广东省广州市番禺区2025届高考生物倒计时模拟卷含解析

广东省广州市番禺区2025届高考生物倒计时模拟卷注意事项：1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．下列关于细胞结构与功能的叙述错误的是（）A．细胞膜上的蛋白质具有运输、催化、识别等功能B．正常生理状态下，溶酶体能分解细胞自身的结构C．核糖体是细跑内“生产蛋白质的机器”，其形成都与核仁有关D．细胞骨架与真核细胞的运动分裂、分化等生命活动密切相关2．早在19世纪末有医生发现，癌症患者术后意外感染酿脓链球菌，其免疫功能增强、存活时间延长，从而开启了“癌症免疫疗法”的大门。“癌症免疫疗法”是指通过自身免疫系统来抗击癌细胞的疗法。下列相关叙述正确的是（）A．癌症免疫疗法主要是通过增强患者的细胞免疫功能来杀死癌细胞B．癌症免疫疗法通过改变癌细胞的遗传信息来达到治疗目的C．患者免疫功能增强是因为酿脓链球菌侵入癌细胞使其裂解死亡D．酿脓链球菌激活患者的非特异性免疫功能从而消灭癌细胞3．如图为细胞内某些生理过程。下列有关叙述正确的是（）A．整个DNA分子转录形成的mRNA含有多个起始密码子B．图中两核糖体最终合成的多肽链中氨基酸序列不同C．图示过程可能发生在洋葱根尖细胞核内D．图示过程中碱基配对方式都为A与T配对、G与C配对4．下列有关实验的叙述，合理的是（）A．可用丙酮从人的红细胞中提取脂质B．用标志重捕法调查蚜虫的种群密度时标记物不能太醒目C．可用溴麝香草酚蓝水溶液鉴定乳酸菌细胞呼吸的产物D．通过搅拌促使子代的T2噬菌体与细菌分离5．下列有关传统发酵技术应用的叙述，正确的是（）A．传统发酵技术的操作过程是在严格无菌的条件下进行的B．果醋发酵液中，液面处的醋酸杆菌密度低于瓶底处的密度C．制作腐乳时，接种3天后豆腐块表面会长满黄色的毛霉菌丝D．用带盖瓶子制作葡萄酒时，拧松瓶盖的间隔时间不一定相同6．某同学在进行“绿叶中色素的提取和分离”实验时，进行了以下操作。该同学的操作正确的是（）A．将5g新鲜菠菜叶片剪碎放入研钵中，加入无水乙醇后直接进行研磨B．将预备好的滤纸条一端剪去两角，在距这一端1cm处用铅笔画一条横线C．为增强实验效果，将滤液细线画粗些并进行多次重复D．将滤纸条画有滤液细线的一端朝下，轻轻插入层析液中，让滤液细线浸入层析液7．已知某品系油菜种子的颜色由一对等位基因A/a控制，并受另一对基因R/r影响。下表是用产黑色种子植株（甲）、产黄色种子植株（乙和丙）进行实验的结果，不能得出的结论是组别亲代F1表现型F1自交所得F2的表现型及比例实验一甲×乙全为产黑色种子植株产黑色种子植株：产黄色种子植株=3：1实验二乙×丙全为产黄色种子植株产黑色种子植株：产黄色种子植栋=3：13A．由实验一可知，种子颜色性状中黄色对黑色为隐性B．当R基因存在时会抑制A基因的表达C．乙的基因型为aarr或AARRD．实验二中F2代产黄色种子植株中杂合子的比例为10/138．（10分）如图所示，遗传系谱中的病症的遗传方式最可能是（）A．常染色体显性遗传 B．常染色体隐性遗传C．细胞质遗传 D．伴X染色体隐性遗传二、非选择题9．（10分）下图为某海岸生态护坡及部分食物网示意图，请回答下列有关问题：（1）研究人员在建造海岸生态护坡前，采用样方法调查此地的某植物的种群密度，运用此方法要保证取样时________________，避免掺杂任何主观因素。（2）上图坡地生态系统中，人们在中低潮带引种一些耐盐的植物如互花米草、白茅等，在高潮带和超高潮带种植柽柳、樟毛等相对耐干旱的植物，这主要体现了群落的________结构。（3）经观察和测定灌草丛带中的几种生物种群及同化量（图中字母代表）如上图，沙氏变色蜥在食物中所处的营养级为________________；能量从第一营养级到第二营养级的传递效率是________（用图中字母表示）。（4）若在某年有新物种迁入，其种群增长速率随时间的变化如图所示，在第十年时经调查，该种群数量为315只，则估算该种群在此环境中的容纳量为________只。10．（14分）请回答下列何题：（1）种子萌发过程中产生的CO2中的氧元素来自______________（填“葡萄糖和水”或“葡萄糖”或“水和氧气”）。（2）小麦种子吸水萌发的初期，CO2释放量比O2的吸收量多了3~4倍，原因是______________________________________。（3）农田生产中松土能促进农作物根系的生长，进而促进植株生长，从根的生理活动角度分析，原因是______________________。但是在农业上也提倡免耕法，即在农业生产中尽量少用松土措施，因为农田松土易造成水土流失，并可能加剧温室效应，试分析农田松土加剧温室效应的原因：_________________________。11．（14分）为调查某地土质状况，科研小组对该地土壤中分解尿素的细菌进行了分离和纯化培养。请回答下列问题。（1）土壤中的尿素不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成____后，才能被植物利用。（2）为筛选出分解尿素的细菌，应配制____的培养基以达到选择的作用。分解尿素的细菌不能以CO2作为碳源，但可用葡萄糖作为碳源，由此推测分解尿素的细菌是___（填“自养”或“异养”）型生物。配制好的培养基需经过高压蒸汽灭菌，在装入待灭菌物品时，不要摆得太挤，以免____。（3）对不同深度土壤取样统计菌落数目时，一般采用____方法接种，接种后需每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止____。对分离得到的分解尿素的菌种作进一步的鉴定，需加入____，如果pH____，指示剂将变红，可以初步鉴定该细菌能够分解尿素。12．萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、C【解析】

