GHT 1081-2012 蜂胶中杨树胶的检测方法 反相高效液相色谱法

中华全国供销合作总社发布本标准按照GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写)的规则编写。本标准采用专利201010180675.0(申请号)。本标准由浙江大学提出。本标准由中华全国供销合作总社归口。1本文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，涉及木文件相关的专利申请(申请号：1蜂胶中杨树胶的检测方法反相高效液相色谱法本标准规定了蜂胶中是否含有杨树胶的反相高效液相色谱检测方法。本标准适用于蜂胶原料及蜂胶乙醇提取物中粉树胶的检道本标准在进样量为5pL时，水杨苷的最低检测限为1.3pg/m蜂胶原料中杨树胶的检出下限约为5%,蜂胶乙醇提取物中杨同胶的检出下限约为15%。2规范性引用文件下列文件对子本文件的应用是必不可少的。凡是违期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文GB/T66822708分析工验室用水起格和试验方法GB/T2L283+2009蜂胶3术语和定义下列术语和定义适用于木文蜂胶propolis乙醇萃取蜂胶后得到的物质杨树胶cxtractodPopulusbudslcavesorbarks杨树型蜂胶poplartypepropolis杨树胶特征性成分acharacteristiccomponentofpoplartreegum;CCP杨树胶中含有而蜂胶中不含有的相对分子质量为406的特征性成分。之一。24原理5试剂和材料5.4磷酸：分析纯。5.60.5%磷酸溶液：量取5mL.磷酸(5.4),用高纯水定容至1L.称取1g蜂胶乙醇提取物试样或2g蜂胶原料试样，用75%乙醇超声波提取30min,料液比为1:15(质量浓度),反复提取3次。合并滤液，离心过滤后旋转蒸发除去乙醇，然后用蒸馏水定容至38.2色谱条件柱温：30℃.8.3测定水杨苷标准品、杨树型蜂胶、杨树胶、掺5%杨树胶的蜂胶原料及掺15%杨树胶的蜂胶乙醇提取物的色谱图参见附录B.8.4结果计算V——试样最终定容体积，单位为毫升(mL);A——试样溶液对应的峰高或峰面积；m——样品质量，单位为克(g):A.水杨苷标准溶液对应的峰高或峰面积。将符合重复性要求的两个独立测定值的算术平均值作为测定结果(mg/g),保留两位有效数字。平行试验相对偏差不得超过2.0%,8.5结果判定本方法所检测水杨苷和CCP为杨树胶中含有而蜂胶中不含有的物质。如果待测样品中检测不到水杨苷或待测蜂胶乙酌提取物样品中水杨苷检测浓度小于0.25mg/g,或待测蜂胶原料样品中水杨苷检测浓度小于0.15mg/g,并且检测不到CCP,则该样品为未检出杨树胶的样品；如果待测蜂胶乙醇提取物样品中水杨苷检测浓度大于0.25mg/g,或待测蜂胶原料样品中水杨苷检测浓度大于0.15mg/g,无论检测到CCP与否，该样品判定为检出杨树胶的样品；如果待测样品中检测不到水杨甘，面检测到CCP的，则采用液相色谱串联质谱法作进一步验证(液相色谱、质谱检测条件参见附录C)。确定为时问乙腈%%05001556B.3杨树胶色谱图见图B.3.图B.3杨树胶色谱图B.4掺入5%杨树胶的蜂胶原料的色谱图见图B.4。图B.4掺入5%杨树胶的峰胶原料的色谱图B.5掺入15%杨树胶的蜂胶乙醇提取物的色谱图见图B.5.(资料性附录)液相