【赤霉素处理对甜柿贮藏性的影响实证探究6900字（论文）】

赤霉素处理对甜柿贮藏性的影响实证研究摘要研究了赤霉素处理对甜柿果实采后保鲜效果的影响。以采后成熟前期的次郎果实为实验材料，在室温下，使用300mg/L赤霉素(GA3)溶液，300mg/L无水乙醇溶液处理甜柿果实，研究了贮藏过程中与甜柿果实成熟软化相关的生理指标和营养成分的变化，以阐明赤霉素(GA3)处理对甜柿果实在贮藏中保鲜效果的影响。结果表明:与对照组果实对比，赤霉素处理后的次郎果实可以有效减少果实质量的损失，保持果实硬度，降低果实黄变程度；在生化反应方面对保持VC的含量、延缓类胡萝卜素的积累、维持可滴定酸的含量、减少类黄酮和总酚含量的积累、延缓CAT和POD的活性上有一定的作用。综上所述，赤霉素处理能有效延缓了采后的次郎果实衰老进程，可以保持甜柿在采后贮藏期的果实品质。关键词：甜柿；赤霉素（GA3）；贮藏品质目录1577 前言次郎甜柿为中国引进的日本品种，表现出极强的适应性，从南至北均适宜栽培。1976年保山市首次引进甜柿树种次郎，经多年的筛选培育，选育出适应保山本地的气候条件和地理环境的保山甜柿，且不需配置授粉树，成熟时期较早，果实丰满肥硕，果皮色泽明亮鲜艳，口感脆甜可口；树种的抗逆性强，环境适应性优，产量丰硕。次郎甜柿在采收后于0～3℃低温条件冷藏下，贮藏期限可达3个月以上。作为植物体内五大内源激素之一的赤霉素REF_Ref23511\r\h[1]，在植物生长发育的各个阶段都有着无法替代的调节和控制作用。在火龙果REF_Ref9121\r\h[2]，南果梨REF_Ref9252\r\h[3]，甜樱桃REF_Ref9308\r\h[4]，香蕉REF_Ref9379\r\h[5]，枸杞REF_Ref9445\r\h[6]，芒果REF_Ref9487\r\h[7]，葡萄REF_Ref9530\r\h[8]等果实上的采后生理研究表明，赤霉素对采后果实的处理可以延缓果实的后熟衰老进程，对果实的采后贮藏具有良好的的保鲜作用。最近几年，用赤霉素处理采后蔬菜、水果的保鲜贮藏方面的研究颇多，但对柿子的研究大多是像潘军REF_Ref9575\r\h[9]，朱仁胜REF_Ref9608\r\h[10]等，通过采前喷施赤霉素，探究赤霉素对柿子的生长发育及品质形成的影响；而运用赤霉素处理的采后保鲜效果方面，付润山REF_Ref10891\r\h[11]的实验表明了用赤霉素处理能有效延缓柿果实在贮藏期的后熟及软化，延长了富平尖柿的贮藏时间。现今，赤霉素在柿果实采后保鲜方面研究鲜少，特别是甜柿。因此，本实验以成熟前的次郎甜柿为材料，通过研究在常温下赤霉素处理对次郎贮藏品质的相关生理和生化变化的相关关系，为采后甜柿的贮藏保鲜技术提供理论支持，延长甜柿的货架期，以获得更高的收益。2材料与方法2.1实验材料及仪器试验材料为保山市隆阳区蒲缥镇当年9月中下旬收获的成熟前期的次郎甜柿。人工进行采摘，并选取没有病虫害，果面无机械损伤，成熟度相似，果实色泽、果形大小基本一致的柿果。在柿果的指标测定过程中需要使用的主要仪器：-18℃冰箱，日本岛津UV-19OOi紫外分光光度计，TGL-20高速冷冻离心机，GY-4水果硬度计，恒温水浴锅，电子分析天平。2.2实验设计选择赤霉素化学试剂，配置成浓度300mg/L的GA溶液，再用无水乙醇配置300mg/LCK溶液。