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文档简介
山东省山师附中2025届高三第二次诊断性检测生物试卷注意事项1.考试结束后,请将本试卷和答题卡一并交回.2.答题前,请务必将自己的姓名、准考证号用0.5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置.3.请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符.4.作答选择题,必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑;如需改动,请用橡皮擦干净后,再选涂其他答案.作答非选择题,必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答,在其他位置作答一律无效.5.如需作图,须用2B铅笔绘、写清楚,线条、符号等须加黑、加粗.一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1.下列图中的a.b.c分别表示某捕食链中的第一、二、三营养级,每个营养级不同物种个体数量如A图所示(图中每一柱条代表一个物种)。经过一段时间后,各营养级生物的数量变化如B图所示。有关叙述正确的是A.图中的a、b、c代表的所有生物,共同组成一个生物群落B.图中a营养级各种生物之间的紧密联系,不具有竞争关系C.图中所示各营养级生物的数量有较大变化,但物种的丰富度基本未变D.图中c营养级的生物个体数量的变化,是因为他们获得的能量最多2.新型冠状病毒是一类单链+RNA病毒,其自身RNA能直接作为模板合成蛋白质,复制时,以该+RNA为模板复制出-RNA,然后再以-RNA作模板合成若干子代+RNA。以下说法正确的是()A.新型冠状病毒的生命活动主要由其RNA分子承担B.新型冠状病毒的增殖过程中只存在两种碱基配对方式C.dATP是新型冠状病毒遗传物质自我复制的原料之一D.新型冠状病毒依赖于宿主细胞而存活,属于生态系统中的分解者3.大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌,在一定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准,常用滤膜法测定,其操作流程如图。大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝(EMB培养基的指示剂)反应,菌落呈黑色。下列对实验操作的分析,错误的是()A.测定前,滤杯、滤膜和滤瓶均可用干热灭菌法灭菌处理B.过滤操作要在酒精灯火焰旁进行,防止杂菌污染C.将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上,完成大肠杆菌的接种操作D.EMB培养基属于选择培养基,只有大肠杆菌能正常生长并形成黑色菌落4.下图是“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验,下列叙述正确的是()A.1号与2号对照,说明加热能提高酶的活性B.1号与4号对照,可以验证酶具有高效性C.3号和4号装置应置于90°C水浴中进行D.pH、温度等是3号与4号的无关变量5.下列有关抗霾措施的叙述中,不恰当的是A.植树造林、种花种草能吸附尘土,以缓解霾的发生B.网络搜索信息显示:吃青菜能防止雾霾中毒,该措施可大力推广C.转变生活方式,提倡低碳生活、绿色出行,可减少污染物的排放D.转变生产方式,尽量使用太阳能等清洁能源,可减少污染气体的排放6.下列关于人体内环境及其稳态的叙述中正确的是A.内环境是人体细胞代谢的主要场所B.组织液和血浆成分相似,只是组织液中蛋白质含量相对较高C.肺泡中的02进入组织细胞参与有氧呼吸,共通过11层生物膜D.内环境稳态就是内环境的渗透压、温度和PH等保持不变7.果蝇的体色、翅型、眼色分别受一对等位基因控制。用一只灰身长翅红眼雌果蝇与一只黑身长翅白眼雄果蝇杂交,子代表现型及比例如下表所示。已知灰身、红眼为显性,下列分析错误的是()灰身∶黑身红眼∶白眼长翅∶残翅雌果蝇1∶11∶13∶1雄果蝇1∶11∶13∶1A.