




版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
第四章基本实验项目
实验一马钱子的急性毒性试验(改进寇氏法)
【目的】
1、学习中药急性毒性试验的方法,掌握LD50的测定方法。
2、观察马钱子的毒性反应。
【原理】
急性毒性试验是指受试动物在一次大剂量给药后所产生的毒性
反应和死亡情况。药物毒性的大小,常用动物的致死量来表示,因为
动物生与死的生理指标较其他指标明显、客观、容易掌握。致死量的
测定也较准确。在测定致死量的同时,还应仔细观察动物是否出现耸
毛、倦卧、耳壳苍白或充血、突眼、步履蹒跚、肌肉瘫痪、呼吸困难、
昏迷、惊厥、大小便失禁等不良反应。
致死量的测定常以半数致死量为标准。半数致死量是指能够引起
试验动物一半死亡的剂量,即药物致死量对数值,用符号LD50表示。
由于LD50的测定较简便、可靠,而且稳定,现已成为标志动物急性
中毒程度的重要常数。LD50测定的方法有多种,如Bliss法、改进
寇氏法、简化机率单位法、累积插值法、机率单位-加权直线加归法
等等。以上方法虽各有特点,但都有共同的要求:
(1)动物:均选用体重17~22g健康小鼠(同次试验体重相差
不得超过4g),或选用体重120~150g(同次试验体重相差不得超
过10g)健康大鼠作实验动物。性别相同或雌雄各半。
(2)给药途径:要求采用两种给药途径,其中必须有一种与临床
所采用的相同。溶于水的药物尚须测定静脉注射的值得提出
LD50o
的是,临床上虽然不用腹腔注射,但动物实验因腹腔注射给药方便,
吸收迅速,颇为常用。若供试药物在腹腔内不引起强烈刺激或局部变
化(如纤维性病变等),那么啮齿类动物腹腔注射的LD50,参数很接
近于静脉给药的口服制剂无法通过注射给药途径时,可只用
LD50o
胃肠给药。
(3)试验周期和观察指标:给药后至少观察7天。观察期间应逐
日记录动物的毒性反应情况和死亡动物的分布。
(4)正式试验前,均须先用少量动物进行预试试验,大致测出受
试药物引起0%和100%死亡率的致死量范围,然后安排正式试验。
正式试验组数不得少于三个剂量组,一般选用4~5个剂量组,每组
动物数为10~20只。
(5)报告LD50时需注明实验动物的种属及品系、性别、体重范
围、给药途径及每个剂量组动物数等,还需注明受试药物的配制方法、
给药剂量、各组剂量间的比值(一般以0.65~0.85为宜)、给药容积、
观察时间及计算方法。还须标出LD50的95%可信限。
【动物】小鼠
【药品】马钱子水煎液
【器材】注射器、灌胃针头、鼠笼
【方法】
1、预试实验:预试实验目的是为了找出引起动物0%(Dn)和
100%(Dm)死亡的剂量,以便安排正式实验。预试实验一般采用少
量动物(6~9只小鼠)进行,将动物随机分为3组,组间剂量比值一
般以1:0.5或1:0.7为宜。灌服或腹腔注射量以0.2ml/10g体重
为度。预试实验应进行到找出Dn和Dm后方可安排正式实验。
2、正式实验:在预试实验测得Dn和Dm的剂量范围内设4~6
个剂量组,最多10组。最理想的结果是使LD50的上下各有2~3
组。组数愈少,准确性愈差。各剂量组的动物要求相等,至少10只
动物(分组时应注意分层随机均匀化的原则)。本实验要求最大反应
率为100%,最小反应率为0%,或至少反应率接近100%或0%。
组间剂量比值(1:K),常用1:0.8或1:0.75。如实验中出现相邻
剂量有重复的100%和0%反应率时,应将靠边的组弃去不计,使大
剂量组只有一个100%的反应率,小剂量组也只有一个0%的反应率。
分组完毕和各组剂量算出后,分组灌服或注射不同剂量的受试药物。
为能得到理想的结果,实验最好从中间剂量开始,以便从最初几个剂
量组动物接受药物后的反应来判断两端剂量是否合适,便于调整剂量
和组数。为了提高实验的精确度和节省药物,受试药物可按"低比稀
释法"配置。即使每只动物的用药体积相等(0.2ml/10g),而溶质
不等。给药后逐日观察并记录中毒反应、死亡率和死亡情况。
【结果】按表填写数据
马钱子水煎液对小鼠死亡率的影响
组别剂量g/kg(d)Logd(X)死亡数死亡率(p)p2P_P2
1
2
3
4
公式1:(logLD50)X50=Xm-i(ZP-05)
则LD50=log1X50
公式2:
公式3:LD50的95%可信限=lgi(X50±1.96SX50)
LD50的平均可信限=LD50±(LD50高限-LD50低限)/2
Xm:最大剂量组剂量的对数值
i:相邻两组剂量(d)对数值之差,或相邻两组高剂量与低剂量之比
的对数。
P:各组动物的死亡率,用小数表示。
ZP:为各组动物死亡率的总和。
n:每组动物数。
Sx50:logLD50的标准误。
实验二柴胡对发热家兔的解热作用
【目的】观察柴胡注射液对发热兔体温的影响;了解柴胡解热作用的
特点。
【原理】本实验采用伤寒副伤寒二联菌苗作为致热原作成实验性动物
发热模型,并以正常兔作为对照,观察柴胡注射液的解热特点。
【器材】数字式肛温计、磅秤、兔固定架、注射器、棉球
【方法】取健康兔2只,标记称重,兔架上固定。分别测肛温两次,
以均值作为正常体温。
从甲、乙两兔耳缘静脉注射伤寒副伤寒二联菌苗lml/kg体重,
待体温升高超过1℃后(约需0.5~lh),分别按以下安排给药。
甲兔(发热兔):肌注生理盐水0.5ml/kg;
乙兔(发热兔):肌注柴胡注射液0.5ml/kg。
给药后30、60、90、120min分别测试肛温。
【结果】将所得实验数据,经统计处理后,参见表记录。
柴胡对家兔体温的影响℃(D±SD)
组别动物数(只)正常致热后lh给药后(min)
306090120
甲
乙
【注意】
(1)兔应健康,雌性无孕,体温正常(38.5~39.5℃)O
(2)每次测温前应在肛温计前部涂以少许液体石蜡,测温时操作
应尽可能轻柔。
(3)使用测温计时先按下开关按钮插入肛门深度为4~5cm。