150个柿果分为三组，GA组和CK组的柿果用喷壶喷湿，放在垫了滤纸的桌面，空白对照组（Blank）不做任何处理，处理当天开始取样，每隔三天取一次样，分别于0d，3d，6d，9d，12d，15d对样品进行质量的称重，硬度的测定，色差的对比，且每一处理每次随机取样，进行三个生物学重复，取好的样品放置于-18°C的冰箱中冷冻保存，以便后期的实验。2.3指标测定及实验步骤2.2.1生理指标测定果实重量测定：用电子分析天平进行称量。果实色差测定：用比色卡进行比色测定。果实硬度测定：每次测定硬度时随机取六个柿果，用GY-4水果硬度计在柿果赤道部进行测定，每个单果四面测定，结果取平均值。2.2.2生化指标测定1）Vc、可滴定酸含量的测定：可滴定酸的含量测定--酸碱滴定法，Vc的含量测定--2，6-二氯靛酚滴定法。2）利用紫外分光光度计测定总糖（蒽酮比色法），类胡萝卜素，类黄酮，总酚的含量，以及过氧化氢酶和过氧化物酶的活性。2.2.3营养成分测定的实验步骤测定VC含量：称取10g柿果样品，放入研钵中，加入10g偏磷酸溶液，迅速研磨成匀浆。然后称取匀浆样品10g，用偏磷酸溶液于100毫升容量瓶中定容并摇匀，过滤备用。准确吸取10毫升滤液置于锥形瓶中，用标定过的2，6-二氯靛酚溶液进行滴定，直至溶液呈粉红色，且15s不褪色为滴定终点。同时进行空白试验。测定VA含量：称取0.5g柿果样品，加入5毫升浸提液，30min避光浸提，12000r·min离心10min，吸取上清液到25毫升容量瓶中，再次加5毫升无水乙醇于沉淀物中，重复以上操作，直到橙红色果肉样品变成白色即可。最后用浸提溶剂定容，用紫外分光光度计测定提取液在450nm处的吸光值。测定可滴定酸含量：准确称取柿果样品10.0g，放入研钵中研磨，将磨碎的样品转移到100毫升容量瓶中，用蒸馏水冲洗研钵2至3次，一并转入到容量瓶中，并用蒸馏水定容至刻度，摇匀，待静置30min后过滤并收集滤液。吸取20毫升滤液至三角瓶中，加入2滴1%的酚酞指示剂，用已标定的氢氧化钠溶液进行滴定反应。滴定到溶液呈粉色，且在30s内溶液不褪色时为滴定终点(pH=8.1~8.3)，记录氢氧化钠滴定时的用量，进行三次平行实验。同时以蒸馏水代替滤液进行空白对照实验。测定类黄酮和总酚含量：准确称取2.0g甜柿样品，加入少量经预冷处理的1%盐酸-甲醇溶液，置于研钵中研磨匀浆后，转入20毫升的刻度试管中。再用1%盐酸-甲醇溶液冲洗研钵1至2次，一并转移到刻度试管中，定容至刻度，摇匀后，在4℃冰箱中避光提取20min。期间需数次摇动。然后过滤并收集滤液待用。分光光度计测定时用1%盐酸-甲醇溶液作空白调零，取滤液分别于波长280nm、325nm处测定溶液的吸光度值，重复三次。以每克样品组织在波长280nm处吸光度值表示总酚含量，即OD280/gFW；在波长325nm处吸光度值表示类黄酮物质含量，即OD325/gFW。总糖的测定：准确称取0.5g甜柿样品，加入约3毫升蒸馏水，置于研钵中磨成匀浆，转入100毫升三角烧瓶中，用约12毫升的蒸馏水冲洗研钵2～3次，将洗涤液转移到三角烧瓶中，搅拌均匀，在沸水浴中水解30min，冷却，用蒸馏水定容至刻度线，过滤，吸取10毫升滤液置于锥形瓶中，用蒸馏水定容至100毫升，稀释成1000倍的总糖水解液。测定还原糖的含量：吸取1毫升总糖水解液置于试管中，于冰浴中浸泡冷却，然后加入4毫升的蒽酮试剂，在沸水浴中准确加热10min，取出后用自来水冷却，于波长620nm处测定吸光度值，其他条件与做标准曲线相同，计算样品的含糖量以测得的吸光度值由标准曲线查算得出。测定过氧化氢酶活性：打开离心机电源，设定4℃进行机器预冷。