果蝇体内控制体色的相关基因一定位于常染色体上B.亲本果蝇有关翅型的基因型相同,均为杂合子C.根据杂交结果不能确定体色与眼色基因是否独立遗传D.子代白眼雌果蝇与红眼雄果蝇杂交可确定眼色遗传方式8.(10分)图表示细胞中出现的异常mRNA被SURF复合物识别而发生降解的过程,该过程被称为NMD作用,能阻止有害异常蛋白的产生(AUG、UAG分别表示起始密码子和终止密码子),图中异常mRNA与正常mRNA长度相同。据图分析,下列相关叙述正确的是()A.SURF能识别所有mRNA的终止密码子B.异常mRNA产生的原因是发生了碱基增添或缺失C.异常mRNA由突变基因转录,其降解产物为脱氧核苷酸D.NMD作用失效,细胞内会产生肽链较短的异常蛋白质二、非选择题9.(10分)如图1是人体某种调节方式的示意图;图2为当人体受到感染时,免疫细胞会释放促炎因子来清除病原体。若促炎因子过量会导致正常组织损伤,如类风湿性关节炎。正常人体中会通过“炎症反射”以防止促炎因子的过量产生,其部分作用机理如图2所示,数字表示结构(④为巨噬细胞),字母表示物质。请据图回答问题:(1)图1中A细胞产生的C物质通过图示途径,最终作用于B细胞,体现激素调节具有______________、_____________特点。(2)若图1中A细胞是某糖尿病患者的胰岛B细胞且功能正常,胰岛B细胞具体生活的内环境是___________。在这位患者体内检测到含有抗胰岛素受体的抗体,则该人___________(填“能”或“不能”)通过注射胰岛素有效调节其血糖水平,该疾病从免疫学的角度分析属于_______________。(3)图1中若C物质是甲状腺激素,则直接作用于A细胞并促进其分泌的激素是_______________。(4)图2中促炎因子刺激神经元③,使其产生兴奋,此时膜内外的电位分布为________________。“炎症反射”的传出神经为_______________。(用图中编号表示)(5)图2中炎症反应时可能导致体温升高,下列能够增加机体散热的方式(多选)______A.骨骼肌颤栗B.立毛肌收缩C.皮肤血管舒张D.细胞代谢增强E.汗腺分泌汗液(6)据图2分析,下列关于“类风湿性关节炎”可能的发病机理推段不合理的是_________A.促炎因子含量过多B.受病毒感染激活了NP-KBC.促炎因子基因的转录过程加快D.A物质数量过多10.(14分)杂交水稻是我国对当代世界农业的巨大贡献,在实际种植过程中体现了巨大的杂种优势。(1)杂交水稻自交后代会产生性状分离,其原因是杂交水稻在减数分裂过程中发生了________的分离,导致其品质下降,因此不可直接留种。(2)传统的杂交水稻制种过程中,需要选择花粉败育的品种(不育系)作为母本,这样可以避免自花受粉。为了解决不育系的获得和保持问题,科研人员做了如下研究:①水稻的雄性可育是由N基因决定的,人工诱变处理野生型水稻,最终获得基因型为nn的雄性不育植株。让该植株与野生纯合水稻杂交,得到的F1代________(可育/不可育)。②为快速筛选可育种子与不育种子,科研人员将基因N、花粉败育基因M(只在配子中表达)、红色荧光蛋白基因R一起构建重组Ti质粒,可采用________法将其导入雄性不育植株(nn)细胞中,获得雄性可育杂合体转基因植株(已知N-M-R所在区段不发生交叉互换)。该植株自交得到的种子中红色荧光:无荧光=________。选择________种子种植自交,可继续获得不育类型。(3)科研人员尝试让杂交水稻通过无性繁殖产生种子,解决留种繁殖问题。①研究发现,来自卵细胞中B基因的表达是启动受精卵发育成胚胎的必要条件,机制如下图所示:据图分析,敲除精子中B基因后,则受精卵中来自卵细胞的B基因________。若让卵细胞中的B基因表达,该卵细胞可直接发育为________植株,因其不可育则不能留种繁殖。②科研人员发现敲除杂交水稻中控制减数分裂的R、P、O三个关键基因,利用MiMe技术使其卵原细胞以有丝分裂方式产生“卵细胞”,则获得的“卵细胞”与杂交水稻基因型________。③基于上述研究,请你设计杂交水稻保持杂种优势适宜留种繁殖的方案:________。11.(14分)基因工程目前已成为生物科学的核心技术,在农牧业、工业、医药卫生等方面有良好的应用前景。