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文档简介
第2讲微生物的培育与应用A组基础巩固练1.做“微生物的分别与培育”试验时,下列叙述正确的是()A.高压灭菌加热结束时,打开排气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培育基溅到皿盖上C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培育皿中菌落时,应标记在皿底上【答案】D【解析】在高压灭菌的操作过程中,加热结束后应让灭菌锅内温度自然下降,待压力表的指针指到零时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子。倒平板时,用左手将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不是完全取下放到一边。接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后,再用其挑取菌落。在微生物的培育中,一般将培育皿倒置,在皿底上用记号笔做标记。2.有关微生物的培育与应用,下列说法正确的是()A.通常运用液体培育基分别获得细菌单菌落B.大肠杆菌的纯化培育过程包括培育基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段C.接种前需对培育基、培育皿、接种环、试验操作者的双手等进行严格灭菌处理D.某一稀释度的3个平板的菌落数依次为M1、M2、M3,以M2作为该样品菌落估计值【答案】B【解析】通常运用固体培育基分别获得细菌单菌落,A错误;大肠杆菌的纯化培育过程包括培育基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段,B正确;培育基、培育皿、接种环都须要运用恰当方式进行灭菌处理,而试验操作者的双手只能进行消毒而不能进行灭菌处理,C错误;某一稀释度的3个平板的菌落数依次为M1、M2、M3,为了保证结果精确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数,以它们的平均值作为该样品菌落数的估计值,D错误。3.平板涂布是分别菌种常用的方法,下列相关叙述不恰当的是()A.固体培育基灭菌后,应冷却至50℃左右时倒平板B.倒好的平板需马上运用,以免表面干燥,影响菌种的生长C.平板涂布分别到的单菌落需进一步划线纯化D.平板涂布法既可用于微生物的分别,也可用于微生物的计数【答案】B【解析】固体培育基灭菌后,应冷却至50℃左右时倒平板,温度过低易导致污染,温度过高无法操作,A正确;倒好的平板须要冷却后运用,且不宜久存,以免表面干燥,影响接种后菌种的生长,B错误;平板涂布分别到的单菌落仍需进一步划线纯化,以利于菌种保藏,C正确;平板涂布法既可用于微生物的分别,也可用于微生物的计数,D正确。4.(2024年广东九佛中学一模)野生型大肠杆菌菌株能在基本培育基上生长,氨基酸养分缺陷型突变株无法合成某种氨基酸,只能在完全培育基上生长,下图为纯化某氨基酸养分缺陷型突变株的部分流程图,①②③④代表培育基,A、B、C表示操作步骤,D、E为菌落。下列叙述错误的是()A.图中①②④为基本培育基,③为完全培育基B.A操作的目的是提高突变率,增加突变株的数量C.B的正确操作是用涂布器把菌液匀称地涂布在②表面D.经C过程原位影印及培育后,可从④中挑取D进行纯化培育【答案】A【解析】野生型大肠杆菌菌株能在基本培育基上生长,氨基酸养分缺陷型突变株无法合成某种氨基酸,只能在完全培育基上生长,依据题干信息和图形分析,图中①②④为完全培育基,③为基本培育基,A错误;紫外线可以提高突变的频率,A操作的目的是提高突变菌株的浓度,B正确;B操作是将菌液滴加到培育基表面,再用涂布器将菌液匀称地涂布在②表面,C正确;从图中可看出,D在基本培育基中无法生长,在完全培育基中可生长,说明D是氨基酸缺陷型菌落,故经C过程影印及培育后,可从④培育基中挑取D菌落进行纯化培育,D正确。5.筛选淀粉分解菌需运用以淀粉为唯一碳源的培育基。接种培育后,若细菌能分解淀粉,培育平板经稀碘液处理,会出现以菌落为中心的透亮圈(如图),试验结果见下表。菌种菌落直径:C/mm透亮圈直径:H/mmH/C细菌Ⅰ5.111.22.2细菌Ⅱ8.113.01.6有关本试验的叙述,错误的是()A.培育基除淀粉外还含有氮源等其他养分物质B.筛选分解淀粉的细菌时,菌液应稀释后涂布C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉实力的差异【答案】C【解析】微生物的培育基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等,A正确;筛选分解淀粉的细菌时,试验流程为取样→梯度稀释→样品涂布到鉴别分解淀粉的细菌的培育基上→选择产生透亮圈的菌落,B正确;由题意可知,淀粉被分解后经稀碘液处理才能出现透亮圈,淀粉分解须要淀粉酶的催化,图中两种细菌都出现了以菌落为中心的透亮圈,说明以上两种细菌均能将淀粉酶分泌到细胞外来发挥作用,C错误;透亮圈是细菌分解淀粉得到的,H表示透亮圈直径,C表示菌落直径,因此H/C值可以反映两种细菌分解淀粉实力的差异,即H/C值越大,细菌分解淀粉的实力越强,D正确。