1、各种细胞器的结构、功能：细胞器分布形态结构功

能线粒体动植物细胞双层膜结构有氧呼吸的主要场所；细胞的“动力车间”叶绿体植物叶肉细胞

双层膜结构植物细胞进行光合作用的场所；植物细胞的“养料制造车间”和“能量转换站”。内质网动植物细胞

单层膜形成的网状结构细胞内蛋白质的合成和加工，以及脂质合成的“车间”高尔基体动植物细胞

单层膜构成的囊状结构对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装的“车间”及“发送站”（动物细胞高尔基体与分泌有关；植物则参与细胞壁形成）核糖体动植物细胞无膜结构，有的附着在内质网上，有的游离在细胞质中合成蛋白质的场所；“生产蛋白质的机器”溶酶体动植物细胞

单层膜形成的泡状结构“消化车间”，内含多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并且杀死侵入细胞的病毒和细菌。液泡成熟植物细胞单层膜形成的泡状结构；内含细胞液（有机酸、糖类、无机盐、色素和蛋白质等）调节植物细胞内的环境，充盈的液泡使植物细胞保持坚挺中心体动物或某些低等植物细胞无膜结构；由两个互相垂直的中心粒及其周围物质组成与细胞的有丝分裂有关2、细胞骨架是真核细胞中由蛋白质聚合而成的三维的纤维状网架体系。细胞骨架包括微丝、微管和中间纤维。细胞骨架在细胞分裂、细胞生长、细胞物质运输、细胞壁合成等等许多生命活动中都具有非常重要的作用。【详解】A、细胞膜上的载体蛋白具有运输功能，钠钾泵既可以运输Na+和K+，同时也可以催化ATP水解，细胞膜上的糖蛋白具有识别功能，A正确；B、正常生理状态下，细胞可以通过溶酶体分解衰老、损伤的细胞器，维持细胞内部环境的稳定，B正确；C、原核细胞没有核仁，其核糖体的形成与核仁无关，C错误；D、细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网架结构，与细胞运动、分裂、分化以及物质运输、能量转换、信息传递等生命活动密切相关，D正确。故选C。2、A【解析】

