血小板制剂的制备及临床应用

关于血小板制剂的制备及临床应用1血小板制剂的种类和制备方法该选择哪种类型的血小板制剂（PLT）？为临床患者提供最好的治疗，目标一致，应用血小板的答案却不一样第2页,共55页，星期六，2024年，5月血小板减少血小板功能障碍血小板制剂浓缩血小板单采血小板血小板输注原则第3页,共55页，星期六，2024年，5月浓缩血小板制剂（1个成人治疗剂量）(≥2.0

1011)

成分分离机离心：BC或PRP法全血200ml（10单位）全血400ml（5单位）第4页,共55页，星期六，2024年，5月优点：从单个个体采集所得血小板的数量和质量均可得到保障可采集1-2个治疗剂量去除白细胞单采血小板第5页,共55页，星期六，2024年，5月1.1单采血小板制剂

背景：在1970年代，由采集的全血制备的血小板（wholeblood-derivedplatelets;WBDPs，或称为多人份手工分血小板制剂）血小板制剂保存，如温度、抗凝剂、塑料袋、pH维持、以及贮存摇动箱等第6页,共55页，星期六，2024年，5月在1980年代，机采单人份血小板制剂（single-donorplatelets;SDPs）可减少因白细胞混入所引起的同种异体免疫反应，减少了血小板输注无效的几率第7页,共55页，星期六，2024年，5月SDPs不仅可以常规性去除白细胞，还可从单一供者采集到超过一个成人治疗量所需的血小板数量在许多国家SDPs快速地替代了WBDPs

第8页,共55页，星期六，2024年，5月2004年，美国输血协会（AABB）标准5.1.5.1规定所有血小板制剂在输注前均应作细菌学检测美国食品和药品管理局（FDA）规则要求，混合性手工分血小板制剂（hWBDPs）应在混合后4小时内输注第9页,共55页，星期六，2024年，5月1.2手工分血小板制剂两种类型：离心后手工分和离心后机器分第10页,共55页，星期六，2024年，5月在美国等北美国家：hWBDPs的制备是采用富含血小板血浆（platelet-richplasma;PRP）法收集的血小板（PC）第11页,共55页，星期六，2024年，5月欧洲国家：采用白膜层（buffycoat;BC）法收集血小板，通过对全血重离心后分离出BC，再将BC轻离心分离出上层血浆第12页,共55页，星期六，2024年，5月PAS汇集BC-PC：对浓缩的PLT再加入的血小板添加液(Plateletadditivesolution;PAS)，按照一个治疗剂量混合多份即可第13页,共55页，星期六，2024年，5月国内：手工汇集浓缩血小板的制备，多采用北美模式，即采用血浆作为稀释剂保存血小板制备方法、质量标准和控制以及临床效果的评价第14页,共55页，星期六，2024年，5月对汇集的浓缩血小板是否采用白细胞过滤进行处理对细菌污染和保存等，影响了该项目在国内的开展第15页,共55页，星期六，2024年，5月2血小板制剂的保存和输注方式血小板制剂的常规保存方式为 22℃振摇 冰冻保存方式第16页,共55页，星期六，2024年，5月SDPs常规保存：5天，已有采用新型保存袋保存7天的成功报告，并需进行细菌学监测SDPs冰冻保存方式则可长期保存达2年之久，推荐冰冻血小板主要用于自体血小板的冻存第17页,共55页，星期六，2024年，5月冰冻保存：血小板制剂中加入6%二甲亚砜，−80°C冰冻保存，血小板回收率可达74