B组实力提升练6.从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是采集菌样→富集培育→纯种分别→性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同,获得志向微生物的第一步是从合适的环境采集菌样,然后再按肯定的方法分别、纯化。例如,培育噬盐菌的菌样应从______________环境中采集。
(2)富集培育指创设仅适合待分别微生物旺盛生长的特定环境条件,使其数量大大增加,从而分别出所需微生物的培育方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培育应选择___________________________的培育基,并在______________条件下培育。
(3)接种前要对培育基进行______________处理。在整个微生物的分别和培育中,肯定要留意在________条件下进行。
(4)如图是采纳纯化微生物培育的两种接种方法接种后培育的效果图,请分析接种的详细方法。获得图A效果的接种方法是__________,获得图B效果的接种方法是____________。一同学在纯化土壤中的细菌时,发觉培育基上的菌落连成一片,最可能的缘由是__________________,应当怎样操作才可避开此种现象?__________________。
【答案】(1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温(3)高压蒸汽灭菌无菌(4)稀释涂布平板法平板划线法菌液浓度过高增大稀释倍数(或培育过程被杂菌污染严格无菌操作;或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌每划一个新区域前都要对接种环进行灭菌处理)(缘由与操作要对应)7.(2024年广东汕头模拟)溶菌酶又称胞壁质酶,是一种能水解黏多糖的碱性酶,使细菌细胞壁的不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细菌细胞裂开内容物溢出而使细菌溶解。探讨发觉,溶菌酶在酸性条件下加热到100℃仍具有活性。回答下列问题:(1)为验证上述发觉,探讨性学习小组选择了某种常见细菌,分别配制了平板培育基。培育基的基本成分应包括______________、无机盐和水。将细菌接种到平板培育基后再加入肯定量的溶菌酶,在____________条件下培育一段时间,对平板上的菌落进行计数。
(2)上述试验应采纳的接种方法是__________________________________。
该试验中,运用前须要进行灭菌处理的材料用具有____________________________(至少写两种)。
(3)探讨性学习的指导老师认为,该小组的试验在设计上至少存在两个方面的问题,无法得出预期的结论。该试验思路应如何修改?_______________________。
(4)在酸奶中加入肯定量的溶菌酶,然后用巴氏消毒法处理,处理后的溶菌酶______(填“能”或“不能”)起到防腐作用,缘由是______________________。
【答案】(1)碳源、氮源100℃的酸性(2)稀释涂布平板法培育基、培育皿、涂布器等(3)①设置没有添加溶菌酶(或“添加等量无菌水”“添加等量缓冲液”等)的比照组;②选择能耐高温的细菌进行培育(4)能溶菌酶酸性条件下加热到100℃仍具有活性,巴氏消毒法的加热温度不超过80℃,因此仍具有杀菌功能【解析】(1)培育基一般都含有碳源、氮源、水和无机盐四类养分物质;探讨发觉,溶菌酶在酸性条件下加热到100℃仍具有活性,因此为验证上述发觉,将细菌接种到平板培育基后再加入肯定量的溶菌酶,在100℃的酸性条件下培育一段时间,对平板上的菌落进行计数。(2)菌体计数时采纳的是稀释涂布平板法接种;为防止杂菌污染,试验中运用的培育基、培育皿、涂布器等均须要灭菌。(3)该试验的目的是验证溶菌酶在酸性条件下加热到100℃具有活性。为证明相应条件下酶仍有活性,须要设置没有添加溶菌酶的比照组;同时还须要选择能耐高温的细菌进行培育,以保证菌体的死亡是溶菌酶作用的结果,并非不耐高温而死亡。(4)由于溶菌酶在酸性条件下加热到100℃仍具有活性,巴氏消毒法的加热温度不超过80℃,因此在酸奶中加入肯定量的溶菌酶,然后用巴氏消毒法处理,溶菌酶仍具有杀菌功能。8.如图表示探讨者从土壤中筛选分解尿素的细菌技术的相关试验,请据图回答下列问题:(1)进行过程①和②的目的分别是______和________________________;图中弧线箭头上“?”的详细操作是________。
