出口茶叶中三氯杀螨醇残留量检测方法 第2部分：液相色谱法

出口茶叶中三氯杀螨醇残留量检测方法第2部分：液相色谱法本部分规定了出口茶叶中三氧杀螨醇残留量检验的液相色谱检测方法。本部分适用于出口茶叶中三氧杀螨酶残留量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法茶叶中三氯杀螨醇残留用丙酮-正己烷(1:2,VIV)混合溶液提取，浓硫酸磺化净化后，用配紫外检测器的液相色谱仪测定，外标法定量4试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T682规定的一级水。4.2正己烷：色谱纯。4.4甲醇：色谱纯。4.6丙酮-正己烷(1:2,Wv量取50mL丙酮(4.1)和100mL正己烷(4.2)。混匀4.8三氧杀螨醇标准品：C₄HCL0,CAS号115-32-2,纯度≥99.5%,相对分子质量为3705。4.9三氧杀螨醉标准储备溶液：准确称取适量的标准品于100mL容量瓶中，用甲醇(4.4)溶解并定容至刻度线，配制成浓度为1.00mg/mL的标准储备溶液，于4℃冰箱中保存。4.10三氯杀螨醇标准工作溶液：将标准储备溶液用甲醇稀释至浓度为0.05m/L、0.1mg/L、0.2mg/L、5仪器和设备5.2分析天平：感量为0.01g和001mg.5.3激涡混合器。5.4离心机：不低于40007/min。5.5旋转蒸发仪。5.6氮吹仅。5.7超声水浴仪。5.8具塞塑料离心管：50mL。6试样的制备与保存6.1试样的制备取代表性样品100g。采用粉碎机粉碎后。装人容器内，密闭并标明标记6.2试样的保存试样于室温保存。取样、制样及保存过程中应防止试样受到污染或者残留物含量发生变化。7样品处理准确称取1g均匀试样(精确到0.01g)于50mL离心管中，移入15mL丙酮-正己烷(4.6)溶液，于漩涡混合器上剧烈旋混30s,然后移入离心机中，于7000xmin离心2min,取出，将上清液转入旋燕瓶中，于装有残渣的离心管中再移入15mL丙酮-正己烷(4.6)重复提取一次，合并提取液于旋蒸瓶中，在40℃下旋转蒸发至近干，待净化在旋至近干的旋蒸瓶中加入5mL正己烷(4.2),于超声水浴仪中超声30s,取出，级慢加入0.5mL浓硫酸(4.5)于旋蒸瓶中。轻轻摇动，然后置于漩涡混合器上稍作旋混，用胶头滴管吸取上层清液于15mL玻璃离心管中，于离心管中再加入0.5mL浓硫酸，旋混30s,于3000xmin离心2min,取上层清液于另—15aL玻璃离心管中，重复以上操作，直至上层清液澄清透明，备用。将盛有澄清上层清液的离心管，于氮吹仪下吹至正己烷(4.2)挥发完毕，用甲醇(4.4)定容至1.00mL,供液相色谱仪分析。8.1液相色谱条件液相色谱条件如下：e)测定波长：230mmd)流速：1.0ml/min38.2定性测定进行样品测定时，如果样品色谱图出现与标准物质保留时间一致的色谱峰，且图谱一致，则可以判断样品中存在三氧杀螨醇。三氯杀螨醇标准溶液的色谱图参见附录A。根据8.1液相色谱测定条件对系列标准溶液(4.10)和样液等体积进样测定。样品中待测物含量应在标准曲线范围之内，如果含量超出标准曲线范围，应进行适当稀释后测定。8.4空白试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行。试样中三氯杀螨醇的含量利用数据处理系统计算或按式(1)计算获得，计算结果需扣除空白值。并保留两位有效数字：…式中：X—试样中三氯杀蛾部残留量，单位为毫克每千克(mg/kg);—从标准工作曲线中查得的三氧杀螨醇浓度，单位为毫克每升(mg/L);v——样液最终定容体积，单位为毫升(mL);m—称取的试样量，单位为克(g)。10定量限和回收率10.1定量限本方法定量限为：005me/kg。不同茶叶基质(绿茶、红茶，的茶，青条、白茶、黑茶)中不同添加浓度水平下的回收率范围参(资料性附录)三氲杀螨醇标准溶液的液相色谱图(5mg/L)图A.1三氧杀螨醇标准溶液的液相色谱图(5mg/L)(资料性附录)三氧杀螨醇在各种茶叶中各添加水平的回收率范围表B.1HPLC-DVD检测三氧杀螨醇在各种茶叶中各添加水平的回收率范围%回收率/强55白茶555SN/T0348.2"Methodforthedeterminationofcofolresiduesintenforcontainstwoparts:Parttwo:LiquidchomatoThispartisbelongedtothepartiwaofSN/TThisstandandisdnaftedbyGB/T1.1ThispartreplaceSN/T0348.2-95"Methotlorthedeterminationofcofolrechomatography",ComparedwithSN/T0348.2-95,themaintechulalchangs—enhancedthesensitiv—increasedsamplematrixsperPleasenotethatsomeoftheelementsofthisstandardmayinwohepatents,buttheSandandsOnganizationdoesnotissumeresponsibiliyforidentiThisstandardwaspmposedandvestedbythechangeoftheCerifcationandAcredThissdandardwasdah.tho4mgingEnty-EaitInspectionandQuarantineBureauofRepublieofChina.ThemaindraftersofthisstandandwereLiZhang.ShunuiCao,CunxianXi,BobinTang,SiyunTan,XiaolingZheng,XianliangLi,GuominWangThepreviousversionsofthisstandandisSN/T0348.2—95.9ThisstandardspecifiesmethodforthedeterminationofdicofalresiduesinperformanceliquidchomatoThisstandandisaplicabletothedeterminationandconfimalionofdicofolresiduesThereferenceddocumerlswereindispensallefortheapplicationofthisstandanonlythedatededitionwereappliedtothisstandard.Forundatedrelerences,theamendments)wereaplicablGB/T682AnalysisoflaboratorywaterspeciliationsanlTheresiduesofdicofolinleawereextartedbytemixedsolutionofacetone-m-hexane(1:2.V/V.whichwerecleanedupbyconcentratedsalfunicacidanddetectusingeatemalstandardnethodtoqUnlessotherwisesperified,allhpetshouldbeanalytieillypure,waterwisalevelofwatercompwithGB/T6682.4.3AcetonitnleHPLCgra4.5SulfuricacidGuarantIfthecontentisoutsidetherangeofthestandandcune,itshouldbemeasuredafteTheoperationofblanklestwasthesameasthedescribedinthemethodofdeterminationwithoutsamples.9CalculationandexpressionThecontentofdicofolinthesamplewascalcolatedbyusingthedatapoce(1).TheblankvaluewassubracteadfomtheresultandtwosignificantX—theconeentratinofdicladintestsolutioe—theconcentrationofstandandworkingsolutionof4-hydroxybenzoieV—olumeofsample,mLm—massofsample,g.LimitofQuantitationofHPLCdeterminationwas0.05mg/kg.Thereo