当显示器上的"°C标记停止闪烁时(约需lmin)取出。记录体温后
关闭电源。
(4)本实验是最常用的方法,其特点是致热快,维持时间短。家
兔体温较恒定。此外近年来有直接用内生性致热源作为致热剂进行实
验,效果较好。
【思考题】分析实验结果后,说明柴胡解热作用的特点。
实验三生大黄对小鼠排便时间和数量的影响(炭末法)
【目的】观察生大黄对小鼠肠道炭末推进时间、数量的影响。
【原理】运用色素流动法,以黑色炭末为指示剂,以排黑便的时间、
性状和数量为指标,可直接观察生大黄对肠道推进功能的影响。生大
黄泻下通便,可使肠蠕动加速,炭末推进快,排黑便时间短,次数多,
成形差。
【器材】小鼠灌胃针头、1ml注射器、钟罩、滤纸、鼠笼、台秤、棉
签、记时钟、银子。
【药品】生大黄水煎液lg/ml(含炭末O.lg/ml)、炭末生理盐水混
悬液O.lg/ml
【动物】小白鼠
【方法】取禁食20~24h体重相近的小鼠6只(腹泻者剔去),随机
分成2组,标记。2组分别灌服上述两种炭末混悬液0.5ml/只。各
鼠分置于铺有滤纸的钟罩内进行观察,记录小鼠出现黑便的时间、性
状和数目,以及稀粪沾染肛门情况。连续观察4h,每组3只小鼠取
平均值,然后综合全实验室结果,进行比较。
【结果】按表记录分析。
生大黄对小白鼠排便的影响(□士SD)
组另U开始黑便时间(min)4h内排黑便数(粒)黑便性状
生理盐水组
生大黄组
【注意】
(1)吸药液前,应将药液摇匀,以保证药量及炭末量准确。
(2)排黑便的记数和记时,以开始排出黑便为准。
(3)记数黑便时应随时将小鼠排出的已记数的黑便清除,以免影响记
数的准确性。
(4)实验小鼠在禁食与实验过程中应让其饮水,否则影响实验结果。
[附]生大黄制剂的制备:取生大黄100g,右酶小块后,以水浸没。
冷浸24h后,过滤(三层纱布),40C水浴浓缩至lg/ml.
【思考题】观察生大黄泻下的作用,临床应用大黄致泻时应注意什
么?
实验四生大黄对小鼠小肠运动的影响(炭末法)
【目的】了解生大黄对肠蠕动的影响。
【原理】利用黑色炭末作为指示剂,观察炭末在肠道的推进距离。口
服生大黄可刺激肠蠕动加速,有泻下作用,故对胃肠实热有"釜底抽
薪”之功。大黄久煎或炮制后,致泻成分分解,作用减弱。故选用生
大黄作为实验用药。
【器材】手术剪、眼科银、直尺、注射器、灌胃针头、天平、烧杯、
搪瓷盘。
【药品】生大黄水煎液lg/ml(含炭末O.lg/ml)、炭末生理盐水混
悬液O.lg/ml
【动物】小白鼠
【方法】取禁食20~24h体重相近的6只小白鼠,随机分为2组,
每组3只,标记。分别用上述2种炭末液0.3ml/10g体重灌胃。给
药30min后脱颈椎处死,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端至幽门,
下端至回盲部的肠管,置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线,测量肠管
长度作为"小肠总长度"。从幽门至炭末前沿的距离作为"炭末在肠
内推进距离"。取各组小鼠平均值,用公式计算炭末推进百分率;并
观察各组小肠容积是否增大。
炭末推进率;炭末在肠内推进距离(cm)/小肠全长(cm)*100%
【结果】按表记录分析
生大黄对小白鼠小肠蠕动的影响(X±SD)
组别小肠总长度(cm)炭末推进距离(cm)炭末推进率(%)
生大黄
生理盐水
【注意】开始给药至处死动物的时间必须准确,以免时间不同而造成
实验误差。
【思考题】大黄致泻的主要成份及作用机理是什么?
实验五双黄连口服液对蛋清致大白鼠后足跖肿胀的影响
【目的】学习用鸡蛋清引起大鼠足跖急性炎症的方法,观察双黄连口
服液的抗炎作用。
【原理】以鸡蛋清(异种蛋白质)作为致炎剂,注入大鼠足跖内,可
引起局部急性炎症,使局部组织肿胀,该致炎作用可持续6小时。通
过测量致炎前后大鼠足跖容积的变化来观察双黄连口服液的抗炎作
用。
【器材】天平、鼠笼、足容积测定装置、注射器、大鼠灌胃器
【药品】双黄连口服液、100%蛋清液、生理盐水
【方法】取大鼠4只,称重,标记,分为2组。将大鼠右后肢用手
固定,在其踝关节处用圆珠笔作一标记,动物的右后肢浸入足容积测
量装置内,浸入深度以标记处为界。从该装置的刻度吸管处所读取的
数值即为动物右后足的正常体积(ml).连测两次,求其平均值为正常
值。给2组动物分别灌服以下药物:双黄连口服液、生理盐水,容量
均为后在每鼠右后肢足掌心向踝关节方向进针,
lml/100go30min
皮下注射100%蛋清液0.1ml/只。其后每半小时分别测定大鼠右后
足跖的容积,连续5次。
综合全实验室结果,按下式计算药物在给药后的不同时间内足肿抑制
率及足肿浮肿率:
足肿抑制率=(对照组足跖容积-药物组足跖容积)/对照组足跖容积
*100%
足肿浮肿率=(致炎后足容积-致炎前足容积)/致炎前足容积*100%
【结果】按表记录
双黄连口服液对蛋清致大鼠后足跖肿胀的影响(□士SD)
组别动物数(只)右足跖容积(ml)
正常致炎后30min60min90min120min150min
生理盐水对照组
双黄连口服液组
【注意】
(1)测定足容积时应有专人负责,以减少误差;实验时每次均重复测
定2次。
(2)本实验测量方式也可用软尺量关节周长,但误差较大。
(3)可采用坐标图表示药物的足肿浮肿率,横坐标为时间,纵坐标为
足肿浮肿率,直观匕戢各组的情况。
(4)本实验时间根据情况可在3~6h内完成。实验时间过短,不易
比较药物作用的特点。
(5)本实验亦可用lg/dl角叉菜胶、lg/dl琼脂或lg/dl右旋糖酊生
理盐水液作为致炎剂,皮下注射0.1ml/只。
实验六三金片对家兔的利尿作用(膀胱漏斗法)
【目的】学习膀胱漏斗法以观察三金片的利尿作用。
【原理】三金片为治疗泌尿系统感染的特效中药,文献报道有利尿作
用。
【器材】兔手术台、注射器、针头、剪刀、手术钳、导尿管、量筒、
烧杯、婴儿秤。
【药品】三金片水溶液、葡萄糖盐水、生理盐水
