁判签名

甘肃省职业院校技能大赛高职教师组检验检疫技术赛项

生物化学及免疫学检验试卷

一、竞赛说明

1.主要考核医学检验技术及相关专业教师对生化检验和免疫学检验基本操作技术的熟练

程度和对半自动生化分析仪、酶标仪等常规设备的规范操作能力。

2.本题满分100分，完成时间55分钟。

3.独立完成，不得相互询问或讨论。

4.考核成绩为操作过程、操作结果、操作时间和职业素养评分之和。

5.全部操作过程时间和操作后处理时间计入时间限额，超过规定时间将终止操作。

6.设定项目：血清总蛋白（TP）测定（双缩脲法）+乙肝病毒表面抗体检测项目（双抗原

夹心酶联免疫吸附法）。

二、实验原理

1.血清总蛋白测定原理：血清蛋白质分子中的肽键(-CO-NH-)在碱性溶液中能与试剂中的

Cu2+作用生成稳定的紫红色的络合物，此络合物在540nm处有明显的吸收峰，其溶液吸光度

在一定浓度范围内与血清（浆）蛋白质（TP）含量成正比，经与同样处理的蛋白标准液比较，

即可求得血清（浆）TP含量。

2.乙肝表面抗体测定原理（双抗原夹心酶联免疫吸附法）：在微孔板条上预包被HBsAg，

加入待测样本及酶标抗原（HBsAg-HRP）试剂进行孵育；样本中的HBsAb与包被抗原和酶标

抗原形成“包被抗原-抗体-酶标抗原”复合物；洗板后加入酶底物显色溶液，复合物上连接的

HRP催化色原底物发生显色反应。若样品中无HBsAb时，不发生显色反应。

三、实验器材和试剂

1.血清总蛋白测定：试管4只（使用3只，备用1只），试管架，移液枪1支（规格5～

50μl）及配套枪头、枪头盒，1ml、2ml刻度吸管各1支，洗耳球2个，计时器1个，托盘1

个。半自动生化分析仪、恒温水浴箱、锐器盒、废液缸、胶水、签字笔、记号笔等。

2.乙肝病毒表面抗体检测：微孔板（已用纯化HBsAg包被，96孔），洗耳球1个、试管

架1个，手动可调式移液器（已校正，10~100μl）1把及配套枪头、枪头盒、滤纸、医用纱布

块、冲洗瓶（内装已经稀释的洗涤液）、标记笔、计算器、签字笔、计时器、恒温水浴箱、计

时器（孵育专用）、酶标仪、消毒洗手液、面盆、抹布、废液缸、锐器盒，移液枪架、振荡器、

废液中转箱，医疗废物桶。

3.实验试剂：双缩脲法总蛋白测定试剂盒、乙肝病毒表面抗体检测试剂盒（含酶标记、酶

底物显色溶液、阴性对照、阳性对照）。

四、实验标本

血清总蛋白测定建议购买质控血清作为标本。乙肝病毒表面抗体检测使用不同浓度无溶

血血清标本。

五、操作步骤

（一）血清总蛋白测定

取3支洁净的小试管，按表1操作如下：

TP的操作

加入物空白管(B)标准管(S)测定管(U)

