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T/CVMA158—2024牛分枝杆菌抗体荧光偏振检测方法FluorescencepolarizationassayfordetectionofantibodiesagainstMycobacteriumbovis2024-5-8发布2024-5-8实施中国兽医协会发布I本文件起草单位:上海市动物疫病预防控制中心、山东生科尚仪生物技术有12规范性引用文件GB/T6682分析实验室用水规格和NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范振光,用荧光偏振仪检测待检血清的偏振光增加值即可判断血清中是否存在牛分枝杆5试剂和材料5.1试剂5.1.4样品稀释缓冲液配制方法见附录5.1.5结合物:用硫氰荧光素(FITC)标记牛分5.2材料25.2.196孔黑色平板微孔板。5.2.2移液器吸头。6仪器和设备8.4取180µL样品稀释缓冲液加入到98.7将96孔黑色平板微孔板置室温孵育2min~3min,置荧光偏振仪上读取最终偏振值。9结果判定FP=A-B(1)FP——对照或样品的偏振值,mP;当阳性对照的偏振值在120mP~250mP之间,阴性对照的偏振值在70mP~90mP之间时,方可进3△=FP-C..(2)△——样品的偏振值与阴性对照平均值的差值,mP;FP——对照或样品的偏振值,mP;C——阴性对照平均偏振值,mP。当被检样品△<10mP,样品判为阴性;10mP≤△≤20mP,样品判为可疑;△>20mP,样品可疑样品应重新检测两次。如果两次复检的结果△均小于10mP,则样品判为阴性;若两次重检
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