【动物】家兔
【方法】取家兔背位固定在兔台上,耳缘静脉注入5g/dl葡萄糖盐水
10ml/kg,造成水负荷。耳缘静脉注射25%乌拉坦麻醉,进行手术,
在耻骨联合上方沿腹中线作一个长约3~4cm的皮肤切口。沿腹白线
切开腹壁,将膀胱移出体外。在其顶部用两把止血钳提起,在止血钳
之间作一长约1cm的切口,把膀胱漏斗放入膀胱,漏斗底要罩在两
侧输尿管的膀胱入口上,用线将膀胱及漏斗柄结扎固定。收集正常尿
量2次,1次lOmin。一只兔通过灌胃管灌入三金片水溶液10ml/kg,
另一只兔灌入同容积生理盐水,60分钟后开邕收集尿液。每隔30min
收集1次,连续3次。
【结果】按表填写数据
三金片水溶液寻家兔的利尿作用
组别剂量(ml/kg)给药后尿量(ml)
60min90min120min
对照组
给药组
实验七木香对盐酸一乙醇致大鼠急性胃粘膜损伤的影响
【目的】观察木香对盐酸-乙醇致大鼠急性胃粘膜损伤的影响,了解
木香的理气及调和肝脾的作用。
【原理】急性胃粘膜损伤常有或肝脾不和等病理改变。木香有理气
作用,常用于治疗气滞证。胃酸升高或内服高浓度酒精均可导致胃粘
膜急性损伤,故可采用盐酸-乙醇引起大鼠胃粘膜急性损伤,以此观
察木香的理气及调和肝脾的功效。
【器材】2ml及5ml的注射器、大鼠灌胃器、手术剪、镜子、夹子、
尺子。
【药品】0.4g/ml的木香水溶液、150mm。1/1_盐酸-60%乙醇混合
溶液(以15ml盐酸加无水乙醇600ml,再加蒸储水至1000ml,即
得)。
【动物】大白鼠。
【方法】取同一性别、体重为180~200g的大鼠4只,随机均分为
二个组:第一组为对照组,第二组为木香组。禁食48h(不禁水)后,
灌胃给予生理盐水或药液10ml/kg,lh后每只大鼠灌胃盐酸-乙醇
混合液(1.5ml/只),再过lh后用过量乙醛麻醉大鼠致死,开腹取胃,
用夹子夹紧贲门,由幽门注入1%甲醛溶液5ml,夹紧幽门,将全胃
置于甲醛溶液中固定沿胃大弯剪开,将胃外翻,用清水
1%10mino
轻轻洗去胃内容物。将胃平铺于玻璃板上,用尺子测量胃粘膜损伤长
度,以损伤长度(损伤宽度大于1mm者加倍计算)总和作为胃粘膜
损伤指数,进行统计学处理,并按下式计算抑制率:
抑制率(%)=(对照组损伤长度-用药组损伤长度H对照组损伤长
度xioo%
【结果】对照组大鼠胃粘膜表面可见明显条索状和点状损伤,而木香
组损伤较少。将实验数据填入表内。
木香对盐酸-乙醇所致大鼠急性胃粘膜损伤的影响
组别剂量(g/kg)胃粘膜损伤指数(mm)(丁士SD)抑制率(%)
对照组
木香组
【注意】禁食期间,大鼠笼内不得存留大便,以保证充分禁食。
实验八延胡索对小白鼠的镇痛作用(热板法)
【目的】了解热板法筛选镇痛药的实验方法;观察延胡索的镇痛作
用。
【原理】延胡索能活血行气止痛。热板法是筛选镇痛药的经典方法:
小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时,就发生舔足的特殊反应。以接
触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值,以此为观察指标。
【器材】恒温水浴箱、大烧杯(500ml)、秒表、天平、注射器(1ml)、
鼠笼。
【药品】延胡索水溶液4g/ml、生理盐水、苦味酸。
【动物】雌性小白鼠。
【方法】调节热板仪温度,水温恒定在每次取小鼠只,
55±0.5℃o2
放入热板仪内。记录自放入热板仪至出现舔后足所需时间(s),作为
该鼠的痛阈值。凡30s内不出现舔后足者,弃之不用。依次测量各小
鼠的痛阈值。取预选合格的小鼠8只,随机分为2组,每组4只,
编号、再重测痛阈1次,将两次痛阈的平均值作为该鼠给药前的痛阈
值。然后,第一组灌胃延胡索液0.2ml/10g,第二组灌胃等容量的生
理盐水作对照。给药后的15、30、45、60、90min测定各鼠痛阈
值。若小鼠在热板上60s仍无痛觉反应,应取出,按60s计。将结
果记入表内,按不同时间测定的各鼠痛阈平均值计算用药后痛阈提高
的百分率。
痛阈提高率二(给药后平均痛阈值-给药前平均痛阈值)/给药前平均
痛阈值x100%
【结果】按表进行记录。
延胡索对小鼠的镇痛作用
痛阈提高百分
组别给药前痛阈平均值(S)给药后痛阈值(S)
率
1530609015306090
minmin
对照组
延胡索
组
【注意】
(1)室温以15~2CTC为宜,过低则小鼠反应迟钝,过高则过于敏感,
而引起跳跃,影响实验的准确性。
(2)正常小鼠一般放入烧杯后10~15s内出现不安,举前肢,踢后
肢,跳跃等显现。这些动作均不作为疼痛指标,只有舔后足才作为疼
痛的指标。
(3)一般不选用雄鼠,因雄鼠阴囊可触及烧杯底部,易呈现敏感反应,
影响结果。
【思考题】试述延胡索镇痛的有效成分及机理。
实验九延胡索对小白鼠的镇痛作用(扭体法)
【目的】观察延胡索的镇痛作用。
【原理】延胡索能活血行气止痛。小白鼠腹腔受化学药物刺激,表
现为扭体反应,以此作为指标、观察金铃子散的镇痛作用。
【器材】注射器、烧杯、鼠笼、计时器等。
【药品】延胡索水煎液lg/ml、0.6%醋酸溶液、生理盐水。
【动物】小白鼠。
【方法】将小鼠称重、标记后随机分组。给药组灌服延胡索水煎液
0.3ml/10g,对照组灌服等量生理盐水。给药后30min,各鼠腹腔注
射0.6%醋酸溶液0.2ml/只。观察并记录注射醋酸溶液后15~30min
内出现扭体反应(腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行)的次
数及时间。计算延胡索的镇痛百分率。
镇痛率=(对照组平均扭体次数-金铃子散组平均扭体次数H对照组
平均扭体次数x100%
【结果】将实验结果填入表内。
延胡索对小鼠的镇痛作用(□士SD)
组另IJ鼠数(只)扭体出现时间(mih)扭体次数镇痛率(%)
对照组
延胡索组
【注意】