±

2

%，并产生5%的血小板微粒改良法：以6%处理后，去除含有二甲亚砜上清液，再−80°C冰冻保存，融化于0.9%生理盐水中可使血小板回收率达到94

±

2

%，血小板微粒达7%。30位志愿者的血小板其体内存活期为7天第18页,共55页，星期六，2024年，5月SDPs在5-7天内使用，美国FDA规定需进行细菌学检测。如果配以进行病原体灭活处理，甚至可保存达8天手工分混合浓缩血小板制剂的保存可在22℃常规保存，4-6小时；或在4℃保存PAS汇集BC-PC，保存时间甚至可达21天第19页,共55页，星期六，2024年，5月中国有关规定，血袋密封系统开封后不得超过24小时混合手工分血小板成一个治疗性剂量，可参考国外经验在4-6小时内输注（4小时为美国标准，6小时为欧洲标准）PAS汇集BC-PC，采用新的添加葡萄糖的PAS配方可保存血小板达7天第20页,共55页，星期六，2024年，5月3血小板制剂的临床应用评价3.1血小板制剂的用量分析美国，2004年大约有140万份SDPs和150万份hWBDPs用于医院；即170万成人治疗剂量的血小板应用于临床，分别为140万和25.6万治疗性剂量的SDPs和hWBDPs，比例为5.5：1第21页,共55页，星期六，2024年，5月欧洲14个国家，每年使用血小板数约130万份治疗量，其中有44.1%是PAS汇集BC-PC方式，7.2%是PRP法制备的血浆为介质的汇集PC，48.6%为SDPs方式第22页,共55页，星期六，2024年，5月欧洲国家中SDPs的使用比例约占全部使用量的一半，远低于美国的情况。中国，SDPs的用量逐年上升，已占临床应用血小板的绝大部分第23页,共55页，星期六，2024年，5月3.2血小板制剂的临床应用预防性血小板输注：渥太华大学医院，67%的血小板应用于血液肿瘤或骨髓移植患者，在这些患者中有78%的血小板输注为预防性输注；全院的血小板输注中预防性输注占52%明尼苏达大学医院，74%的血小板输注为预防出血而进行的可以认为血小板输注在大型医院多为预防性输注第24页,共55页，星期六，2024年，5月美国1991年评估，大于70%医院报告预防性输注是血小板输注的主要原因第25页,共55页，星期六，2024年，5月1960年代以前，因不能广泛输注血小板，白血病接受化疗的患者中常见的死亡原因为出血所至1962年报告，急性髓性白血病或急性淋巴细胞性白血病患者的出血与血小板计数呈相关性。血小板计数大于20

109/L的患者中较少发生严重出血预防性血小板输注阈值定为血小板计数等于或小于20

109/L第26页,共55页，星期六，2024年，5月1992年，Beutler对血小板输注阈值提出疑问，指出应采用更低的血小板输注阈值根据数学模型推测表明，血小板输注阈值从20

109/L降低为10

109/L，可减少14.5%的血小板用量第27页,共55页，星期六，2024年，5月1997年，渥太华大学医院比较了两组随机严格控制的20

109/L和10

109/L的血小板输注阈值，78位急性白血病患者，随机接受预防性单采血小板制剂治疗两组患者上肢出血瘀斑数目的改变未有明显差异第28页,共55页，星期六，2024年，5月2002年，159位接受造血干细胞移植的患者随机根据血小板计数等于或低于20

109/L和10

109/L分组进行预防性血小板输注患者的出血或出血严重程度在两组间均未有明显差异，也未见出血原因引起的患者死亡的差异第29页,共55页，星期六，2024年，5月2005年，166位异基因造血干细胞移植患者随机接受预防性血小板输注，血小板输注阈值定为10

109/L或30

109/L患者生存率、死亡和住院时间等方面没有差异第30页,共55页，星期六，2024年，5月在140位接受造血干细胞移植的患者中选择106位临床病情稳定的患者，并未进行血小板预防性输注，血小板输注仅在出现相关的出血症状时才进行结果发现仅有19%的患者出现轻度或中度出血；未见严重危及生命的出血。与传统的预防性输血模式相比，血小板使用量降低了近一半

第31页,共55页，星期六，2024年，5月PlateletConcentrates•Prophylactictopreventbleeding –Severethrombocytopenicpatients•Treatactivebleeding –PLT<5–10万/μL –PLTdysfunction第32页,共55页，星期六，2024年，5月PlateletConcentratesBiggestIssuesforTransfusionService 1.IncreasingNeed 2.Availability•Shortstoragetime(5days)•Sensitivitytolowdonations–Apheresis=donorrecruitment–“Pooledplatelets”:4-6wholeblood/pool第33页,共55页，星期六，2024年，5月Platelets•Prophylactictransfusions(>50%) –Severethrombocytopenia –Preventmajorbleeding –Clinicalresearch•Transfusionresponse•Transfusiontrigger•Transfusiondose第34页,共55页，星期六，2024年，5月TransfusionResponse:PlateletKineticscirculatinglifespan8-10days循环池60%-70%脾脏30%-40%NormalPlateletCounts10%-12%loss/day -80%senescence -20%endothelialintegrityest.7x109perday第35页,共55页，星期六，2024年，5月ImpactofSpleenonTransfusionResponseExpectedplateletrecovery=60%-65%Splenicpoolsize↔plateletrecovery循环池60%-70%脾脏30%-40%第36页,共55页，星期六，2024年，5月FactorsImpactingTransfusionResponse•Spleensize•PlateletDose –Totalnumberofplateletsinfused –Patientsize第37页,共55页，星期六，2024年，5月FactorsImpactingTransfusionResponse•Spleensize•PlateletDose•Patientpre-transfusionplateletcount•Clinicalfactors第38页,共55页，星期六，2024年，5月3.3血小板制剂的应用评价SDPs和hWBDPs在一份多中心临床试验报告中，比较两种制剂的有效性结果表明在多次接受血小板输注的患者中发生免疫性血小板输注无效的风险在两组患者中无差异，CCI（输注血小板后体内增加值）表明，PAS-BC-PC与SDPs的临床输注效果一致，贮存7天的PAS-BC-PC输注后血小板增加值令人满意

