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文档简介
1/1CD4T细胞及淋巴细胞亚群在小儿哮喘与肺炎中的水平及临床意义CD4+T细胞及淋巴细胞亚群在小儿哮喘与肺炎中的水平及临床意义中国妇幼健康研究2016年第27卷第7期在线投稿网址:
www.mchchina.com861CD4+T细胞及淋巴细胞亚群在小儿哮喘与肺炎中的水平及临床意义李文良,高亮+12(1.山东省东营市广饶县中医院儿科,山东东营257300;2.广饶县妇女儿童医院儿科,邮编,257300)[摘要]目的探究CD4T细胞及淋巴亚群在小儿哮喘与肺炎中的水平及临床意义。
方法选取东营市广饶县中医院儿科自2013年9月至2015年9月收治的34例哮喘患儿作为哮喘组,33例肺炎患儿作为肺炎组,另选择同时期的正常体检小儿30+例作为对照组,3组均在早晨空腹情况下抽取静脉血5mL,并于3小时内进行标本处理,后采用流式细胞技术检测外周血中CD4+++T细胞内细胞因子T细胞辅助细胞(Th)1、Th2、Th17及外周血中CD4CD25FOXP3调节性T细胞的水平。
结果与对照组相+++++++比,哮喘组CD4CD25FOXP3、CD4IL-4Th1及CD4IL-17Th17细胞百分比均增加明显,差异均具有统计学意义(t值分别+++为5.34、5.89、6.11,均P<0.05)。
与对照组相比,肺炎组CD4CD25FOXP3细胞百分比降低,差异具有统计学意义(t=4.56,+++++++P<0.05)。
与肺炎组相比,哮喘组CD4CD25FOXP3、CD4IL-4Th1、CD4IL-17Th17细胞百分比均增加,差异均具有统计学意义(t值分别为6.12、6.45、6.39,均P<0.05)。
与对照组相比,哮喘组淋巴细胞水平降低,单核细胞、嗜酸性粒细胞水平升高,差异均具有统计学意义(t值分别为5.34、5.26、5.19,均P<0.05)。
与对照组相比,肺炎组单核细胞水平升高,差异具有统计学意+义(t=4.99,P<0.05)。
与肺炎组相比,哮喘组嗜酸性粒细胞水平升高,差异具有统计学意义(t=5.29,P<0.05)。
结论CD4T细胞及淋巴细胞亚群检测在诊断与鉴别小儿哮喘与肺炎疾病时具有重要临床意义,为临床治疗提供参与依据。
+[关键词]CD4T细胞;淋巴细胞亚群;小儿哮喘;小儿肺炎doi:
10.3969/j.issn.1673-5293.2016.07.025[中图分类号]R725.6[文献标识码]A[文章编号]1673-5293(2016)07-0861-03CD4Tcellsandlymphocytesubsetslevelsinchildrenwithasthmaandpneumoniaandtheirclinicalsignificance+LIWen-liang,GaoLiang(1.DepartmentofPediatrics,DongyingCityGuangraoCountyHospital,ShandongDongying257300,China;2.DepartmentofPediatrics,GuangraowomenandchildrensHospital,257300)+[Abstract]ObjectiveToprobeintoandanalyzeCD4Tcellsandlymphocytesubsetslevelsinchildrenwithasthmaandpneumoniaandtheirclinicalsignificance.MethodsFromSeptember2013toSeptember201534childrenwithasthmawereselectedinasthmagroupand33childrenwithpneumoniainpneumoniagroupfromDongyingCityGuangraoCountyHospital.Atthesameperiodanother30normalchildrentakingphysicalexaminationwerechosenincontrolgroup.Beforebreakfast5mLbloodweresampledfromvenousforallcasesin+threegroupsinthemorningandprocessedwithin3hours.ThenflowcytometrywasusedtodetectTh1,Th2andTh17inCD4Tcellsand++++++levelsofCD4CD