(2)进行培育基配制和灭菌时,灭菌与调整pH的先后依次是__________________。倒平板时,待平板冷却凝固后,应将平板倒过来放置,并用记号笔在皿底上标明培育微生物名称、平板上培育样品的稀释度、制作者姓名、培育日期及________等信息。纯化菌种时为了得到单一菌落,常采纳的接种方法是__________和______________。
(3)在以尿素为唯一氮源的培育基中加入________。培育后,若出现________色就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。
(4)探讨者可以通过视察培育形成的菌落的__________、隆起程度等特征,来推断培育基上是否感染了其他细菌。在试验中,探讨者每隔24小时统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止__________________________。
【答案】(1)选择培育增加分解尿素的细菌的数量挑出菌落(2)先调整pH后灭菌培育基种类平板划线法稀释涂布平板法(3)酚红指示剂红(4)形态、大小、颜色因培育时间不足导致遗漏细菌数目9.聚对苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料类水瓶的重要原料,科学家发觉了以PET为碳源和能量来源的细菌,该发觉对PET类材料的回收利用、环境治理意义重大。请回答下列问题:(1)试验小组欲从土壤中获得PET降解酶,需将土壤样品置于以__________为唯一碳源的培育基中进行选择培育,其目的是_______________________________。
(2)该试验小组选取PET浓度为800mg·L-1的富集液进行系列稀释,分别取1×103、1×104、1×105倍数的稀释液0.1mL涂布于培育基上,每个稀释倍数涂布三个平板,各平板的菌落数分别为(286、298、297),(35、32、31),(36、7、2)。不适合用于计数的为________倍数的稀释液,用另外两组稀释倍数的稀释液进行计数得到的细菌数不一样的缘由可能是______________________________________________。
(3)倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰,目的是________________________。在倒平板的过程中,假如培育基溅在皿盖与皿底之间的部位,则这个平板不能用来培育大肠杆菌,缘由是____________________________________。用平板划线法纯化PET降解菌的过程中,在其次次及其后的划线操作时,须从上一次划线的末端起先划线,缘由是____________________________。
【答案】(1)PET增加PET降解菌的浓度,以确保能分别得到目的菌(2)1×105稀释倍数为1×103时,更多的菌落混连在一起,导致计数单菌落时结果小于稀释倍数为1×104组的结果(3)灭菌,防止微生物污染空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生使细菌数目随着划线次数的增加而渐渐削减,最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落10.(2024年广东茂名二模)探讨人员在某造纸厂旁边土壤采样筛选出菌株H,以玉米芯(玉米棒脱粒后的剩余部分,含较多的木聚糖)为原料,在试验室发酵生产木寡糖等高附加值低聚糖,以期提高玉米的整体利用价值。(1)生产实践中,常在碱性条件下高温处理玉米芯以提取木聚糖。为筛选出能耐高温耐碱性的木聚糖分解菌H,首先制备以木聚糖为______________的固体培育基,调整培育基pH=10.0,然后将土壤加入含有________的锥形瓶中稀释,用________________法将菌种稀释液接种到培育基,在50℃环境中培育以获得单菌落。
(2)基于菌株H的特性,探讨人员设计了如上图所示的发酵设备,该设备的限制系统需感应____________________等理化性质的改变,以保证良好的发酵环境。
(3)该设备以肯定的速度在加料口不断添加新的培育基,同时又以同样速度在出料口放出旧的培育基,可大大提高生产效率,缘由是____________________________(答出两点即可)。(4)该设备处理玉米芯与将玉米芯进行焚烧处理相比,优点是________________________________(答出两点即可)。
【答案】(1)唯一碳源无菌水稀释涂布平板(2)温度、pH、O2浓度(3)①保证微生物对养分物质的需求;②防止代谢物对菌株H发酵的影响(4)削减污染,削减占有土地资源,提高资源利用率【解析】(1)因为要筛选木聚
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