第39页,共55页，星期六，2024年，5月国内的研究报告表明，PRP-PC的质量指标与SDPs相似，但白细胞混入量明显超标第40页,共55页，星期六，2024年，5月混合性手工分浓缩血小板制剂的缺点与SDPs相比，手工分浓缩血小板制剂在制备过程中有三倍高的细菌污染机率；有至少2倍高的细菌培养阳性率绝大多数污染细菌为皮肤污染的细菌第41页,共55页，星期六，2024年，5月逻辑上推测，手工分浓缩血小板的制备和随后的混合更有利于在大的血液中心完成许多观点和争论将会随着时间的推移而逐渐清晰第42页,共55页，星期六，2024年，5月PlateletsTransfusionGuidelinesProphylactic:severethrombocytopenia•PLT<0.5-1万/μL –Stablepatient,nocoagulopathy•PLT<2万K/μL –Fever,infection,coagulopathy,heparin,minorbleeding•PLT<3万/μL –VOD（静脉闭塞病）,bleedingunresponsivetoPLT2-3万第43页,共55页，星期六，2024年，5月Platelet<5万/μL –Activebleedingorpriortoinvasiveprocedure•Includeslumbarpunctureinadults –Stable,sickinfant(<37weeks)Platelet<8万/μL –Anesthesiaguidelines –Epideralanesthesia第44页,共55页，星期六，2024年，5月Platelet>10万•ExtracorporealMembraneOxygenation(ECMO)体外膜肺氧合 –Adultsandchildren•Neurosurgery•+/-Opthamology/airwaysurgery•CardiacSurgery –CABG（冠脉搭桥术）withmicrovascularbleeding&nlcoagtests –Ventricularassistdeviceplacement(VAD)体外心室辅助装置

•Sickinfants(<37wksgestation,*↑riskICH)•Infant,bleeding,DICorothercoagulapathy第45页,共55页，星期六，2024年，5月NormalPlateletCount•Inheritedqualitativedefect(ex.Bernaud-Soulier)•FactorVInhibitor,activebleeding•Acquireddefect –Uremia,activebleeding(tertiarytherapy) –Antiplateletdrugs(ex) Aspirin(3days)CardiacDisease Clopidogrel(7days)Surgery,PCIstent GPIIb/IIIainhibitorsIntracranialhemorrhage第46页,共55页，星期六，2024年，5月RelativeContraindications:PlateletsProphylacticTransfusion(absencebleeding)•Thromboticthrombocytopeniapurpura(TTP)•Hemolyticuremicsyndrome•Heparin-associatedthrombocytopenia•Duringcardiopulmonarybypass•Immunethrombocytopenia –Immunethrombocytopenicpurpura(ITP) –Alloimmunethrombocytopenia(PTP) –SevereHLA-alloimmunization第47页,共55页，星期六，2024年，5月Platelets:CommonMistakes•Over-ordering(surgeons)•Priorsurgical/invasiveprocedure –Administeringtoosoon(exnightbefore) –Splenomegaly（脾肿大）•Immunethrombocytopenia•Nopost-transfusionmonitoring•Administrationwithin2-4hrsamphotericin（两性霉素）第48页,共55页，星期六，2024年，5月PlateletAdministration:Products•Whole-bloodderived(RANDOMS,RDP) –Plateletrichplasma(USA) –Buffycoat(Europe,Canada) •StandardRDP=50mL/unit •PrepooledRDP=250mL/unit•Singledonorapheresis(SDP) –Singleplateletdonor •HLA-selected •Crossmatched第49页,共55页，星期六，2024年，5月WholeBloodversusApheresisWhole-BloodDerived•Multipledonors(RDP)•50-70mLunit• ~8x1010plts/RDP -4x1011plts/pool↑0.5-1万/μLperRDP –2-5万/μLperpoolApheresisPlatelets•Singledonor(SDP)•300-350mLunit•>3x1011plts/SDP -=5unitsRDP -HLA&crossmatchedPLTs•↑2.5-5.0万/μLperSDP第50页,共55页，星期六，2024年，5月Platelets:AdministrationABO:ABOcompatiblepreferredABOidentical>>ABOnonidenticalDose:Adults:1SDPor4-5unitspooledIfshortage0.5SDPor3unitspooledChildren:0.3units/kgor10-15cc/kgRate:10cc/min(1unit/30mininadult)第51页,共55页，星期六，2024年，5月Post-TransfusionMonitoring1.CorrectedCountIncrement(CCI)2.PercentPlateletRecovery(PPR)•InvivoMeasurementPlateletSurvival•PlateletDose –NumberofPlateletsTransfused –SizeofPatient•Spleensize(PPR)•Requiresa1-4hourpost-plateletcount第52页,共55页，星期六，2024年，5月CorrectedC