(1)0.6%醋酸溶液必须临用前配制。
(2)若延胡索为生品,煎煮时可加入0.1%醋酸或食用醋适量,以助
生物碱成分溶出。
(3)小鼠对疼痛刺激的反应差异甚大,据药理学惯例,镇痛百分率须
大于50%才认为有镇痛作用。
(4)也可用0.01%酒石酸睇钾溶液0.2ml/只致痛,作扭体实验。
实验十生三七粉对小白鼠凝血时间的影响(玻片法)
【目的】学习用玻片法测定小鼠凝血时间;观察生三七对小鼠凝血
时间的影响。
【原理】三七属止血药,有明显止血功效,常用于治疗咯血、岫血、
崩漏、尿血等症。
【器材】注射器、载玻片、大头针、秒表、眼科弯镶、棉花、鼠笼、
天平。
【药品】生三七水浸液0.15g/ml、生理盐水、苦味酸溶液。
【动物】小白鼠。
【方法】取小鼠6~8只,随机分为2组,给药组灌胃三七水浸液
0.3ml/10g,对照组灌胃生理盐水0.3ml/10g。30min后,用眼科
弯银迅速摘去一侧眼球,即有血液流出。于载玻片的两端各滴一滴血,
血滴直径约5mm,立即用秒表计时。每隔30s用清洁大头针自血滴
边缘向里轻轻拨动一次,并观察有无血丝挑起。从采血开始至挑起血
丝止,所历时间即凝血时间。另一滴血供最后复验。记录凝血时间。
【结果】按表记录数据。
生三七对小鼠凝血时间的影响
组别剂量(ml/10g)凝血时间(s)(下士SD)
给药组
对照组
【注意】
(1)凝血时间可受室温等因素影响,室温15乙左右较好。
(2)每次挑血滴时,不应从各个方向多次挑动,以免影响纤维蛋白的
形成。
【思考题】
(1)三七有何功效?止血用的主要方剂有哪些?
(2)三七止血的主要成分是什么?
实验十一三七对小白鼠凝血时间的影响(毛细玻管法)
【目的】学习用毛细玻管测定凝血时间的办法;观察三七缩短凝血
时间的作用。
【原理】三七是祛瘀、定痛、止血药,能诱致血小板释放止血和凝
血活性物质,增高血液中凝血酶含量,从而缩短小鼠的正常凝血时间,
达到止血之效。采用小鼠给药后一定时间,取其血液在玻璃毛细管内
折断时出现血凝丝所历时间为指标,即可判明三七缩短凝血时间的作
用。
【器材】1ml注射器、毛细玻管(内径1mm、长10cm)、灌胃针
头、天平、秒表。
【药品】生理盐水、三七水浸液0.1g/ml、苦味酸。
【动物】小白鼠。
【方法】取小鼠6只,随机分为2组。2组均按0.2ml/10g剂量
灌胃,分别给予生理盐水、三七水浸液。2h后用玻璃毛细管插入小
鼠内臂球后静脉丛,深约4~5mm。自血液流进管内开始计时。血
液注满后取出毛细管平放于桌上。每隔30s,折断两端毛细管约
0.5cm,并缓慢向左右拉开,观察折断处是否有血凝丝至血凝丝出现
为止,所历时间即为血凝时间。毛细管两端数据的平均值,即为该鼠
的血凝时间。计算凝血时间缩短百分率。
凝血时间缩短百分率二(对照组血凝时间-给药组血凝时间)/对照组
凝血时间X100%
【结果】按表填写数据。
三七对小鼠凝血时间的影响(□士SD)
动物给药2h后凝血时凝血时间缩短百分率
组另U剂量(mg/10g)
数间(%)
对照
组
给药
组
【注意】
(1)实验时室温最好在15℃左右。
(2)测试用的毛细管内径应均匀一致。
(3)毛细玻管采血后不宜长时间拿在手中,以免影响凝血时间。
【思考题】三七对凝血时间有何影响?此作用临床意义何在?
实验十二川茸对大鼠血液流变性的影响
【目的】
①学习测量血液流变性的实验方法;
②观察川苜的对急性"血瘀"证大鼠的防治作用,并分析其作用机
制。
【原理】
中医理论认为"大怒致瘀","外寒也可致瘀"。给大白鼠注射
大剂量肾上腺素,模拟暴怒时机体状态,随之以冰水浸泡动物,模拟
外寒侵袭。两种因素的综合作用可复制出大白鼠血液流变性呈粘、浓、
凝状态的急性"血瘀”证模型。
川苜活血行气通经,对血液粘、浓、凝状态有明显改善。可抑制
血小板聚集,有抗凝血作用,可改善血液流变性。
【材料】
动物:大鼠,雌雄各半,体重250g左右;
药品:15%川苜水煎液、0.5%阿司匹林混悬液、0.1g/dl肾上腺素、
生理盐水、肝素钠、蒸微水;
试剂:苦味酸溶液;
主要器材:全自动血液粘度测试仪(YDA-IV型,北京宏润达科技发
展有限公司)、5ml注射器、20ml烧杯、小水桶及人造冰、红细胞压
积管、试管、离心'机、大鼠灌胃器、天平、鼠笼。
【方法】每组取大鼠4只,称重,标记,随机分为两组(甲、乙组)。
甲组给予15%川苜水煎液,灌胃量为2ml/100g,每日1次,连续7
日,乙组给予同容积的生理盐水。于第7天皮下注射肾上腺素
0.08mg/100g,2h后将大鼠用冰水刺激5min,过2h再次皮下注
射肾上腺素处置后禁食不饮水,次晨取血检测。
0.08mg/100go
实验时,将动物用乙醛麻醉后,剖腹。腹主动脉取血2ml以上用于
测定。将血液全部注入肝素抗凝管充分抗凝。取其中1ml用穿刺针
加入血沉管静置讣再上离心机4000r/min,离心20min从右边,
自下而上读出压积值。启动仪器,选择全血或血浆(3000r/min,
离心lOmin),取0.8ml加入切血槽,进行测定。全自动血液粘度测
试仪检测的相关指标有全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度、红细胞
压积、纤维蛋白原、红细胞聚集指数等。
【结果】
统计全班各组实验结果,比较用药后对大鼠血液流变性的相关参数的
影响。
剂量全血粘度红细胞压积纤维蛋白原
组另U红细胞聚集指数
(g/kg)(mpa.s)(%)(g/D
生理盐水
川苜
(阿司匹林)
药物对大鼠血液流变性的影响(口±$;n=)
【注意事项】
①在进行全血粘度的测量时,注意有高切、中切和低切三种切变率;
②抗凝血样一般在室温下存放,不要存放于冰箱内,采血后,应在
4h内完成测量工作;
③将血样注入粘度仪前,使血样充分混匀,并使血样沿壁缓缓流入,
不宜出现气泡。
④全部做完后,必须清洗污水瓶,装回时瓶盖一定要拧紧,否则废
液抽不出来。
【思考题】
被试药物改善血液流变学的作用机制?