生理盐水（μl）2500

蛋白标准液（μl）0250

血清标本（μl）0025

双缩脲试剂（ml）2.02.02.0

混匀，37℃水浴10分钟，波长540nm，用半自动化生化分析仪读其测定值并打印结果（以

上各加液量及参数以选用的试剂盒使用要求为准）。

（二）乙肝病毒表面抗体检测

1.实验准备：核对实验仪器和材料，检查试剂和标本。

2.反应板标记：选取所需反应板并做好标记。（设立空白对照孔1孔，阴性对照2孔，阳

性对照2孔。阳性对照用红色记号笔，阴性对照用黑色记号笔）。

3.稀释浓缩洗液：按照说明书要求稀释浓缩液，混匀备用。（已配置好待用）

4.加待测标本：按照既定顺序依次加入阴性对照（2孔）、阳性对照（2孔）、待测标本（7

孔）各50μl，待测。空白对照（1孔）不加。（3min内完成）

5.加酶结合物：每孔用滴瓶滴加1滴（空白孔不加），通过振荡器充分混匀（时间30s），

封板，置37℃水浴箱中孵育30min。（孵育期间同时进行血清总蛋白测定操作）

6.洗板：取出反应板，弃液、拍干，每孔注满洗涤液，静置5秒后弃液、甩干，重复洗涤

5次，在干净的滤纸上拍干。

7.加显色剂：每孔先后加显色剂A、B各1滴，通过振荡器充分混匀（时间30s），封板，

放置37℃水浴箱中避光孵育10min。

8.终止反应：每孔加入终止液1滴，混匀。

9.测定：打开酶标仪进行布板、选择酶标仪双波长（450nm/630nm）比色、选用空白孔校

零，点击开始，读取各孔OD值，打印并粘贴结果。

甘肃省职业院校技能大赛高职教师组检验检疫技术赛项

生物化学及免疫学检验答题纸

场次号工位号标本号比赛日期年月日

血清总蛋白测定数据记录：

血清总蛋白结果书写（小数点后两

打印结果报告粘贴处

测定结果位）：

说明：打印报告单上选手（只写比赛顺序号和工位号，不得写选手姓名）、现场裁判都需

签字确认。

得分

裁判签名

甘肃省职业院校技能大赛高职教师组检验检疫技术赛项

生物化学及免疫学检验答题纸

场次号工位号标本号比赛日期年月日

乙肝表面抗体检测数据记录与计算

1．数据记录与结果计算（将酶标仪测试结果打印并粘贴此处）

结果粘贴处

得分

裁判签名

2.计算阳性判定阈值(cut-off)（写出计算公式及过程，结果取3位小数点）

得分

裁判签名

3.报告

阳性标本有：

阴性标本有：

得分

裁判签名

附件2：

高职教师组检验检疫技术赛项仪器、设备、耗材

（一）临床基本检验仪器、设备、耗材清单

序号物品名称规格型号

1玻璃试管8mm*100mm

2试管架50孔位（不锈钢材质）

3改良Neubauer计数板Marienfeld血球计数板（亮线型）

4计数板盖玻片10块/盒，20*26*0.4mm

51.00ml吸量管1.00ml,(量出/量入式)

6洗耳球通用

7刻度吸管架圆形，两层，铸铁底座,垂直放置

8一次性微量吸管来绪，10-20μl

9有孔乳胶头通用

10干棉球通用，盛放于口径9CM带盖不锈钢缸内

11纱布通用，盛放于一次性塑料平皿

12不锈钢托盘45cm*35cm*5cm

13桌面计算器得力837

14废液缸10CM*10CM，带盖搪瓷缸

15锐器盒通用，3L

16普通污物缸10CM*10CM，带盖搪瓷缸

17擦镜纸通用，10*15CM/张，100张/本

18试管回收缸通用，3L（锐器盒）

19显微镜重庆奥特BK6000数码成像系统

20白细胞稀释液弘慈，100ml/瓶

21记号笔（黑）小号，双头

22吸水纸（滤纸）通用

23染色盘45cm*35cm*5cm

24染色架通用，自制（玻璃棒+压脉带）

25单头单面磨砂载玻片（病理级）江苏世泰，50片/盒，25*75mm

26推片通用

27瑞氏-吉姆萨染液贝索，A液+B液，20ml/瓶

28香柏油贝索，20ml*4瓶/盒

29二甲苯通用，500ml/瓶

30血细胞分析仪配套试剂深圳帝迈DH71CRP型配套试剂

31血细胞分析仪深圳帝迈DH71CRP型

32形态学教学及能力评价系统国药集团重庆医疗器械有限公司

（二）生物化学检验仪器、设备、耗材清单

序号材料名称规格型号

1玻璃试管10mm*120mm

2试管架50孔位（塑料）

310.0ml吸量管10.0ml，(量出/量入式)

4洗耳球通用

5刻度吸管架圆形，两层，铸铁底座,垂直放置

6手动可调式移液器大龙，5-50μl

7移液枪架通用

8枪头大龙配套，1000个/包

9枪头盒通用，枪头配套

10带塞EP管通用，1.5ml，500只/包

11EP管架60孔(12孔*5孔，正反两用)