免疫疗法的靶点是正常免疫细胞，通过激活人体自身的免疫细胞，让免疫细胞去杀死癌症细胞。在抗原刺激下，机体的特异性免疫应答一般可分为感应、反应和效应3个阶段。感应阶段是抗原处理、呈递和识别的阶段；反应阶段是B细胞、T细胞增殖分化，以及记忆细胞形成的阶段；效应阶段是效应T细胞、抗体和淋巴因子发挥免疫效应的阶段。【详解】A、由题意可知，癌症免疫疗法主要是通过增强患者的细胞免疫功能来杀死癌细胞，A正确；B、癌症免疫疗法通过直接杀死癌细胞来达到治疗目的，B错误；C、患者免疫功能增强是因为酿脓链球菌侵入导致发生自身免疫而攻击癌细胞，C错误；D、酿脓链球菌激活患者的特异性免疫功能从而消灭癌细胞，D错误。故选A。【点睛】本题考查细胞免疫系统在维持稳态中的作用，要求考生掌握细胞免疫的具体过程，能根据题干要求作出准确的判断。3、A【解析】

图示为DNA的一条链转录形成RNA的过程，同时已转录出的mRNA部分结合了核糖体正在合成多肽链，属于边转录边翻译的过程。【详解】A、一个DNA分子包括多个基因，每个基因转录形成的mRNA均含有起始密码子，所以整个DNA分子转录形成的mRNA含有多个起始密码子，A正确；B、图中两核糖体合成的多肽链的模板相同，其最终合成的多肽链氨基酸序列相同，B错误；C、图示过程表示边转录边翻译，发生在原核细胞或真核细胞的线粒体、叶绿体中，真核细胞的核基因属于转录完成后，再开始翻译，C错误；D、图示过程包括转录和翻译，其中碱基配对方式不完全相同，转录特有的配对方式T-A在翻译过程中没有，D错误。故选A。【点睛】本题结合遗传信息表达过程图解，考查遗传信息的转录和翻译，要求考生识记细胞核基因和拟核中基因以及细胞器中基因的遗传信息转录和翻译的区别，能结合所学的知识准确判断各选项。4、A【解析】

1、CO2可使澄清石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测酵母菌培养CO2的产生情况。

2、调查种群密度常用样方法和标记重捕法，其中样方法适用于调查植物和活动能力弱、活动范围小的动物，而标记重捕法适用于调查活动能力强、活动范围大的动物。3、T2噬菌体侵染细菌的实验步骤：分别用35S或32P标记噬菌体→噬菌体与大肠杆菌混合培养→噬菌体侵染未被标记的细菌→在搅拌器中搅拌，然后离心，检测上清液和沉淀物中的放射性物质。【详解】A、脂质易融云丙酮等有机溶剂，可用丙酮从人的红细胞中提取脂质，A正确；B、蚜虫的个小，活动范围小，可以用样方法调查其种群密度，B错误；C、乳酸菌细胞呼吸的产物只有乳酸，而溴麝香草酚蓝水溶液检测的是CO2，C错误；D、通过搅拌促使亲代T2噬菌体的蛋白质外壳与细菌分离，D错误。故选A。【点睛】本题考查生物学实验的有关知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的使用方法、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。5、D【解析】

1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：；（2）在无氧条件下，反应式如下：。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。【详解】A、现代发酵技术的操作过程是在严格无菌的条件下进行的，传统发酵技术的操作过程并不是在严格无菌的条件下进行的，A错误；B、由于醋酸菌是嗜氧菌，因此果醋发酵液中，液面处的醋酸杆菌密度高于瓶底处的密度，B错误；C、制作腐乳时，接种3天后豆腐块表面会长满白色的毛霉菌丝，C错误；D、随着酒精发酵的进行，由于培养基中营养物质减少、代谢废物积累等原因，酵母菌数量减少，产生的二氧化碳减少，因此用带盖瓶子制作葡萄酒时，拧松瓶盖的间隔时间会延长，即拧松瓶盖的间隔时间不一定相同，D正确。故选D。【点睛】本题考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验条件、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。6、B【解析】