【附注】
1、肝素抗凝管的配置:取肝素钠一支(2ml,12500u)与8ml蒸播
水混匀,每支试管加入0.1ml,制作100支抗凝管干燥备用。
2、血液粘度计使用方法:
①将粘度计调整水平,打开粘度计电源预热
15mino
②抽取静脉空腹血2ml注入抗凝管充分抗凝(轻轻摇匀),取其中
1ml用穿刺针加入血沉管静置lh,从左边,自上而下读出血沉值;
再上离心机4000rpm离心20mm,从右边,自下而上读出压积值。
③开始测试,屏幕显示"全自动血液粘度测试仪"。按"确定"键
选择全血和血浆(3000rpm,10min)的切变率,移动光标选择全血或
血浆,并取全血或血浆0.8ml加入切血槽后,按"确认"键后自动测
试,全血由高切到低切。
④测试完毕后按"打印"键,自动打印出设定切变率下的粘度值(如
联机操作数值直接传送到计算机)。
⑤测试完按"冲洗"键自动冲洗并吹干,如认为未干,也可单独按
"吹干"键吹干。
实验十三当归抗大鼠血栓形成的作用
【目的】
①学习利用体外血栓形成仪进行抗血栓形成的实验方法;
②观察当归抗血栓形成的作用,并分析其作用机制。
【原理】
根据流体力学原理,在一个恒速转动密闭圆环内的血液被动流动
是一个复杂的三维流动,这种产生的回流在圆环转动血液下降面上存
在有向中心主流的冲击,这种冲击可以启动血小板聚集进而形成血栓,
而形成的血栓因重量的影响,使血液下降面的冲击更加明显。
当归所含的阿魏酸能抑制体外血栓形成。小剂量阿司匹林抑制
TXA2
合成酶,减少TXA2的合成,可抑制血小板聚集,防止血栓。
【材料】
动物:大鼠,雌雄各半,体重200g左右;
药品:100%当归水煎液、0.25%阿司匹林混悬液、生理盐水;
试剂:1%硅油(用乙醛稀释)、苦味酸溶液、麻醉乙醛;
主要器材:体外血栓形成仪(YDA-IV型,北京宏润达科技发展有
限公司)、2ml硅化注射器、硅化硅胶血栓管、天平、玻璃培养皿、
滤纸、恒温干燥箱、眼科银子、刻度尺、手术剪、秒表、大鼠灌胃器、
鼠笼。
【方法】
每组取健康大鼠4只,称重,标记,随机分为两组(甲、乙组)。
甲组给予100%当归水煎液,灌胃量为2ml/100g,每日1次,连续
5日,乙组给予同容积的生理盐水。
实验时,将动物用乙醛麻醉后,剖腹。用硅化注射剂自腹主动脉取血
2ml以上用于测定。调节体外血栓仪,使其温度恒定在37工,转速
为17r/min。将所取血液注入已经标好刻度线(1.8ml)的硅胶血栓管
中,套紧血栓管装入血栓形成仪中,启动仪器,用秒表计时。仪器转
动15min后,停机,取下血栓管环,打开,将管内血液以及已经形
成的血栓倾倒于铺有滤纸的玻璃培养皿上。用眼科银子轻提起血栓头,
移放在另外干燥的滤纸上,测量血栓长度()用滤纸将血栓表
mmo
面血液吸干,将其放在已知重量的滤纸上,在天平上称重,所得重量
减去滤纸重量即为血栓的湿重()在上述血栓放置于恒温
mgo64Y
干燥箱中烘干取出后称重所得重量为血栓干重()
30min;mgo
【结果】
统计全班各组实验结果,比较用药后体外血栓长度、湿重及干重的变
化。
药物对体外血栓形成的影响(n±s;n=)
剂量血栓长度血栓湿重血栓干重
组另IJ
(g/kg)(mm)(mg)(mg)
生理盐水
当归
【注意事项】
①自动物腹主动脉取血易发生出血现象,操作应小心;
②每次注入血栓管的血液应恒定量;
③测定血栓长度时,切勿用力拖拉血栓;
④测定血栓湿重时,务必用滤纸吸干血栓表面的血液;
⑤烤干血栓时,须严格掌握考箱温度和烘烤时间,避免血栓发生炭
化。
【思考题】
①被试药物抗血栓形成的作用机制?
②进行本实验操作时应注意掌握哪些要点?