12记号笔（黑）小号，双头

13计时器通用，带磁铁

14不锈钢托盘45cm*35cm*5cm

15锐器盒通用，3L

16普通污物缸10CM*10CM，带盖搪瓷缸

17废液缸10CM*10CM，带盖搪瓷缸

18半自动生化分析仪北京普朗PUS-2018G型

19恒温水浴箱祥达HH-420

20血清总蛋白测定试剂盒中生北控试剂盒（双缩脲法），100mL*2

（三）微生物学检验仪器、设备、耗材清单

序号材料名称规格型号

1玻璃试管12mm*100mm

2试管架50孔位（不锈钢材质）

3玻璃试管塞配套12mm*100mm试管

4生理盐水通用，100ml/瓶

5单头单面磨砂载玻片（病理级）江苏世泰，50片/盒，25*75mm

6接种丝（铂金丝）姜堰，10根/包

7接种棒长度220mm，10根/盒

8酒精灯通用

9打火机通用

10吸水纸（滤纸）通用

11冲洗瓶250ml，弯嘴窄口，塑料

12记号笔（黑）小号，双头

13红蓝铅笔得力

14擦镜纸10*15CM/张，100张/本

15染色盘45cm*35cm*5cm

16染色架通用，自制（玻璃棒+压脉带）

17普通污物缸10CM*10CM，带盖搪瓷缸

18废液缸10CM*10CM，带盖搪瓷缸

19玻片回收盒通用，50孔位

20显微镜重庆奥特BK6000数码成像系统

21革兰染液滨和10ml*8瓶/盒

22香柏油贝索，20ml*4瓶/盒

23二甲苯通用，500ml/瓶

24血平板安图，90mm

25生物安全柜济南鑫贝西BSC-1500ⅡA2-X

26电热恒温培养箱上海一恒DHP-9162

27计时器通用，带磁铁

28纱布通用，盛放于一次性塑料平皿

29酒精棉球通用，盛放于口径9CM带盖不锈钢缸内

30酒精缸口径9CM带盖不锈钢缸

31镊子通用，不锈钢

（四）免疫学检验仪器、设备、耗材清单

序号材料名称规格型号

1手动可调式移液器大龙，5-50μl

2枪头大龙配套，1000个/包

3枪头盒通用，枪头配套

4带塞EP管通用，1.5ml，500只/包

5EP管架60孔(12孔*5孔，正反两用)

6计时器通用，带磁铁

7桌面计算器得力837

8锐器盒通用，3L

9洗耳球通用

10吸水纸（滤纸）通用

11冲洗瓶250ml，弯嘴窄口，塑料

12记号笔（黑）小号，双头

13记号笔（红）小号，双头

14普通污物缸10CM*10CM，带盖搪瓷缸

15废液缸10CM*10CM，带盖搪瓷缸

16废液中转箱长46CM*宽34.5CM*高29CM，65L

17乙肝表面抗体测定试剂盒上海荣盛96人份

18恒温水浴箱祥达HH-420

19振荡器其林贝尔MH-2

20酶标分析仪北京普朗DNM-9602G型

21纱布通用，盛放于一次性塑料平皿

22移液枪架通用

23试管架50孔位（塑料）

（五）理论和形态学考核设备清单

序号材料名称规格型号单位

国药集团重庆医疗器械有限公司

1形态学教学及能力评价系统套

V1.0/理论和形态学考试

附件3：

甘肃省职业院校技能大赛高职教师组检验检疫技术赛项

临床基本检验评分标准

血液常规检验（30分）

序分扣得

项目考核内容扣分标准

号值分分

正确在试卷上填写信息（场

漏填一项（缺一项或错一

次号+工位号+标本号+日

项扣0.5分，分值不再细0.5

准备工期）；报告参赛项目及工位

化扣分，下同）

作号，语言流畅清晰

（报告仪表端庄、头发符合要求，

1着白大衣、帽、口罩、手套2

参赛项着装不整、漏缺一项0.5

并按要求佩戴参赛签号

目及准

工作台面器材齐全，放置整漏选实验器材或试剂、台

备器材）0.5

齐面物品摆放凌乱

2分钟内完成准备工作准备时间超过2分钟0.5

检查稀释液、清洗液、溶血

开机前未检查或未报告扣1分；

2素、电源线连接、打印纸、11

准备

废液桶清空情况等报告缺项扣0.5分

开启电源，预温

15-30min(赛时已提前预

温)仪器自检通过，初始化

仪器开

3过程结束后，系统自动进入1未报告开机情况1

机

“检测”界面。（赛时已为

检测界面，需报告开机情

况）

本底检未报告本底检测是否合

4进行稀释液本底检测11

测格

模式选