准确称取0.3g的甜柿样品，置于研钵中，加人经4℃下预冷的pH=7.8磷酸缓冲液7毫升后研磨成浆，在4000r/min的条件下离心15min(4℃)，离心管中上清液即为CAT粗提液。取三支10毫升的样品管，其中两支是样品测定管（S1、S2），一支是空白对照管（S0），按顺序将三支试管中依次加入以下试剂：CAT粗提液0.2毫升、pH=7.8磷酸缓冲液1.5毫升、蒸馏水1.0毫升，先将SO试管置于100℃的水浴锅中加热煮沸1min，以彻底杀死酶活性并冷却至室温。然后三支试管一同放入25℃的水浴锅中同时预热，接着逐管加入0.3毫升0.1mol/L的过氧化氢溶液，每加完1管立即计时，并迅速倒入石英比色皿中，在240nm处测定吸光度值，且每隔1min读数1次，共测定4次，待三支试管全部测定结束后，计算CAT活性。测定过氧化物酶活性：准确称取0.3g甜柿样品，并加入8毫升0.05mol/L磷酸缓冲液(pH=5.5)于研钵中研磨成匀浆，将所有匀浆液全部转入到10毫升的离心管中进行离心(3000r/min，10min)，离心管中上清液即POD粗提液。在试管中依次加入2.9毫升0.05mol/L磷酸缓冲液(pH=5.5）、1.0毫升2%过氧化氢溶液、1.0毫升0.05mol/L愈创木酚、0.1毫升粗提酶液。以经过5min加热煮沸的酶液为对照，反应体系中加入酶液后，马上在34℃的温水浴中3min保温反应，然后迅速稀释成同体积大小，在470nm波长下测定吸光度值，隔1min记录1次吸光度A470，共记录5次，以每分钟内A470变化0.01为1个酶活性单位(U)。3结果及分析3.1赤霉素处理对次郎生理变化的影响3.1.1对柿果重量的影响由图1可见，随着在常温下贮藏时间的延长，次郎果实的重量呈现出下降的趋势。采后的甜柿经过的GA、CK、Blank三个处理后，随着贮藏时间的推移，次郎甜柿的质量都呈现下降趋势，但GA组的质量下降速度明显低于CK组和Blank组，但无明显差异性。说明采后GA处理能对次郎果实质量随时间的延长而降低有抑制作用。图1赤霉素处理对次郎质量的影响图1赤霉素处理对次郎质量的影响3.1.2对柿果硬度的影响能够反映果实品质和贮藏性的重要指标之一是果实硬度。随着贮藏时间的延长，甜柿果实在呼吸代谢作用下，甜柿硬度呈下降趋势，果肉软化，储藏性能下降。由图2可见，其中，CK组和Blank组的果实硬度下降比较快，从图中可以看出CK组和Blank组的硬度与GA组相比，果实硬度明显低于经赤霉素处理的GA组，各处理之间无明显差异。结果表明，赤霉素处理对甜柿果实保持硬度有良好的效果。图2赤霉素处理对次郎硬度的影响图2赤霉素处理对次郎硬度的影响3.1.3对柿果色差的影响次郎甜柿在室温下贮藏时叶绿素会随时间的推延而不断降解，果皮颜色会渐渐转黄加深，果蒂也会褐变干枯。由图3可见，各处理组的甜柿果皮色差都在不断上升，果皮转黄度不断增大，但经赤霉素处理的GA组果实色差明显低于CK和Blank两组，果皮转黄速度也低于另外两组。可见，赤霉素处理能降低次郎果实果皮转黄的速度，提高果实的保鲜率。作为植物内源激素之一的赤霉素具有生长调节作用，它具有很强的生物活性，在抑制果蔬色泽改变上，青花菜REF_Ref8743\r\h[12]、辣椒REF_Ref8801\r\h[13]上的研究表明，赤霉素对延缓叶绿素的分解起作用，与本实验结果相似。图3赤霉素处理对次郎色差的影响图3赤霉素处理对次郎色差的影响3.2赤霉素处理对次郎生化变化的影响3.2.1赤霉素处理对甜柿VC含量的影响次郎甜柿富含丰富的维生素C，而维生素C是人类所需营养中最重要的一种，且比普通水果高出一至两倍。