食品安全国家标准 食品中阿力甜的测定编制说明

PAGE5PAGE7《食品安全国家标准食品中阿力甜的测定》编制说明一、标准起草的基本情况1、任务来源：中华人民共和国卫生部2、标准主要起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所3、主要起草人：研制人员姓名性别年龄职称职务专业单位项目负责人杨大进男44研究员副主任食品化学中国疾病预防控制中心营养与食品安全所主要参加人员蒋定国男36副研究员/分析化学中国疾病预防控制中心营养与食品安全所鲁杰女35副研究员/营养与食品卫生学中国疾病预防控制中心营养与食品安全所二、标准的重要内容及主要修改情况1、方法前处理条件的选择根据阿力甜的易溶于水特性可选择水作为提取溶剂，可使操作更简单、提取效果更好、更安全、更经济，提取时根据阿力甜在试样中的含量来确定水的体积。由于化学性质较为稳定，提取时不用考虑提取液的酸碱性影响。采用超声波振荡提取，提取溶液离心取上清液或者过滤膜即可供液相色谱分析。对于乳饮料，由于这类试样都是乳白色稳定胶体，为了得到透明的提取液，必须去除其中的蛋白质等成分，本方法采用了乙醇沉淀方法，操作简单快捷，沉淀效果较好。2、方法色谱条件的选择2.2.1流动相为了检测的方便以及考虑盐对色谱系统的影响和较长时间的平衡，本方法的流动相中不使用离子对，同时研究发现流动相只需要甲醇和水，调节好二者的体积比即可很好将阿力甜和杂质分开。通过反复试验排除了各种常用食品添加剂的影响，最后确定为：对于乳饮料类试样，选择流动相为甲醇：水＝45：55，流速为0.8mL/min；对于其它试样：选择流动相为甲醇：水＝53：47，流速为0.8mL/min。在流速为0.8mL/min，流动相比例变化对阿力甜保留时间的影响，见图1－6：AUAU-0.010.000.010.020.03Minutes2.004.006.008.0010.0012.0014.008.25012.214图1阿力甜的标准图（流动相为甲醇：水＝65：35）图2阿力甜的标准图（流动相为甲醇：水＝60：40）图3阿力甜的标准图（流动相为甲醇：水＝53：47）图4阿力甜的标准图（流动相为甲醇：水＝50：50）图5图6图5乳饮料的空白色谱图图6标准色谱图（流动相为甲醇/水＝45/55）（流动相为甲醇/水＝45/55）2.2.2波长的选择通过二极管阵列检测器获得的光谱图可知，在上述流动相中阿力甜在200.7nm处有最大吸收，故选择200nm为检测波长。图7在流动相中阿力甜的紫外扫描光谱图3、方法的精密度和准确度3.1固体试样称取12份0.25g空白试样，前6份添加5mL530μg/mL阿力甜标准溶液，后6份添加1mL530μg/mL阿力甜标准溶液，每份用重蒸水提取、定容到25mL,分别进行测定，求得方法的加标回收率及精密度，结果见下表。表1试样的加标回收率及精密度类别添加水平（g/mL）123456平均RSD（%）峰面积10626004302604979241576224289512421524241198724806063.8回收率（%）104.5104.797.1297.6697.3696.9799.723.8峰面积21.25513215335575250175459235515985729415467263.0回收率（%）96.0993.0092.5095.1596.1499.8695.463.0注：回收率是按外标单点法计算。从上表可知，对于固体试样，本方法的回收率和精密度较好，完全满足食品添加剂常规理化检验要求。3.2乳试样对5种乳饮料进行5次低浓度回收试验和5次高浓度回收试验。其结果见表2。表2中10次回收试验结果，回收率范围95.3%~100.6%，平均回收率97.8%，R.S.D为4.09%。表2乳饮料试样加标实验结果乳饮料名称试样本底值(g/kg)称取试样量(g)加入标准量(mg)定容体积(mL)计算值(mg)回收率(%)强人AD钙奶05.1540.425.00.38696.505.1050.1625.00.14993.1强人铁锌钙奶05.2240.425.00.39197.805.2630.1625.00.15999.4小洋人新一代05.1540.425.00.407101.805.1100.1625.00.165103.1太子奶05.1810.425.00.39498.505.2340.1625.00.164102.5金义AD奶05.1240.425.00.37593.805.1730.1625.00.14791.9从表2看出，对于液体试样，方法的准确度均满足建立方法的要求。4、方法的线性范围和最低检出浓度用浓度为100、50、25.0、10.0、5.0μg/mL的标准溶液系列，在规定的色谱条件下，进样10μL，进行测定，求阿力甜的阿力甜浓度—响应峰面积的线性回归方程，其方程为Y=24776X－80378，相关系数r=0.9995(相关系数范围为0.9994～0.9999)，表明在5.0μg/mL～100μg/mL浓度范围呈线性关系，符合定量要求，结果见表3。表3阿力甜的校正曲线测定浓度（μg/mL）10050.025.010.05.0峰面积25662291284967724446356391175428回归方程Y=24766X－80378r=0.9995注：方法的检出限：当S/N=3、进样10mL、称样量为5g和定容体积为25mL时，方法的检出限为0.002g/kg。方法的定量限：当S/N=10、进样10mL、称样量为5g和定容体积为25mL时，方法的定量限为0.006g/kg。5、方法抗干扰试验将苯甲酸、山梨酸、咖啡因、乙酰磺胺酸钾、三氯蔗糖、糖精钠、阿斯巴甜各标准品用水配成20mg/mL左右，色谱条件为流动相为甲醇：水＝53：47，流速为0.8mL/min，二极管阵列检测器扫描波长范围为190－400nm，分别进样分析。试验结果见下面表格和图谱：表4各种添加剂在流动相中的最大吸收波长和色谱保留时间类别阿斯巴甜苯甲酸山梨酸咖啡因乙酰磺胺酸钾三氯蔗糖糖精钠最大吸收波长λmax(nm)205196,224258204，271226／201保留时间Rt(min)4.3735.0397.6145.6722.94615min内未出峰3.144图8苯甲酸（BA）、山梨酸（SOA）、咖啡因、乙酰磺胺酸钾（AK）、糖精钠（SA）、三氯蔗糖和阿斯巴甜（APM）混合标准色谱图从以上表格和色谱图结果可知该7种常用食品添加剂在阿力甜出峰前1.4min已全部出峰，均不干扰阿力甜的测定。三、国际国内标准情况我国已于1994年就已批准使用，在GB2760-2007食品添加剂使用卫生标准中规定了阿力甜的添加食品范围和最大使用量。本标准是卫生标准的配套检测方法。目前