回答下列问题:(1)基因表达载体中的复制原点,本质上是一段富含A—T碱基对的DNA序列,它易与引物结合而成为复制起点的原理是____________。启动子与复制原点的化学本质____________(填“相同”或“不同”),启动子功能的含义主要是________________________。(2)利用PCR技术扩增目的基因,可在PCR扩增仪中进行的三步反应是____________。若在PCR扩增仪中加入模板DNA分子100个,则经过30次循环后,DNA分子数量将达到____________个。(3)植物基因工程技术主要用于提高农作物的抗逆能力,如抗虫性、抗病性等。我国的抗虫棉就是通过____________法导人抗虫基因____________基因培育成功的;抗病毒的转基因小麦是导入抗病毒基因培育的,使用最多的抗病毒基因有________________________。12.回答下列(一)(二)小题(一)回答下列与果酒和果醋的制作的有关问题:(1)葡萄酒是酵母菌在无氧条件下的发酵产物,即将__________氧化成乙醇,当培养液中乙醇的浓度超过_________时,酵母菌就会死亡。果醋则是醋杆菌在有氧条件下将____________氧化而来的。如能获得醋化醋杆菌的菌种,可先在液体培养基中培养繁殖。用300mL的锥形瓶并用___________振荡培养48小时后,再接种到发酵瓶中。(2)用葡萄汁制葡萄酒:发酵瓶装量不能超过________。开始时,酵母菌的____________会使发酵瓶出现负压,若这种负压情况持续3天以上,必须加入___________,使发酵尽快发生。(二)某研究小组欲利用抗病毒基因,通过农杆菌转化法培育抗病毒玫瑰。图1和图2分别表示出了抗病毒基因和农杆菌Ti质粒的限制性核酸内切酶的识别位点和抗生素抗性基因(PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ表示限制性核酸内切酶切割位点;amp为氨苄青霉素抗性基因,tet为四环素抗性基因)。请回答:(1)为获得大量抗病毒基因,且保证形成重组质粒时,目的基因以唯一方向接入,可选用________________________________分别切割目的基因和Ti质粒,再用DNA连接酶连接,形成重组DNA分子,再与经过______________处理的_________(A.有amp和tetB.有amp,无tetC.无amp,有tetD.无amp和tet)农杆菌液混合,使重组DNA进入农杆菌。再利用农杆菌转入培养的玫瑰细胞,使目的基因导入玫瑰细胞中。(2)将含有导入了目的基因的玫瑰细胞的试管放在摇床上,进行____________________获得胚性细胞,进而培育成抗虫玫瑰。(3)这种借助基因工程方法,将外源基因导入受体细胞,再通过这些转基因细胞进行培养,获得具有特定性状的新植株的技术就是______________。(4)当前多地过度开发旅游造成生态环境的破坏,为减缓生态环境的破坏,可发展_______工程,并在旅游区种植抗虫玫瑰,可有效降低农药对环境的污染,并获得较佳的经济效益、社会效益和________________。
参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、C【解析】
A、生物群落应包括此区域的全部生物,A错误;
B、同一营养级不同种生物间有竞争关系,B错误;
C、丰富度是指生物的种类数,从图中可知,各营养级生物的数量有较大变化,生物种类没有变化,C正确;
D、最高营养级生物获得的能量最少,第三营养级的生物个体数量的变化,可能是第二营养级生物数量变化的原因,D错误。2、B【解析】
病毒没有细胞结构,不能独立生活,必须寄生在生物的活细胞内,靠寄主活细胞内的营养物质维持生活,因此病毒不属于生命系统结构层次。【详解】A、新型冠状病毒的生命活动主要由其蛋白质分子承担,A错误;B、新型冠状病毒增殖过程中,以该+RNA为模板复制出-RNA,然后再以-RNA作模板合成若干子代+RNA,以其自身RNA作为模板合成蛋白质,因此只存在A-U、G-C两种碱基配对方式,B正确;C、dATP作为DNA复制的原料,新型冠状病毒遗传物质是RNA,C错误;D、新型冠状病毒没有细胞结构,不属于生命系统的结构层次,不属于生态系统的成分,D错误。故选B。【点睛】本题以新型冠状病毒为背景,考查在识记病毒相关知识的基础上,结合题干信息、解决问题的能力。3、D【解析】
