罗氏Cobase602检测AFP的性能验证

罗氏Cobase602检测AFP的性能验证

摘要：目的对罗氏Cobase602电化学发光免疫分析仪检测AFP（甲胎蛋白）的分析性能进行验证。方法对AFP的精密度、准确度、测量线性范围和参考区间进行性能验证实验。结果AFP的批内精密度高低两种浓度的CV分别为2.74%和4.92%，批间精密度高低两种浓度的CV分别为1.46%和1.93%；6份室间质控品的检测结果与靶值的偏倚在-0.46%~1.53%之间；测量线性范围与厂家提供的范围相符合；AFP的测量数值100%在厂家提供的参考区间内。结论罗氏Cobase602检测AFP的方法学性能良好，检验结果准确可靠，能够满足临床检测的要求。关键词：电化学发光免疫分析仪；性能验证；AFP近年来，检验项目的方法学性能评价成为了目前检验医学界讨论和关注的热点[1-2]。本科室于2017年引进了德国罗氏Cobase602电化学发光免疫分析仪。罗氏Cobase602电化学发光免疫分析仪主要用于肿瘤标志物、激素、传染病以及心肌损伤、贫血等80多种项目的检测，采用了当今国际上先进的电化学发光免疫分析技术，具有快速、简便、自动化程度高等特点。按照医学实验室质量和能力认可准则（ISO15189文件）对实验室质量的要求，实验室必须对仪器的技术性能进行相关的评价，验证的性能指标主要包括精密度、准确度、测量线性范围和参考区间等[3]。现就我科室罗氏CobasE602电化学发光免疫分析仪测定AFP（甲胎蛋白）进行性能验证，报道如下。1材料与方法1.1.1样本来源符合要求的本院（镇江市第三人民医院）门诊和住院送检标本。按照WS/T420—2013要求[4]，标本均为新鲜标本，且无溶血、无脂血。1.1.2仪器罗氏Cobase602电化学发光免疫分析仪。1.1.3试剂检测试剂、校准品及质控品均为罗氏诊断公司生产的配套产品。1.2方法1.2.1精密度评价实验批内精密度实验选择与仪器配套的两个水平的质控品TM1（高值，批号：171132），TM2（低值，批号171133），连续重复测定20次，分别计算其平均值（）、标准差（SD）和变异系数（CV）。批间精密度实验将TM1和TM2两个浓度的质控品每天测定1次，连续测定20天，分别计算两组均值（）、批间标准差（SD）和变异系数（CV）。1.2.2准确度评价实验参加2017年6月江苏省临检中心组织的室间质量评价（EQA）活动，将临检中心发放的肿瘤标志室间质评物（6个样本）进行检测。将检测结果与临检中心提供的质评物靶值进行比对，计算检测值与靶值的相对偏倚（%）。1.2.3测量线性范围评价实验参照NCCISEP6-A[5]评价方案，选取临床患者AFP高值血清（H）和低值血清（L）各一份，血清样本浓度接近仪器给定的测量线性范围，将H和L按5H，4H+L，3H+2L，2H+3L，H+4L及5L的比例混合成6个浓度样品，每份样品重复测定3次，计算其均值。以已知分析物浓度为X轴，测定均值为Y轴，用直线回归统计方法对数据进行处理，得直线回归方程：Y=bX+a。1.2.4参考区间评价实验参考NCCLSC28-A2[6]文件要求进行验证。选择20份体检合格的健康人体标本，在罗氏E602上进行测定，对结果进行统计并与仪器说明书提供的参考区间进行比较。若至少有95%的测量数据在推荐的参考区间内，则验证实验通过；否则应进行参考区间的确立实验。1.2.5统计学分析采用Excel软件进行统计分析。