1、5g菠菜叶需要去掉茎脉，剪碎，然后放入研钵中，加入无水乙醇、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨；2、用毛细管吸少量滤液，沿铅笔线处小心均匀地画出一条滤液细线，待晾干后再重复2-3次；3、画好细线的滤纸条不能浸入到层析液中，防止色素溶解于层析液中。【详解】A、将5g菠菜叶需要去掉茎脉，剪碎，然后放入研钵中，加入无水乙醇、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨，A错误；B、将预备好的滤纸条一端剪去两角，在距这一端1cm处用铅笔画一条横线，B正确；C、用毛细管吸少量滤液，沿铅笔线处小心均匀地画出一条滤液细线，并重复2-3次，每次等上一次干燥以后再重复画，C错误；D、把画好细线的滤纸条插入层析液中，滤液细线不能触及层析液，D错误。故选B。【点睛】本题考查叶绿素的提取和分离，考查的是实验操作的步骤，这类习题的特点是操作性非常强，所以这类习题的解答在于平时的功夫，平时应该坚持进行是实验的操作，才会记忆的牢固。7、C【解析】

根据题意和图表分析可知：油菜新品系种子颜色由一对基因A/a控制，并受另一对基因R/r影响，F1自交所得F2的表现型及比例为产黑色种子植株：产黄色种子植株=3：13，是9：3：3：1的变式，所以其遗传遵循基因的自由组合定律。【详解】A、由实验一可判断种子颜色性状中黄色对黑色为隐性，A正确；B、由实验二的F1自交所得F2的表现型及比例为产黑色种子植株：产黄色种子植株=3：13，可判断F1黄色种子植株的基因型为AaRr；子代黑色种子植株基因型为A_rr，黄色种子植株基因型为A_R_、aaR_、aarr，可判断当R基因存在时，抑制A基因的表达，B正确；C、实验一中，由于F1全为产黑色种子植株，则乙黄色种子植株的基因型为aarr，C错误；D、实验二中，由于F1全为产黄色种子植株（AaRr），则丙黄色种子植株的基因型为AARR；F2中产黄色种子植株中纯合子的基因型为AARR、aaRR、aarr，占3/13，所以F2代产黄色种子植株中杂合子的比例为1−3/13＝10/13，D正确。故选C。【点睛】本题考查基因自由组合定律的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。8、C【解析】

判断遗传方式的口诀“无中生有为隐性，隐性遗传看女病，女病父正（或子正）非伴性；有中生无为显性，显性遗传看男病，男病母正（或女正）非伴性”。细胞质遗传的特点是母病所有子女均病。【详解】ABC、若为常染色体显性遗传或隐性遗传，男性患者将致病基因传递给子代的概率与女性患者将致病基因传递给子代的概率相同，而题图中只要是母亲为患者，其所有子女均为患者，而只要是父亲患病，母亲正常，其子女均正常，可判断该病最可能的遗传方式为细胞质遗传，AB错误；C正确；D、若为伴X染色体隐性遗传，则女儿患病，其父亲应为患者，而题图中患病女儿的父亲均正常，所以可判断该病的遗传方式不是伴X隐性遗传病，D错误。故选C。二、非选择题9、随机取样水平第三和第四营养级×100%630【解析】