由图4可见，三个处理组果实的维生素C含量在贮藏期间均呈现下降的趋势，其中GA组的维生素C含量最高，其他两个处理的维生素C含量较低。相对于GA组，CK和Blank两组的维生素C含量下降得的较快，根据在香蕉REF_Ref9379\r\h[5]，甜樱桃REF_Ref9308\r\h[4]上的研究结果，表明赤霉素处理可以在一定程度上保持采后甜柿果实贮藏过程中的维生素C的含量，保证贮藏的果实品质。图图4赤霉素处理对次郎维生素C的影响3.1.2赤霉素处理对甜柿类胡萝卜素含量的影响果实所表现出的色泽是由底色部分及表色部分构成，底色主要由叶绿素、类胡萝卜素等决定的，通常表现为绿色或黄色；表色主要决定于花青素，一般表现为红色。随着次郎果实的发育成熟，叶绿素逐渐降解，类胡萝卜素、花青素逐渐积累成为优势底色。随着贮藏时间的延长，各处理果皮类胡萝卜素含量总体呈上升趋势如图5所见，三个处理组的类胡萝卜素都呈上升的趋势，但其中GA组的类胡萝卜素相较于CK组和Blank组上升速度趋势较低，表明采后赤霉素处理对果实内部类胡萝卜的生成起抑制作用，延缓了类胡萝卜素的积累，致使果实转黄速度慢，推迟了果实的成熟衰老。另一方面表明采后赤霉素处理对果实贮藏有明显的保鲜效果。图5图5赤霉素处理对次郎类胡萝卜素的影响3.1.3赤霉素处理对甜柿可滴定酸含量的影响次郎果实是甜柿品种，果肉内的可滴定酸含量会随果实的生长发育而不断降低，采后的次郎果实在贮藏过程中，果实内部所含有机酸作为呼吸底物会被逐渐消耗，有一部分有机酸会转化为糖类。由图6可见，果实内的可滴定酸含量随贮藏期延长会逐渐减少，呈明显的下降趋势，但GA组的含酸量明显高于CK组和Blank组，由此可看出赤霉素处理对果实内部有机酸的含量具有保持作用。图5赤霉素处理对次郎可滴定酸图5赤霉素处理对次郎可滴定酸的影响3.1.4赤霉素处理对甜柿类黄酮和总酚含量的影响植物体内存在着大量酚类物质，这些酚类物质是重要的次级代谢物，一方面它具有一定的抗氧化能力，可以修复自身伤害，另一方面作为酶促褐变反应的底物，参与酶促褐变反应。图6和图7所示为赤霉素处理对甜柿类黄酮和总酚含量的影响。如图6所示，三个处理组的果实中类黄酮含量随着贮藏时间的延长而下降，总体呈下降趋势，各组间差异不显著，但类黄酮的含量CK＞Blank＞GA。图7所示三组处理总酚含量总体呈下降趋势，各组间差异不显著，总酚含量Blank＞CK＞GA。根据图6和图7表明赤霉素处理能有效减轻甜柿中类黄酮和总酚含量的积累。图图6赤霉素处理对次郎类黄酮含量的影响图图7赤霉素处理对次郎可总酚含量的影响3.1.5赤霉素处理对甜柿总糖含量的影响总糖主要指具有还原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖，麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。如图8所见，三个处理组的果实总糖含量有所差异，GA组的总糖含量总体呈一个上升的趋势，在第12天时出现最大值；CK组的总糖含量在第9天出现最大值，接着总糖含量呈下降趋势；Blank组的总糖含量在第6天出现最大值，其后一直处于下降趋势。由此可见赤霉素处理能有效促进次郎果实可溶性总糖的积累。图图8赤霉素处理对次郎总糖含量的影响3.1.6赤霉素处理对甜柿过氧化氢酶和过氧化氢酶含量的影响SOD和CAT是植物抗氧化防御系统中重要的两个抗氧化酶，SOD将超氧自由基转化成H2O2，而CAT将H2O2分解成水和氧气，从而减轻活性氧损伤。