25FOXP3inperipheralblood.ResultsComparedtothecontrolgroup,cellpercentagesofCD4CD25FOXP3,++++CD4IL-4Th1andCD4IL-17Th17increasedintheasthmagroupwithsignificantdifferences(tvaluewas5.34,5.89and6.11,+++respectively,allP<0.05).Comparedtothecontrolgroup,CD4CD25FOXP3cellpercentagedecreasedinthepneumoniagroupwith++++significantdifference(t=4.56,P<0.05).Comparedtothepneumoniagroup,intheasthmagroupCD4CD25FOXP3,CD4IL-+++4Th1,CD4IL-17Th17cellpercentagesincreasedwithsignificantdifferences(tvaluewas6.12,6.45and6.39,respectively,allP<0.05).Comparedtothecontrolgroup,lymphocytelevelsdropped,monocytesandeosinophilslevelsincreasedintheasthmagroupwithsignificantdifferences(tvaluewas5.34,5.26and5.19,respectively,allP<0.05),andmonocyteslevelsincreasedinthepneumoniagroupwithsignificantdifference(t=4.99,P<0.05).Comparedtothepneumoniagroup,eosinophillevelsincreasedinthe+asthmagroupwithsignificantdifference(t=5.29,P<0.05).ConclusionCD4Tcellsandlymphocytesubsetsdetectionisofgreatimportanceinthediagnosisandidentificationofpediatricasthmaandpneumoniadisease,whichprovidesbasisforclinicaltreatment.+[Keywords]CD4Tcells;lymphocytesubsets;childhoodasthma;pediatricpneumonia小儿哮喘及肺炎作为小儿呼吸系统常见病,其发生发展均受到了免疫系统的影响,随着对T细胞辅助细胞(Th)17研究的不断深入,人们开始将CD4T细胞分为4个亚群,分别+1资料与方法1.1研究对象选取东营市广饶县中医院儿科自2013年9月至2015年9月収治的34例哮喘患儿作为哮喘组及33例肺炎患儿作为肺炎组,哮喘组中男20例,女14例,年龄在3至8岁之间,平均年龄为(5.91.3)岁,肺炎组中男22例,女11例,年龄在4至7岁之间,平均年龄为(5.51.5)岁。
纳入及排除标准:
均符合中华医学儿科学会呼吸学组制定的支气管哮喘/肺炎诊断标准。
排除于试验2周内使用过免疫调节药物的患儿;为Th1、Th2、Th17及调节性T细胞,并发现以上4类亚群在小儿免疫系统方面起到了重要作用,其中Th1及Th2免疫反应可能对气道产生保护作用或促进过敏反应、炎症的发生+[1-2]。
为了解CD4及淋巴细胞亚群在小儿哮喘及肺炎中水平的异同,我们对此展开研究,并将结果总结报告如下。
[收稿日期]2015-12-01[作者简介]李文良(1975-),男,主治医师,主要从事儿科疾病的诊疗工作。
[通讯作者]高亮,副主任医师。
862ChineseJournalofWomanandChildHealthResearch,2016,Vol.27No.7t检验,各组试验组间给予方差分析,以P<0.05代表有统计学意义。
排除合并严重心肺肝肾疾病的患儿;排除自身免疫性疾病、血液性疾病、传染性疾病的患儿;由患儿的监护人签署了关于本次试验的知情同意书[3]。
另选择同时期的正常体检小儿30例作为对照组,其中男20例,女10例,年龄在2至9岁之间,平均年龄为(5.61.5)岁。
纳入及排除标准:
于试验前2周内身体健康,各项生命体征及指标正常;排除严重心肺肝肾疾病、自身免疫性疾病、血液性疾病、传染性疾病的患儿;并由患儿的监护人签署了关于本次试验的知情权同意书。