实验十四丹参抗大鼠血小板聚集的作用
【目的】
①熟悉血小板聚集仪的操作,学习使用血小板聚集仪观测药物抗血
小板聚集的实验方法;
②观察丹参(阿司匹林)抗血小板聚集的作用以及作用的环节。
【原理】
血小板悬浮在血浆中呈现轻度混浊,这种血浆称为富血小板血浆
(PRP)o当一束聚集光通过它时,透光率与血浆浊度成反比;而血
浆浊度与血小板数成正比。将可以引起血小板聚集的物质(例如ADP、
胶原、肾上腺素等)加入不断搅拌的PRP时,随着血小板聚集,血小
板数目减少厕透光率增加。以贫血小板血浆(PPP)的透光率为100%
血小板聚集,PRP的透光率为0血小板聚集;将随着血小板聚集产
生的透光率变化,通过光敏元件转换为电量变化,并以曲线形式记录
下来,就成为反映血小板聚集的速度和程度的客观指标。
丹参所含的丹参素、丹参酮UA磺酸钠等均能抑制血小板聚集。小
剂量阿司匹林抑制TXA2合成酶,减少TXA2的合成,可抑制血小板
聚集,防止血栓。
【材料】
动物:大鼠,体重200g左右;
药品:100%丹参水煎液、0.5%阿司匹林混悬液、生理盐水;
试剂:0.01%二磷酸腺苜(ADP)、0.2mol/L磷酸缓冲液、3%戊巴
比妥钠、3.8%枸椽酸钠、1%硅油(以乙醛稀释)、苦味酸溶液;
主要器材:多功能血液凝聚仪(MPG-3E型,上海斯隆医电设备有限
公司)、离心机、硅化离心管、硅化注射器(10ml)、手术剪、手术银、
眼科银、微量进样器(103、2003)、大鼠灌胃器、天平、2ml注射
器、4号针头、5ml注射器、7号针头、鼠笼。
【方法】
各组取健康雄性大鼠4只,称重,标记,随机分为两组(甲、乙组)。
甲组给予100%丹参水煎液(阿司匹林),灌胃量为lml/100g,每日
1次,连续5日,乙组给予同容积的生理盐水。末次给药后,大鼠禁
食不禁水12h后用于实验。将大鼠以戊巴比妥钠(0.1ml/100g)腹腔
注射麻醉,剖腹用注射器自腹主动脉取血;将血液与枸椽酸钠抗凝液
以9:1比例在硅化离心管中轻轻混匀血液以800r/min离心4min;
吸取上层米黄色液体即为富血小板血浆(PRP);所余血液3000r/min
离心,所得上清液即为贫血小板血浆()打开聚集仪和记
8minPPPO
录仪开关,使仪器预热;调节聚集仪恒温保持在37±1。匚取3只方
型测量杯,其中两只各加入PPP200|il,另外一只加入PRP200|il,
置于聚集仪中预热5min;以PPP杯校正血小板计数表至"0";以
PPP稀释PRP杯,使PRP的血小板计数在24万~26万/mm3范
围内。
将调好血小板数的PRP和PPP测定杯置于聚集仪测量槽内预热至恒
温(36.8~37。0;以PRP调记录仪零点,以PPP调节幅度。将搅
拌小棒加入测定杯中,温育3min后,启动聚集仪的记录仪开关,加
入ADPIORI,描记6min的聚集曲线。在描记的两组动物的血小板
聚集曲线上计算lmin、3min、5min的聚集强度(1A、3A、5A)、
最大聚集强度(MA)、到达最大聚集强度时间(TMA)、1/2最大聚集
强度时间(T1/2MA);并以MA比较两组的聚集抑制百分率。
聚集抑制率;对照组最大聚集强度-药物组最大聚集强度
对照组最大聚集强度
【结果】
统计全班各组实验结果,比较用药后对血小板聚集各参数的变化。
药物抗血小板聚集作用(口士s;n=)
剂量聚集曲线幅度(mm)TMATl/2M聚集抑制率(%)
组另U
(g/kg)1A3A5AMA(min)(min)
生理盐水
丹参
(阿司匹林)
【注意事项】
①取血注射器及离心管必须用硅油硅化;
②取血后必须在2h内完成测定工作;
③向测量杯中加液时,不得有气泡出现。
【思考题】
①丹参(阿司匹林)抑制血小板聚集的作用点是什么?
②影响本实验的因素有哪些?
实验十五复方丹参滴丸抗家兔血栓形成的作用
【目的】观察复方丹参滴丸抗血栓形成的作用;掌握家兔体外颈总
动脉-颈外静脉血流旁路形成血栓的方法。
【原理】复方丹参滴丸为现今临床常用的心血管系统疾病药物。本
实验利用家兔体外颈总动脉-颈外静脉血流旁路法形成血小板血栓。
动脉血流中的血小板,当接触丝线的粗糙面时粘附于线上,血小板聚
集物环绕线的表面形成血小板血栓,血小板的粘附聚集功能受到抑制
时,形成血栓的重量就较轻。因此,从血栓重量可测知血小板的粘附
聚集功能。
【器材】手术钳、丝线(4号、7号)、聚乙烯管(内径1mm、2mm)、
动脉夹。
【药品】复方丹参滴丸溶液,12500u/ml肝素注射液,25%乌拉坦。
【动物】家兔,雄性1.5~2kg。
【方法】取家兔,称重,静脉注射25%乌拉坦4ml/kg,气管内插
聚乙烯管,并分离右颈总动脉及左颈外静脉。
在三段聚乙烯管的中段放入一根长5cm的4号手术丝线。将肝素生
理盐水溶液(50u/ml)充满聚乙烯管腔。当管的一端插入左颈外静脉
后,从聚乙烯管注入肝素50u/kg,夹住管壁。将管的另一端插入右
颈总动脉。手术完成后立即灌胃给予药物(给药组)或生理盐水(对
照组)。给药容量为10ml/kg。30min后开放血流,则血液从右颈总
动脉流经聚乙烯管,返回左颈外静脉。开放血流15min后中断血流,
迅速取出丝线称重,总重量减去丝线重即血栓湿重。按下列公式计算
抑制率:
抑制率二(对照组血栓重一给药组血栓重)+对照组血栓重xio。%
【结果】按表记录数据。
复方丹参滴丸对家兔血栓形成的影响
血栓重量(mg)(X
组别剂量(g/kg)动物数(n)抑制率(%)
±SD)
对照组
复方丹参滴丸
组
【注意】
(1)手术过程要求迅速,操作熟练。
(2)注意及时吸出气管分泌物,保持呼吸道通畅。
(3)严格控制并准确给予生理盐水肝素的剂量50u/kg,否则影响血
栓的形成。
【附】本法反映整体动脉血流中血小板的粘附聚集功能,该实验条
件控制较严。血流速度、血小板数等均能影响血小板血栓的形成,本
实验误差较大。
亦可取家兔或大鼠动脉血用体外血栓仪进行体外血栓形成试验,比较
