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农业部2122号公告—9—2014转基因植物及其产品成分检测耐除草剂玉米DAS-40278-9及其衍生品种定性PCR方法DetectionofgeneticallymodifiedplantsandderivedpI农业部2122号公告—9—20141农业部2122号公告—9—2014耐除草剂玉米DAS-40278-9及其衍生品种定性PCR方法本标准适用于转基因耐除草剂玉米DAS-40278-9及其衍生品种,以及制品中DAS-40278-9转化体农业部1485号公告—4—2010转基因植物及其产品成分检测DNA提取和纯化农业部1861号公告—3—2012转基因植物及其产品成分检测玉米内标准基因定性PCR方法农业部2031号公告—19—2013转基因植物及其产品成分检测抽样NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求2zSSHIb-1F:5′-CTCCCAATCCTTTGzSSIIb-2R:5′-TCGATTTCTCTCTTGDAS-40278-9-F:5'-CCATTCAGGAGACCTCDAS-40278-9-R:5′-CGAGCTTCAATCACT37.5.1.2.1每个试样PCR反应设置3次平行。终浓度水10×PCR缓冲液dNTPs混合溶液(各2.5mmol/L)总体积“—”表示体积不确定。如果PCR缓冲液中含有氯化镁,则不加氯化镁溶液。根据TagDNA聚合酶的浓度确定其体积,并相应调整水的体积,使反应体系总体积达到25.0μL。以非转基因玉米基因组DNA作为阴性对照;以转基因玉米DAS-40278-9质量分数为0.1%~农业部2122号公告—9—2014增片段是否为目的DNA片段,按照7.8和7.9的规定执行。A)进行比对,确定PCR扩增的DNA片段是否为目的DNA片段。大小与预期片段大小一致,而阴性对照中仅扩增出玉米内标准基因片段,8.2.1玉米内标准基因和DAS-40278-9转化体特异性序列均得到扩增,且扩增片段大小与预期片段特异性序列未得到扩增,或扩增片段大小与预期片段大小不一致,表明样品中未检测出DAS-40278-9本标准方法的检出限为1g/kg。5农业部2122号公告—9-20141CCATTCAGGAGACCTC61TTACGCCTCTCTAAGCGGCCAAACTTGCAGAAAACCGCC
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