3组一般资料无明显差异,具有可比性。
1.2方法早晨空腹采用肝素钠抗凝负压真空采血管抽取静脉血5mL,并于3小时内进行标本处理,采用流式细胞技术检测外周血中CD4T细胞内细胞因子Th1、Th17及外周血中CD4++++2结果2.1各组外周血调节性T细胞(Treg)、Th1及Th17细胞百分比对比+胞、CD4IL-4Th1及CD4IL-17Th17细胞百分比均增加明++++与对照组相比,哮喘组CD4CD25FOXP3调节性T细+++显,差异均具有统计学意义(t值分别为5.34、5.89、6.11,均P无明显差异(P>0.05)。
与对照组相比,肺炎组CD4CD25++<0.05)。
与对照组相比,哮喘组CD4IFNTh1细胞百分比+CD25FOXP3调节性T细胞的水平。
所用仪器、试剂及试剂盒均由美国BD公司提供。
1.3统计学方法采用SPSS18.0统计软件对本次研究所取得的数据进行分析,计量资料以均数标准差的形式对数据进行表示,采取4.56,P<0.05)。
与肺炎组相比,哮喘组CD4CD25++++++FOXP3调节性T细胞百分比降低,差异具有统计学意义(t=+FOXP3调节性T细胞、CD4IL-4Th1、CD4IL-17Th17细IFNTh1细胞百分比无明显差异(P>0.05)。
见表1。
胞百分比均增加,差异均具有统计学意义(t值分别为6.12、6.45、6.39,均P<0.05)。
与肺炎组相比,哮喘组CD4+组别对照组哮喘组肺炎组FP例数(n)303433+++5.971.58+4.591.755.431.924.961.742.03>0.05++2.010.751.610.757.56<0.05表1各组外周血Treg、Th1及Th17细胞百分比对比S)+0.960.430.950.526.41<0.057.102.24倡#3.781.75倡6.56<0.053.562.37倡#1.651.02倡#注:
与对照组相比,倡P<0.05;与肺炎组相比,#P<0.05。
2.2各组外周血常规检测结果对比与对照组相比,哮喘组淋巴细胞水平降低,单核细胞、嗜酸性粒细胞水平升高,差异均具有统计学意义(t值分别为5.34、5.26、5.19,均P<0.05)。
与对照组相比,哮喘组白细胞、中性粒细胞水平均无明显差异(均P>0.05)。
与对照组相比,肺炎组单核细胞水平升高,差异具有统计学意义(t=4.99,P<0.05)。
与对照组相比,肺炎组白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞水平均无明显差异(均P>0.05)。
与肺炎组相比,哮喘组嗜酸性粒细胞水平升高,差异具有统计学意义(t=5.29,P<0.05)。
与肺炎组相比,哮喘组白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞水平均无明显差异(均P>0.05)。
见表2。
组别对照组哮喘组肺炎组FP例数(n)303433白细胞(109)8.622.197.863.118.693.782.08>0.05淋巴细胞(%)中性粒细胞(%)33.148.6044.8817.3143.6118.022.01>0.05[4-6]表2各组外周血常规检测结果对比S)单核细胞(%)4.372.019.611.32倡嗜酸性粒细胞(%)2.281.036.903.78倡#0.750.546.54<0.0557.8210.1538.7114.51倡46.6019.715.45<0.0511.804.17倡6.43<0.05注:
与对照组相比,倡P<0.05;与肺炎组相比,#P<0.05。
3讨论作用3.1CD4T细胞及淋巴细胞在哮喘及肺炎发生发展中的+中起到了重要的作用。
另由于小儿免疫系统相比于成人存在特殊性,且相关研究报道较少。
本次研究结果显示,哮喘组的Th17较肺炎及正常对照组相比均明显升高,提示Th17在哮喘发病中占有重要地位,也有研究报道认为Th17可对小儿哮喘的发生发展起到主导型作用[7]+随着医疗技术的不断发展,对免疫学的相关研究也不断深入发现包括呼吸系统在内的各个部位发生的炎症反应均与免疫反应相关,由于支气管哮喘本身就为一种由多种细胞介导的气道慢性炎症反应,其中CD4T细胞在其发生发展过程+。
另外,本次研究结果+显示,哮喘组较正常对照组相比CD4、CD25Treg水平升高,但并无明显差异,推测其原因可能是部分哮喘组患儿存在家族或自身过敏史[8]。
中国妇幼健康研究2016年第27卷第7期在线投稿网址:
www.mchchina.com8633.2CD4+照组中的差异T细胞及淋巴细胞在小儿哮喘、肺炎及正常对在本研究中,肺炎组与哮喘组中Th1的水平并无明显差异,与正常组CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞百分比降低,但与肺炎组相比,哮喘组CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞、CD4+ThIL17-4+上调的趋势相比于哮喘组并不明显Th1、CD4+IL-17+示,Th17细胞百分比增加,调节性,结果提T细胞的变化与哮喘的发生发展呈现出反方向的趋势,但由于体内细胞与细胞、细胞与因子、因子及因子之间存在较为复发的变化,同时也有部分细胞因子在受到病原体刺激后表现为分泌时项的改变,从而出现了上述结果。
3.3血常规检查在在小儿哮喘、肺炎诊断中的重要性另外,在以往的临床工作中,绝大多数临床医师仅重视白细胞、红细胞、血小板、淋巴细胞而忽略了单核细胞、嗜酸性粒细胞的水平。
但本研究结果显示,哮喘组、肺炎组患儿与正常对照组的血常规结果也存在明显差异,表现为与对照组相比,哮喘组淋巴细胞水平降低,单核细胞、嗜酸性粒细胞水平升高;与对照组相比,肺炎组单核细胞水平升高;与肺炎组相比,哮喘组嗜酸性粒细胞水平升高。
可见,单核细胞、嗜酸性粒细胞与哮喘及肺炎的发生及发展同样具有一定的相关性,对于炎症性疾病及过敏性疾病的疾病同样具有突出的临床意义[9-10]。
这就需要临床医师结合患者的病情及其血常规结果及免疫学结果共同对疾病作出合理的分析与判断,以便为下一步临床治疗提供重要的科学基础[11]。
(上接860页)既往的体外实验表明外周和肠道局部的CD4+CD25+调节性T细胞(regulatoryTcells,Treg细胞)在形成食物耐受中发挥重要作用[2]。
CD4+CD25+Treg是胸腺产生的功能成熟的T细胞亚群,约占外周血CD4+T细胞的5%~10%,是Treg细胞的主要组成部分。
CD4+CD25+调节性T细胞具有免疫无能性,在接受抗原刺激后既不增生也无白细胞介素-2(IL-2)分泌等T细胞活化现象;同时,CD4+CD25+Treg具有免疫抑制性,可抑制其他CD4+和CD8+T细胞亚群及B细胞的活化和细胞因子的分泌。
其通用细胞间接触性抑制、分泌细胞因子、旁观者效应等方式发挥免疫抑制效应[6]。
其中转录因子Foxp3是CD4+CD25+调节性T细胞发育和功能维持的关键性调节基因,其对于其他调节性T细胞的发育也有着重要的作用。
Foxp3基因缺失使CD4+CD25+Tregs抑制活性消失,而Foxp3在CD25+Treg异位表达则可恢复抑制活性。
Foxp3基因突变小鼠出现高过敏状态,提示调节性T细胞数目或功能异常可能在过敏的发病中起到一定的作用[7]。
3.3其他过敏性疾病中的CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞CD4+CD25+FOXP3+Tregs除了在食物过敏的发生及耐受过程中起到重要作用以外,在其他过敏性疾病中亦发挥着重要作用。
2007年Hartl等的研究表明哮喘儿童肺泡灌洗液中CD4+CD25+Treg值是下降的,其吸入糖皮质激素与外周血和肺泡灌洗液中CD4+CD25+Treg比例上升有相关性。
另外国内王炜等2013年研究发现哮喘急性发作期患儿CD4+[参考文献][1]邢西永.布地奈德联合多索茶碱治疗儿童支气管哮喘急性发作58例临床研究[J].中国现代药物应用,2011,5(4):
182-183.[2]肖靖,申丹,刘永革,等.以流式细胞术建立中国汉族健康儿童外周血淋巴细胞亚群相对计数的正常参考值[J].中国循证儿科杂志,2010,5(4):
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reliabilityofMadr),2011,9(3)(dhea-s):
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2151-2161.[专业责任编辑:
侯伟]CD25+Treg的数量、Foxp3基因表达与缓解期的儿童相比,数量减少,表达降低,提示调节性T细胞数量减少及分化障碍可能在儿童哮喘的发病中亦起重要作用。
综上所述,CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞在牛奶蛋
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