给药组与对照组的体外血栓湿重和干重,并计算抑制率。
【思考题】通过本实验,试讨论复方丹参滴丸抗血栓形成的作用和
机理。
实验十六川贝枇杷膏对小白鼠的止咳作用(潜伏期观察法)
【目的】学习氨水引咳法,观察川贝枇杷膏的止咳作用。
【原理】氨水为一化学刺激性物质,其气雾吸入呼吸道后,刺激呼
吸道上皮下的感受器,可引起咳嗽。川贝枇杷膏有化痰止咳的功效,
用于咳嗽气喘,咳痰不畅,以及肺虚久咳等多种类型咳嗽。对这一实
验性咳嗽有抑制作用。
【器材】广口瓶(250ml)、注射器(lmk10ml),针头、灌胃
针头、秒表。
【药品】浓氨水(25~28%)、生理盐水、紫荒水煎液(lg/ml)。
【动物】小白鼠。
【方法】取健康小鼠,按体重均分2组,每组5只,第一组灌服
川贝枇杷膏0.2ml/10g第二组服同容积生理盐水灌胃给药lh后,
将小鼠放入250ml的广口瓶内,放入粘有浓氨水的棉球。观察小鼠
咳嗽动作(腹肌收缩、张大嘴、有时可有咳声),记录小鼠咳嗽的潜
伏期(由放入棉球开始至发生咳嗽所需的时间为潜伏期),并计算镇
咳率。
镇咳率二(用药组咳嗽潜伏期一盐水对照组咳嗽潜伏期)/盐水对照组
咳嗽潜伏期x100%
【结果】}11贝枇杷膏与生理盐水对照组比较,咳嗽潜伏期延长,表
明有显著的止咳作用。按表填写数据。
川贝枇杷膏对小鼠的止咳作用(□士SD)
组别剂量咳嗽潜伏期(S)镇咳率(%)
对照组
给药组
【注意】
(1)每次做完实验,小鼠取出后,广口瓶用湿抹布擦净,使余气散尽。
否则会影响下一只小鼠咳嗽潜伏期时间。
(2)放入粘有浓氨水的棉球后,广口瓶要迅速盖紧,否则会影响实验
结果。
【思考题】结合实验,讨论影响本实验的因素及实验结果的意义。
实验十七酸枣仁对小鼠自发活动的影响
【目的】
①了解酸枣仁对小鼠自发活动的影响,分析药物的作用是抑制还是
兴奋作用;
②掌握小鼠自发活动的实验方法。
【原理】
小鼠自主活动记录仪,主要是记录小鼠在一定区域内、一定时间内的
自主活动量,初步判断药物对小鼠的兴奋或抑制作用。
酸枣仁通过抑制中枢神经系统而有宁心安神的作用;氯丙嗪通过阻断
ai和Hi受体产生镇静作用。
【材料】
动物:小鼠,体重18~22g,雌雄各半;
药品:100%酸枣仁水煎液、0.1%盐酸氯丙嗪溶液、生理盐水;
主要器材:小鼠自主活动记录仪(ZZ-6型,成都泰盟科技公司产品)、
2ml注射器、6号针头、小鼠灌胃针头、天平、鼠笼。
【方法】
每组取小鼠6只,称重,标记,随机分两组(甲、乙组)。甲组按
0.1ml/10g灌胃100%酸枣仁水煎液(腹腔注射盐酸氯丙嗪,按
0.1ml/10g给药),乙组给予等容积的生理盐水。给药30min后将小
鼠置于小鼠自主活动记录仪内,适应5min,然后记录5min内小鼠活
动次数。每隔30min记录1次,连续观察4次。
【结果】
统计全班各组实验结果,将总结果填入下表,比较药物作用差异。
药物对小鼠自发活动次数的影响(口士S;n二)
组另U剂量(g/kg)30min60min90min120min
生理盐水
酸枣仁
【注意事项】
①动物宜事先禁食12h,以增加觅食活动;
②测量时应保持安静,不应有强光、震动、噪声等可能对小鼠自发
活动的干扰刺激;
③自发活动个体差异大,每组动物数不应少于10只;
④每次记录5min内小鼠活动次数,如记录时间过长,动物则逐渐
熟悉环境,导致活动次数减少。
【思考题】
酸枣仁(氯丙嗪)抑制小鼠自发活动的机制是什么?
【附注】
小鼠自主活动记录仪使用方法:
①开机,小鼠自主活动记录仪液晶屏亮,显示开机界面。
②开机4s后,自动进入参数设置界面。可设置编号、系统时间和定
时时间等。
③将实验用小鼠放入反应箱每格一只,盖好上盖;再将反应箱放入
反应箱槽,尽量放置在反应槽的中间,保持反应箱各边与反应箱槽之
间等距。
④按[启动]按键,仪器可显示本次测量的编号、活动数和站立数。
⑤当测量时间达到设定的定时时间时,测量自动结束。
实验十八天麻对小鼠睡眠时间的影响
【目的】
①了解催眠作用的实验方法;②观察药物的催眠作用。
【原理】
天麻通过抑制中枢神经系统而有宁心安神的作用;氯丙嗪通过阻断a
1和Hi受体产生镇静安定的作用。戊巴比妥钠阈下剂量与天麻(氯
丙嗪)合用,观察药物与戊巴比妥钠的协同作用,由此来验证药物对
中枢神经系统的抑制作用。。
【材料】
动物:小鼠,体重18~22g;
药品:100%天麻水煎液、0.32%戊巴比妥钠、0.1%盐酸氯丙嗪溶液、
生理盐水;
试剂:苦味酸溶液;
主要器材:架盘天平、秒表、1ml注射器、6号针头、小鼠灌胃针头、
鼠笼。
【方法】
1、天麻对小鼠入睡个数的影响每组取小鼠6只,称重,标记,随
机分为两组。甲组腹腔注射天麻水煎液,按0.15ml/10g给药;乙组
给予同容量的生理盐水。给药后30min,各组由对侧腹腔注射戊巴
比妥钠0.1ml/10g,以小鼠翻正反射消失lmin以上为入睡指标,比
较各组入睡鼠数。
2、氯丙嗪对小鼠睡眠时间的影响每组取小鼠6只,称重,标记,
随机分为两组。甲组腹腔注射盐酸氯丙嗪溶液,按0.15ml/10g给药;
乙组给予同容量的生理盐水。给药后30min,各组由对侧腹腔注射
戊巴比妥钠O.lml/lOg,记录各组小鼠翻正反射消失及恢复时间,计
算戊巴比妥钠催眠潜伏期(从给药到翻正反射消失的时间)及催眠时
间(从翻正反射消失到翻正反射恢复的间隔时间)。
【结果】
统计全班各组实验结果,将总结果填入下表,比较药物作用差异。
表1天麻对小鼠入睡个数的影响(口士s;n=)
组别剂量(g/kg)入睡动物数/试验动物数
生理盐水
天麻
表2氯丙嗪对小鼠睡眠时间的影响(口±$;n=)
组别剂量(g/kg)催眠潜伏期(min)睡眠时间(min)
生理盐水
氯丙嗪
【注意事项】
①戊巴比妥钠宜新鲜配制;每次实验前,都要预试,找出戊巴比妥
钠的阈下剂量;
②天麻饮片要预先浸泡再煎煮,使成分煎出完全。
【思考题】
在本实验中,天麻和戊巴比妥钠一起使用增加药效,体现了药物之间
的何种作用?