大肠杆菌的代谢能与伊红美蓝(EMB培养基的指示剂)反应,菌落呈黑色,因此可以制备EMB培养基来鉴别大肠杆菌。在实验室进行微生物培养的时候都需要进行严格的无菌操作,尽量减少杂菌的污染。【详解】A、干热灭菌法适用于对滤杯、滤膜和滤瓶进行灭菌,防止杂菌的污染,A正确;B、在酒精灯火焰附近操作可以减少空气中的杂菌污染,B正确;C、由于过滤完后细菌粘附在滤膜上,将滤膜紧贴在EMB培养基上可以将粘附的菌种接种在培养基上,C正确;D、EMB培养基属于鉴别培养基,没有选择作用,D错误;故选D。4、D【解析】
1.实验组:经过处理的组是实验组;对照组:未经过处理的组是对照组。2.变量:实验过程中可以变化的因素称为变量。自变量:想研究且可人为改变的变量称为自变量;因变量:随着自变量的变化而变化的变量称为因变量;无关变量:在实验中,除了自变量外,实验过程中存在一些可变因素,能对实验结果造成影响,这些变量称为无关变量。自变量是可以人为直接改变或施加的变量,因变量是随自变量变化而变化的量,只能观察或测量获得。要注意无关变量应该相同且适宜,实验设计时要注意单一变量原则和对照原则。3.本实验中,分组对比,自变量可以是温度(1和2)、催化剂的种类(3和4),因变量是过氧化氢的分解速度,通过气泡产生的速度体现出来,无关变量有过氧化氢的量、酶的用量等。【详解】A、加热能使过氧化氢分子从常态转变成容易反应的活跃状态,不是降低反应的活化能,A错误;B、分析题图实验可知,1号与4号的单一变量是有无加催化剂,说明酶具有催化作用,B错误;C、在90℃水浴中过氧化氢会分解产生氧气,且温度过高会影响酶的活性,故组别3号和4号实验不能置于90℃水浴中进行,C错误;D、组别3号与4号的单一变量是催化剂的种类,pH、温度是无关变量,D正确。故选D。5、B【解析】
空气污染的途径主要有两个:有害气体和粉尘。有害气体主要有一氧化碳、二氧化硫、二氧化氮等气体;粉尘主要是固体小颗粒,如地面粉尘、燃煤排放的粉尘、沙尘暴等。雾霾天气是由于空气不流动和受到污染,空气中悬浮大量的液滴和小颗粒物形成的。【详解】A、植树造林、种花种草能吸附尘土,以缓解霾的发生,A正确;B、吃青菜确实对身体有利,但是否能抗雾霾还没有定论,B错误;C、转变生活方式,提倡低碳生活、绿色出行,可减少污染物的排放,这可减缓雾霾的发生,C正确;D、转变生产方式,尽量使用太阳能等清洁能源,可减少污染气体的排放,D正确。故选B。6、C【解析】
由细胞外液构成的液体环境叫做内环境。内环境的组成成分和理化性质都处于动态平衡中。【详解】内环境是细胞与外界环境进行物质交换的媒介,人体细胞代谢的主要场所是细胞质基质。A错误。组织液和血浆成分相似,只是血浆中蛋白质含量相对较高,而组织液中蛋白质含量较少。B错误。肺泡中的02进入组织细胞参与有氧呼吸,经过肺泡壁细胞:两层膜;进入血浆通过血管壁细胞:两层膜;进出红细胞,两层膜;出血浆通过血管壁细胞:两层膜;进入组织细胞:一层膜;进入线粒体,两层膜,共十一层。C正确。内环境稳态指内环境的渗透压、温度和PH等理化性质及组成成分相对稳定。D错误。7、A【解析】
分析表格:灰身、长翅、红眼雌果蝇与黑身、长翅、白眼雄果蝇杂交,子代雌雄中均出现灰身:黑身=1:1,红眼:白眼=1:1,长翅:残翅=3:1,说明长翅为显性性状,残翅为隐性性状,同时体色与眼色子代表现型比例相同,这两对等位基因可能位于同一对染色体上,也可能位于两对同源染色体上,而体色与眼色子代表现型比例又与翅型表现型比例不同,说明控制体色与眼色的基因与控制翅型的基因遵循基因的自由组合定律。【详解】A、灰身雌果蝇和黑身雄果蝇杂交,后代雌性和雄性中均出现灰身和黑身比例1:1,假设位于X染色体上,则灰色对黑色为显性,后代雌性和雄性中也会出现灰身和黑身1:1,A错误;B、由于长翅:残翅=3:1且雌雄个体表现型及比例相同,说明残翅为隐性性状,控制翅长的基因位于常染色体上,故亲本果蝇有关翅型的基因型相同,且亲本基因型只能是杂合子,B正确;C、杂交后代体色与眼色在雌雄中表现型比例相同,说明这两对等位基因可能位于同一对染色体上,也可能位于两对同源染色体上,不能确定体色与眼色基因是否独立遗传,C正确;D、红眼雌果蝇和白眼雄果蝇杂交,后代雌性和雄性中均出现红眼和白眼比例为1:1,假设位于X染色体上,则红眼对白眼为显性,杂交后代雌性全为红眼,雄性全为白眼;假设位于常染色体上,白眼雌果蝇与红眼雄果蝇杂交雌雄后代表现型一致,故子代白眼雌果蝇与红眼雄果蝇杂交可确定眼色遗传方式,D正确。故选A。【点睛】本题考查了基因分离定律和自由组合定律的应用,要求考生能够掌握遗传定律的应用范围,能够设计相关实验判断染色体存在的位置,掌握遗传定律的实质,具有一定的难度。8、D【解析】