过氧化氢酶在植物所有组织中无处不在，其活性与植物代谢的强弱、抗寒性、抗病性具有一定的关系。由图9所见，赤霉素处理的GA组CAT活性随时间的延长不断呈下降趋势；CK组和Blank组则呈现一个相反的现象，第6天的时候，CK组达到最小值，Blank组则是达到最大值；第12天的时候CK组下降，Blank组则上升。李夫庆的不同浓度赤霉素对樱桃果实CAT活性的研究，表明高浓度的赤霉素(150mg/L）能有效延缓CAT活性高峰的出现并会抑制后期的下降，据图看出CK组的活性高峰在第12天，Blank组的活性高峰在第六天，推测GA组的活性高峰可能会出现在第15天，而高浓度赤霉素（200mg/L）对CAT活性起到延缓作用。POD是苯丙烷代谢途径中的两个末端氧化酶之一，能将酚类物质氧化成褐色物质。如图10所见，赤霉素处理的GA组POD活性明显高于CK组和Blank组，且三个处理组的POD活性都呈现下降趋势，POD活性GA＞Blank＞CK。图中GA组POD活性在0至3天内缓慢上升，第三天以后呈缓慢下降趋势，与其它两组相比赤霉素处理的GA组的POD的活性受到延缓作用，保持了POD的活性。图图9赤霉素处理对次郎可CAT的影响图10图10赤霉素处理对次郎POD的影响4结语植物内源激素独立或协同的方式调节植物的生长和发育，这种调节可通过使用外源激素或人工合成植物生长调节剂来改变植物体内的内源激素，进而使得调控果实的生长发育和品质形成成为一种可能REF_Ref5793\r\h[14]REF_Ref5838\r\h[15]REF_Ref5845\r\h[16]。内源植物激素中的赤霉素，对许多果蔬都有延缓衰老的作用。在火龙果、南李果、芒果等果实上的研究表明，经赤霉素处理后能够明显的抑制了果实贮藏期的呼吸强度、延缓果实VC含量的降低，推延常温贮藏时果皮转黄程度，减缓果实的软化速度，延缓果实成熟进程，有效地保持在采后贮藏期的果实品质。本实验表明了赤霉素处理对次郎果实生理变化中的质量减少、硬度的降低和转黄得快慢有一定的延缓作用；在生化反应中对保持VC的含量、延缓类胡萝卜素的积累、保持可滴定酸的含量、减轻类黄酮和总酚含量的积累、延缓CAT和POD的活性有一定的作用。赤霉素所具有很强的生物活性REF_Ref8853\r\h[17]在本实验中得到很好的验证，结果证实了赤霉素处理对提高次郎果实的贮藏品质有较好的效果，能使甜柿的鲜食品质处于较高的水平。赤霉素溶液用于采后次郎果实保鲜有着较好地效果，使用药剂用量小、成本低、操作简单且方便，能有效延长果实贮藏期，使得果实长久新鲜，甜脆可口，还能让甜柿错峰上市，不会发生柿果集中上市而引发供大于求的现象，致使价格低廉，收益差。经赤霉素保鲜处理后可有效延长果实货架期，以提高次郎的售价，提高果农种植积极性。保山学院本科毕业论文(设计)保山学院本科毕业论文(设计)参考文献曾凤，郭子娟，李雯.赤霉素对台农芒果保鲜效果的研究[J].广东农业科学，2016，43(05):112-117.巴良杰，罗冬兰.赤霉素处理对火龙果贮藏品质的影响[J].包装工程，2019，40(13):12-17.吕静祎，商馥兰，张梦媛，葛永红，励建荣，李灿婴，孟坤.赤霉素处理对南果梨贮藏品质的影响[J].食品工业科技，2017，38(24):282-286.李夫庆，张子德，李素玲，解茂蕾，赵丛枝，王岩.赤霉素(GA_3)处理对甜樱桃果实品质