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文档简介

/EBER检测试剂盒（原位杂交）试剂盒提供的材料和试剂成份保存方法提供量20人份50人份1EBER杂交液-20400ul1.0ml2蛋白酶K440ul100ul3一抗41ml2.5ml4二抗41ml2.5ml5HRP聚合物41ml2.5ml6DAB底物41ml2.5ml7DAB420ul50ul818X18mm盖玻片4℃20片50片9湿盒增效液4℃30ml30ml（注意：EBER杂交液请-20用户自备材料和试剂实验前需配试剂实验时需配试剂（现配现用）(现配现用)操作步骤1．切片处理：将4um厚度的组织粘附在APES处理的载玻片上，切片于60-70℃烘烤60分钟以上。（建议每次实验同时附加阳性、阴性对照片）3（切片在整个试验过程中要保持湿润状态，防止干片）5.1小心擦去组织周围液体，滴加适量一抗，37℃，水湿盒中孵育30分钟；37℃PBS浸泡3x2分钟；阳性结果判断标准：仅为细胞核着色。胞浆和胞膜着色不能视为阳性，只有当核分裂时可以出现胞浆阳性着色。二甲苯3X10’100%酒精1X3’95%酒精1X3’80%酒精1X3’蒸馏水1X3酶消化室温,5’蒸馏水1’加杂交液适量55℃60’37℃，4’加一抗37℃，PBS（37℃）3X2加二抗室温，20PBS浸泡冲洗3X2HRP聚合

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