据图分析:图中异常mRNA的中间部位出现一个终止密码子,该密码子能够阻断该mRNA的继续翻译,从而抑制该突变基因的表达。【详解】A.由图示可知,SURF只能识别异常mRNA的终止密码子,A错误;
B.异常mRNA与正常mRNA长度相同,则异常mRNA产生的原因是转录它的基因发生碱基对替换造成的,B错误;
B.异常mRNA由突变基因转录,其降解产物为核糖核苷酸,C错误;
D.NMD作用失效,细胞内会产生肽链较短的异常蛋白质,D正确。
故选D。二、非选择题9、通过体液运输作用于靶器官、靶细胞(两空顺序可颠倒)组织液不能自身免疫病促甲状腺激素内正外负①CED【解析】
分析图1可知:细胞A分泌化学物质C,通过血液运输,作用于靶细胞B上的受体。分析图2可知:巨噬细胞能够合成和分泌促促炎因子,合成促炎因子的过程受到NP-KB的调节作用,其中当促炎因子释放过多时刺激神经元③产生兴奋,导致钠离子内流,产生动作电位,兴奋经过神经中枢的综合分析后经过神经元①传递,释放神经递质作用于巨噬细胞,抑制NP-KB的活性,抑制促炎因子的转录过程,从而抑制促炎因子的合成,从而调节促炎因子的合成;当细胞发生炎症时,由于感染发生,感染会激活NP-KB,促进促炎因子的转录过程,从而促进促炎因子的合成,这样通过以上调节保证细胞释放的促炎因子含量正常。【详解】(1)激素调节的特点有:通过体液运输、微量高效性、作用于靶器官、靶细胞。根据图1可知,图1中A细胞产生的C物质通过体液运输,最后作用于B细胞,体现了激素调节的通过体液运输和作用于靶器官、靶细胞的特点。(2)胰岛B细胞直接生活的内环境是组织液,在这位患者体内检测到含有抗胰岛素受体的抗体,则该人患有自身免疫病,导致产生的抗体与胰岛素受体结合而使得机体的胰岛素无法与受体结合引起血糖浓度升高,因此不能通过注射胰岛素有效调节其血糖水平。(3)图1中若C物质是甲状腺激素,则A细胞为甲状腺细胞,那么直接作用于A细胞的激素是由垂体分泌的促甲状腺激素。(4)神经元③产生兴奋时,钠离子内流,此时膜内外的电位分布为内正外负。识图分析可知,“炎症反射”的传出神经为图中的①神经元。(5)体温升高时能够增加机体散热的方式为:毛细血管舒张,使血流量增加,促进散热;汗腺分泌汗液增加,促进散热。而A骨骼肌颤栗、B立毛肌收缩、D细胞代谢增强是促进产热的方式。综上所述,C、E正确,A、B、D错误。故选CE。(6)A、根据题意可知,若促炎因子过量会导致正常组织损伤,如类风湿性关节炎的发生,A不符合题意;B、根据图2的分析可知,受病毒感染激活了NP-KB后会促进促炎因子的合成,导致其可能过量,引起类风湿性关节炎的发生,B不符合题意;C、根据图2的分析可知,若促炎因子基因的转录过程加快,会促进促炎因子的合成过程,导致促炎因子的过量,引起类风湿性关节炎的发生,C不符合题意;D、分析图2可知,A物质是巨噬细胞膜上①神经元释放的神经递质的受体,如果A物质过多,使得神经递质与A物质结合,抑制NP-KB的活性,使得促炎因子的转录减慢,不会引起促炎因子含量过多,D符合题意。故选D。【点睛】本题考查神经、体液调节的知识点,要求学生掌握神经调节中兴奋的产生机理和在神经元之间的传递过程和特点,能够识别反射弧的组成,理解激素调节的特点,把握甲状腺激素的分级调节过程。正确识图分析图1,判断图中的生理过程及其特点,分析图2中的“炎症反射”的反射弧及其调节过程,利用所学的知识点解决问题。10、等位基因可育农杆菌转化(基因枪)1:1红色荧光不能表达单倍体一致敲除杂交水稻中控制减数分裂的三个关键基因,同时让该水稻卵细胞中B基因表达(B蛋白),以此获得种子【解析】