实验十九人参对小白鼠游泳时间的影响(抗疲劳实验)
【目的】学习小白鼠游泳实验方法,研究人参的抗疲劳作用。
【原理】人参有大补元气、益气生津之功效。人参促进机体对糖元
和三磷酸腺昔(ATP)等能源物质的合成利用,并使剧烈运动时产生
的乳酸转化为丙酮酸进入三獭酸循环,为机体提供更多能量,因而人
参可减轻体力劳动时的疲劳。本实验以小鼠游泳时间为指标观察人参
的抗疲劳作用。
【器材】一定容量且深度为25cm的玻璃缸、负重物、温度计、
1ml注射器。
【药品】人参水煎液lg/ml、生理盐水。
【动物】小白鼠。
【方法】玻璃缸内加水,水深至水温保持在℃
20cm,20±0.5o
取20只小鼠雌雄各半,分别称重、编号。按体重性别随机均匀分为
两组。给药组小鼠腹腔注射人参水煎液3g/kg(0.3ml/10g),注射
后立即计时,并在尾部束一个小鼠体重10%的重物。对照组小鼠每
只腹腔注射等容量的生理盐水,注射后立即计时,并在尾部束一个小
鼠体重10%的重物。注射后30min将小鼠分别放入玻璃缸内游泳,
并重新计时。注意观察当小鼠头部沉入水中10s不能浮出水面者即为
体力耗竭,即刻计时为小鼠的游泳时间。与对照组小鼠比较进行统计
学处理,测其显著性。
【结果】按表记录。
人参水煎液对小鼠游泳时间的影响(□士SD)
组另IJ剂量(g/kg)小鼠游泳时间(min)
生理盐水
人参水煎液
【注意】
(1)最好是小鼠单独游泳。若2只以上同时游泳,应注意观察,不
使小鼠彼此靠近,否则会影响实验结果。
(2)水温如果升高到28~30C或小鼠负重物较轻(5%体重)均会使
小鼠游泳时间明显延长。
实验二十人参对小白鼠耐常压缺氧的作用
【目的】学习小鼠耐常压缺氧的实验方法,研究人参增强机体耐常
压缺氧能力。
【原理】缺氧对机体是一种劣性刺激,影响机体各种代谢,特别是
影响机体的氧化供能,最终会导致机体的心、脑等重要器官供氧不足
而死亡。人参可提高机体的血氧利用率,降低机体耗氧量。同时人参
可扩张血管(特别是冠脉和软脑膜血管),改善微循环,增加供血供
氧量,从而改善机体的缺氧状态,显示人参大补元气,益气生血之功
效。本实验以小鼠在常压缺氧条件下呼吸停止死亡为指标,研究人参
的耐缺氧作用。
【器材】200ml磨口广口瓶、1ml注射器、秒表。
【药品】人参水煎液0.1g/ml,钠石灰(或等量氢氧化钠或碳酸钙)、
生理盐水、凡士林。
【动物】小白鼠。
【方法】取小鼠20只分别称重、编号,按体重、性别随机分为两
组。给药组小鼠腹腔注射人参水煎液3g/kg(0.3ml/10g),对照组
小鼠腹腔注射等量生理盐水。注射后30min将小鼠放入盛有10g钠
石灰的广口瓶内(每瓶放1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口盖严,使之
不漏气,立即计时。以呼吸停止为指标,观察小鼠死亡的时间。
【结果】按表记录。
人参水煎液对小鼠常压耐缺氧作用(□士SD)
组别剂量(g/kg)存活时间(min)
生理盐水
人参水煎液
【注意】
(1)每瓶内最好只放1只小鼠,以防互相扰动影响耐缺氧时间测定。
(2)广口瓶容积可选用150~200ml。瓶盖一定要密闭封严,以防漏
气。
(3)具有镇静作用的药物也能延长缺氧的存活时间。
【思考题】人参为何能延长小鼠在常压缺氧条件下的存活时间。
实验二十一党参对小鼠记忆获得性障碍的改善作用(跳台法)
【目的】学习记忆获得性障碍模型的制作方法,掌握用跳台法观
察中药的益智作用。
【原理】小鼠跳台仪底面可以通电,底面上放置1个绝缘的跳台。
当小鼠在一次训练中受到电击时,跳上跳台可逃避电击,从而获得记
忆。记忆障碍模型组动物在训练前注射胆碱受体阻断剂——樟柳碱或
东真若碱造成记忆障碍,在一定时间内学习记忆能力下降,跳下潜伏
期缩短,跳下次数增加。通过记忆障碍模型动物可观察补益药复方党
参对小鼠记忆障碍的改善作用。
智力低下多见于虚证,是由于气血亏损,心脾两虚导致肾精不足,
髓海不充所致。许多具有补益作用的中药及其复方制剂常有益智、增
强记忆和填髓补脑等功效。
【器材】小鼠跳台仪:为一个60cmx12cmx18cm的被动回避反
射箱,箱内用不透明的黑色塑料板分隔成5间,箱底铺以铜栅,铜丝
直径为2mm,间隔为5mm。每间左后方放置f高和直径均为
405cm的橡皮垫,作为跳台。可调变压器、秒
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 业务总包合同范本
- 单位小区养鸡合同范本
- 交货合作合同范本
- 人才引进战略合同范本
- 产品代加工合同合同范本
- 合同范例类别
- 合伙开店出资合同范本
- 化肥经销合同范本
- 临街商铺门面转让合同范本
- 厂房安装电源合同范本
- 植物保护学通论-植物病害分析课件
- 药品经营质量管理规范(GSP)实用教程教学课件
- 机械基础 第2版全书电子教案
- 外研社一起英语四年级下册课文
- DB32-T 2705-2014公路工程地质勘察监理规程-(高清现行)
- After-Effects影视特效设计教程完整版全套ppt课件
- 羊营养代谢病
- 医疗设备清单
- 《夏夜多美》课件(ppt)
- 社区院落停车管理制度
- 幼儿园小班《保护牙齿》(课堂PPT)
评论
0/150
提交评论