结果2.1精密度评价对于AFPTM1、TM2两个浓度的精密度评价实验，批内精密度评价，TM1的均值为1.97ng/mL，S为0.054，CV为2.74%；TM2的均值为155.12ng/mL，S为2.257，CV为1.46%；批间精密度评价，TM1的均值为1.95ng/mL，S为0.096，CV为4.92%；TM2的均值为156.32ng/mL，S为3.023，CV为1.93%。均符合ISO15189认可准则所制定的批内精密度和批间精密度可接受范围（均为≤10%）。同时也小于厂家说明书给定的允许范围。（见表1）表1精密度实验结果AFP批内精密度批间精密度浓度（ng/mL）SCV（%）（ng/mL）SCV（%）TM11.970.0542.741.950.0964.92TM2155.122.2571.46156.323.0231.932.2准确度评价实验结果通过表2可见，卫生部临床检验中心发放的6份室间质评物AFP的检测结果与靶值比较，相对偏倚在-0.46%~1.53%之间，评价结果均为“通过”，远低于临检中心规定的偏倚±25%，也符合厂家要求<10%的标准，表明仪器检测准确度高。表2准确度实验结果样本编号靶值/（ng/mL）检测值/（ng/mL）相对偏倚/（%）17050188.589.010.58170502111112.71.5317050349.7249.65-0.1417050423.5123.530.09170505168.57169.50.5517050612.9612.9-0.462.3线性范围评价结果选取高值血清样本和低值血清样本，按不同比例混合，配制成系列浓度血清，并进行双份测定，结果（见表3）。将6个AFP检测结果和已知样本检测结果做散点图（见图1），得到直线回归方程Y=1.0003x-1.3787，R2=0.9995，根据指南中规定相关系数R2≥0.95，b值在0.97-1.03范围内，可观察到两者呈较好的线性相关，测定的分析范围可作为真实的分析测量范围。表3线性范围评价结果单位：ng/mL第一次测量第二次测量均值（实测浓度）稀释度1L2.392.402.402.400.8L+0.2H31.3332.1731.7534.520.6L+0.4H63.3766.2764.9766.640.4L+0.6H95.76100.3098.0398.760.2L+0.8H125.90129.90127.90130.881H159.70166.30163.00163.00实测浓度l)理论浓度（ng/mL）图12.4参考区间评价实验结果在本实验中AFP的测量数值100%在厂家提供的参考区间内，均符合要求，结果见表4。表4参考区间评价结果检测项目厂家提供参考区间（ng/mL）符合人数比率AFP0-720100%

讨论罗氏CobasE602电化学发光免疫分析采用当今世界较为先进的电化学发光检测技术，该技术具有检测速度快、重复性好以及试剂稳定等优势，目前已被临床广泛应用。E602拥有封闭的配套系统，仪器、程序、试剂、校准品、质控品、配套耗材均由厂家提供，但是不同实验室之间的条件有很大差异，往往导致检验结果的不统一，容易干扰临床的准确判断。因此，每个实验室应建立起各自的检验系统，建立规范化的长效的验证机制，确保不同检测系统间检测结果的一致性和可靠性。本实验验证E602批内精密度CV1.46-2.74%，批间精密度CV1.93-4.92%，均符合ISO15189认可准则要求，并在厂家说明书给定的允许范围之内，说明检测系统重复性符合要求，精密度良好。本科室参加省临检中心组织的室间质量评价活动，用其提供的质控品进行准确度验证。本实验的6份室间质控品的检测结果与靶值的偏倚介于-0.46%~1.53%之间，均在允许范围之内，顺利通过了室间质量评价，表明检测系统准确度性能符合要求。本实验测试线性范围，所得结果在坐标图上呈现良好的线性趋势。本实验所得到的直线回归方程Y=1.0003x-1.3787，R2=0.9995，对比指南中规定相关系数R2≥0.95，b值在0.97-1.03范围内，可观察到两者呈较好的线性相关。根据厂家提供的说明书，E602检测AFP的测量线性范围为0.605-1210ng/mL，在此范围内测定的分析范围可作为真实的分析测量范围。本实验按照NCCLSC28-A2文件要求，在仪器在控状态下，对AFP的参考区间进行验证，结果为AFP有100%的测量数据在推荐参考区间内，大于95%的文件要求，故可直接引用厂家提供的参考区间。综上所述，罗氏CobasE602电化学发光免疫分析仪检测AFP的方法学性能良好，能够为临床提供可靠的检验结果，满足临床检测的性能要求。参考文献：[1]张保平，董莉，冯新平，等.雅培ARCHITECTI2000化学发光仪测定6种肿瘤标记物项目的方法学性能评价[J].国际检验医学杂志，2011,32（4）：488-490.ZhangBP,DongL,FengXP,etal.PropertyappraisalofAbbottARCHITECTlum-inousinstrumentI2000chemicaldeterminationof6tumormarkers[J].Int-ernationalJournalofMedicalLaboratory,2011,32(4):488-490[2]毕波，吕元。定量检测方法学性能验证的系统设计[J]。中华检验医学杂志，2007,30（2）：143-145.BiB,LuY.Anappropriatedesignofmethodperformancevalidatonforquant-Itativetests[J].ClinJLabMed,2007,30(2):143-145.[3]杨振华.临床（医学）实验室质量管理——ISO15189[J].临床检验杂志，2002,20（8）：2079-2084.[4]《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》WS/T420-2013.[5]NCCLS.EP6-AEvaluationoftheLinearityofquantitativemeasurementProcedures.Statistecalapprovedguideline[S].PA:NCCLS,2003.[6]NCCLS.C28-A2.Howtodefineandrefernceintervalsintheclinicallab-Oratory[M].Wayne,PA,USA:NCCLS,2000.[7]黄湘宁，郑春苏，Rochecobase411全自动化学发光分析性能评价[J].检