基因分离定律和自由组合定律的实质:进行有性生殖的生物在进行减数分裂产生配子的过程中,位于同源染色体上的等位基因随同源染色体分离而分离,位于非同源染色体上的非等位基因进行自由组合。杂交育种是将父母本杂交,形成不同的遗传多样性,再通过对杂交后代的筛选,获得具有父母本优良性状,且不带有父母本中不良性状的新品种的育种方法。【详解】(1)杂交育种过程中,后代会发生性状分离的根本原因是减数分裂过程中等位基因发生了分离。(2)①已知水稻的雄性可育是由N基因决定的,人工诱变处理野生型水稻,最终获得基因型为nn的雄性不育植株,让该植株与野生纯合水稻NN杂交获得的后代基因型为Nn,是可育的。②由于雄性不育植株无法形成花粉管,因此将重组Ti质粒导入雄性不育植株(nn)细胞可以用农杆菌转化法或基因枪法,而不能使用花粉管通道法。由于与R基因连锁的基因M导致花粉败育,但是不影响卵细胞的形成,因此该植株自交得到的种子中红色荧光:无荧光=1:1;选择红色荧光种子种植自交,可继续获得不育类型。(3)①据图分析,精子中的B基因可以表达,而卵细胞中的B基因不能表达,因此若敲除精子中B基因,则受精卵中只有来自于卵细胞中的B基因,是不能表达的;已知来自卵细胞中B基因的表达是启动受精卵发育成胚胎的必要条件,图中显示受精卵中卵细胞的B基因表达了,所以受精卵发育成胚胎了,因此若让卵细胞中的B基因表达,该卵细胞可以直接发育为个体,为单倍体,是高度不孕的。②有丝分裂产生的子细胞基因型不变,因此卵原细胞以有丝分裂方式产生“卵细胞”,其基因型与杂交水稻的基因型相同。③结合以上分析可知,要求杂交水稻保持杂种优势适宜留种繁殖,则应该让其不能进行减数分裂,只能进行有丝分裂,且要让卵细胞中的B基因表达,即敲除杂交水稻中控制减数分裂的三个关键基因,同时让该水稻卵细胞中B基因表达(B蛋白),以此获得种子。【点睛】解答本题的关键是掌握基因分离定律的实质、基因工程的相关知识点,明确雄性不育的本质,分析重组质粒导入植物细胞的方法以及杂交后代的性状分离比。11、A-T碱基对多,相对氢键少,DNA易解旋相同启动子驱动基因转录成mRNA高温变性,低温退火、中温延伸100×230花粉管通道Bt毒蛋白病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因【解析】
基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为变性、复性、延伸三步。在循环之前,常需要进行一次预变性,以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。PCR过程为:变性,当温度上升到90℃以上时,氢键断裂,双链DNA解旋为单链。复性,当温度降低到50℃左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。延伸,温度上升到72℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。【详解】(1)基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、标记基因和复制原点等,所以复制原点和启动子化学本质相同,都是一段特定的DNA序列。已知复制原点中含A-T碱基对多,因此含氢键少,结构不稳定,易解旋,可做为复制的起点,而启动子是驱动基因转录成mRNA的。(2)PCR技术扩增目的基因包括三步反应:高温变性(氢键断裂)、低温退火(复性)形成氢键和中温延伸形成子链。PCR扩增仪可以自动调控温度,实现三步反应循环完成。PCR技术扩增目的基因的原理是DNA双链复制,结果使DNA呈指数增长,即2n(n为扩增循环的次数),所以100个DNA分子,30次循环,使DNA数量可达到100×230个。(3)植物基因工程培育抗虫抗病等转基因植物用到的抗虫基因有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因等,我国的抗虫棉就是利用花粉管通道法导入Bt毒蛋白基因培育的;抗病毒基因有病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因。【点睛】基
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