1、群落的水平结构是指水平方向上地形变化、土壤湿度、光照变化等造成群落中各种群在水平状态下的格局或片状分布。2、能量传递效率=下一营养级的同化量/上一营养级的同化量×100%。【详解】（1）调查植物的丰富度和种群密度采用样方法，要注意随机取样（降低取样误差）。（2）由于低潮带、高潮带和超高潮带的土壤湿度不同，因此应种植不同特性的植物，这主要体现了种群的水平结构。（3）图中沙氏变色蜥在不同的食物链中所处营养级不同，它在食物网中所处的营养级为第三和第四营养级。图中第一营养级为樟毛等植物，固定的能量为a，第二营养级为小型飞行草食动物（b）、大型飞行草食动物（d）、地面草食动物（e），因此能量从第一营养级到第二营养级的传递效率是×100%。（4）图示为种群增长速率随时间的变化，第10年时种群增长速率最大，此时对应种群数量S型增长曲线的K/2点，该种群在此环境中的容纳量（K值）为315×2=630只。【点睛】本题考查了群落的结构、生态系统的功能等相关知识，意在考查考生从题目所给的图形中获取有效信息的能力。10、葡萄糖和水无氧呼吸强度大于有氧呼吸强度松土可以促进根的有氧呼吸，有利于根吸收矿质离子，促进根系的生长，进而促进植株生长由于松土促进了土壤微生物的有氧呼吸，增加了二氧化碳的分解和排放，从而使温室效应变得更加严重【解析】

1、有氧呼吸总反应方程式：6O2+C6H12O6+6H2O6CO2+12H2O+能量。无氧呼吸的反应式为：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量；有氧呼吸可以分为三个阶段：第一阶段：在细胞质的基质中。反应式：C6H12O6（葡萄糖）2C3H4O3（丙酮酸）+4[H]+少量能量（2ATP）；第二阶段：在线粒体基质中进行。反应式：2C3H4O3（丙酮酸）+6H2O20[H]+6CO2+少量能量（2ATP）；第三阶段：在线粒体的内膜上。反应式：24[H]+6O212H2O+大量能量（34ATP）；2、用透气的纱布包扎伤口，可抑制厌氧菌的繁殖，种子储藏时要降低自由水含量，进而使细胞呼吸减弱，以减少有机物的消耗，而蔬菜、水果的储存要保持适当水分。松土可以提高土壤中氧气的含量，有利于根细胞的有氧呼吸，从而为根吸收矿质离子提供更多的能量。【详解】（1）种子萌发过程中会进行有氧呼吸，由有氧呼吸反应方程式可知，产生的CO2中的氧元素来自葡萄糖和水。（2）由有氧呼吸和无氧呼吸反应方程式可知，当无氧呼吸和有氧呼吸相等时，CO2释放量与O2的吸收量之比为4：3，若CO2释放量比O2的吸收量多了3~4倍，说明无氧呼吸强度大于有氧呼吸强度。（3）松土可以促进根的有氧呼吸，有利于根吸收矿质离子，促进根系的生长，进而促进植株生长。由于松土促进了土壤微生物的有氧呼吸，增加了二氧化碳的分解和排放，从而使温室效应和全球气候变暖问题变得更加严重。此外，农田松土易造成水土流失，还增加了农业生产的成本。为此，农业生产上应当提倡免耕法。【点睛】本题考查呼吸作用过程及其在生产生活中的应用，掌握相关知识，结合题意答题。11、氨（或NH3）以尿素为唯一氮源异养妨碍蒸汽流通稀释涂布平板法因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目酚红指示剂升高【解析】

1、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。2、培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，以尿素作为氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。【详解】（1）尿素是一种重要的农家肥，但尿素不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨后，才能被植物利用。（2）为筛选出分解尿素的细菌，在配制培养基时应选择以尿素作为唯一氮源。分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，但可用葡萄糖作为碳源，由此推测分解尿素的细菌是异养型生物。将装有培养基的灭菌包装入高压蒸汽灭菌锅时，注意不要装得太挤，以免因影响蒸汽流通而影响灭菌的效果。（3）需要对菌落进行计数时，需要采用的接种方法是稀释涂布平板法。菌落的培养一般每隔24h统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养后，若pH升高，出现红色就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。【点睛】本题考查尿素分解菌的分离和培养，要求考生识记培养基的成分及种类；识记分离微生物的两种常用方法；识记培养基选择分解尿素的微生物的原理，能结合所学的知识准确答题。12、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：