GB/T 41225-2021 苯氧羧酸类除草剂中游离酚限量及检测方法（正式版）

苯氧羧酸类除草剂中游离酚限量及检测方法国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会IGB/T41225—2021本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国石油和化学工业联合会提出。本文件由全国农药标准化技术委员会(SAC/TC133)归口。本文件起草单位：沈阳沈化院测试技术有限公司、安徽丰乐农化有限责任公司、佳木斯黑龙农药有限公司、深圳诺普信农化股份有限公司、山东潍坊润丰化工股份有限公司、浙江新安化工集团股份有限1GB/T41225—2021苯氧羧酸类除草剂中游离酚限量及检测方法本文件规定了苯氧羧酸类除草剂中游离酚的限量要求，并描述了其检测方法。本文件适用于苯氧羧酸类除草剂产品的质量控制，也可作为合格评定以及管理活动等的依据。注：主要的游离酚的名称和结构式见附录A。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T8170—2008数值修约规则与极限数值的表示和判定3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。苯氧羧酸类除草剂phenoxycarboxylicacidherbicides由2,4-二氯酚或4-氯邻甲酚为主要原材料合成而得到的一类除草剂。2,4-滴系列2,4-Dseries以2,4-二氯苯氧羧酸为主体结构的一系列除草剂。2甲4氯系列MCPAseries以2-甲基-4-氯苯氧羧酸为主体结构的一系列除草剂。注：包括2甲4氯(盐)、2甲4氯异辛酯等原药及制剂产品。游离酚freephenols苯氧羧酸类除草剂在经过生产和加工工艺后，仍残留在产品中的游离状态的酚类物质的总称。4限量要求苯氧羧酸类除草剂中游离酚限量应符合表1要求。2GB/T41225—2021表1苯氧羧酸类除草剂中游离酚限量技术指标限量值2,4-滴系列2甲4氯系列原药制剂原药制剂游离酚质量分数/%≤标示值h的0.2%≤标示值的0.3%”当使用化学显色法时需注明(化学显色法，以2,4-二氯酚计)或(化学显色法，以4-氯邻甲酚计);当使用高效液相色谱法时需注明(液相色谱法，以2,4-二氯酚计)或(液相色谱法，以4-氯邻甲酚计)。“如果产品为单剂，标示值为有效成分的质量分数；如果产品为复配制剂，则标示值为其中苯氧羧酸类除草剂成分的质量分数，限量值按GB/T8170—2008规定保留一位小数。5检测方法警示：使用本文件的人员应有实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施。5.1一般规定本文件所用试剂和水在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和蒸馏水。5.2鉴别试验本鉴别试验可与游离酚质量分数的测定同时进行。在相同的操作条件下，试样溶液与标样溶液有同样的红色。5.2.2高效液相色谱法本鉴别试验可与游离酚质量分数的测定同时进行，当对某一种酚无法得到较好分离时，可通过调整流动相的pH值为2.75后对其进行分离与鉴别，具体操作见附录B。在相同的色谱操作条件下，试样溶液中某个色谱峰的保留时间与标样溶液中某酚的色谱峰的保留时间，其相对差值应在1.5%以内。在相同的色谱与质谱SIM模式操作条件下，试样溶液在提取通道内出现特征色谱峰，并且其保留时间与标样溶液中酚的特征色谱峰的保留时间，其相对差值应在1.5%以内，分析方法见附录C。5.3游离酚的测定5.3.1化学显色法(仲裁法)将试样溶于乙醇氨水溶液中，加入4-氨基安替比林和铁氰化钾溶液显色，测定其吸光度。由校正曲线查出相同吸光度下标样的体积，计算游离酚含量。3GB/T41225—2021贮备液配制(贮备液在暗处可存放3个酚标准溶液的体积(mL)。1)用于2,4-滴系列产品中游离酚的测定。2)用于2甲4氯系列产品中游离酚的测定。4GB/T41225—2021试样中的游离酚质量分数按式(1)计算： (1)式中：W₁试样中游离酚质量分数，以百分数(%)表示；V——测得试样吸光度所对应的体积，单位为毫升(mL);m₁———2,4-二氯苯酚或4-氯邻甲酚标样的质量，单位为克(g);w——2,4-二氯苯酚或4-氯邻甲酚标样的质量分数，以百分数(%)表示；V₁——配制酚标准溶液的体积，单位为毫升(mL),本文件中V₁=100mL;m——试样的质量，单位为克(g)。5.3.1.6允许差两次平行测定结果之相对差，应不大于20%,取其算术平均值作为测定结果。5.3.2高效液相色谱法5.3.2.1方法提要试样用甲醇溶解，以甲醇+乙酸钠+乙酸水溶液为流动相，以C₁8为填料的不锈钢柱和紫外检测器，在波长280nm下，对试样中的游离酚进行高效液相色谱分离和测定，外标法定量。(本方法对每种酚的定量限约为0.5μg/mL)5.3.2.2试剂和溶液5.3.2.2.1甲醇：色谱级。5.3.2.2.2乙酸钠。5.3.2.2.3冰乙酸。5.3.2.2.4水：新蒸二次蒸馏水或超纯水。2,4,6-三氯酚标样：已知质量分数，w≥96.0%。5.3.2.3.1高效液相色谱仪：具有可变波长紫外检测器。5.3.2.3.2色谱柱：250mm×4.6mm(i.d.)不锈钢柱，内装C₁8、5μm填充物(或具等同效果的色谱柱)。5.3.2.3.3过滤器：滤膜孔径约0.45μm。5.3.2.3.4定量进样管：25μL。5.3.2.3.5超声波清洗器。5.3.2.3.6分析天平：精度为0.0001g。5.3.2.4高效液相色谱操作条件5.3.2.4.1流动相：a)流动相A:乙酸钠水溶液，1.36g乙酸钠溶解于2L水中，用冰乙酸调节pH值至3.44,混匀，b)流动相B:甲醇。c)检测过程中对流动相A与流动相B比例进行梯度设定(具体设定内容见表2)。5GB/T41225—2021时间/min流动相A占比/%流动相B占比/%0225.3.2.4.3柱温：室温(温度变化应不大于2℃)。5.3.2.4.6保留时间：邻甲酚约20.4min、2-氯酚约21.9min、4-氯酚约29.8min、2,6-二氯酚约佳效果。典型的游离酚混合标准品高效液相色谱图见图1。图1游离酚混合标准品的高效液相色谱图平行做两份试验。分别称取0.05g(精确至0.0001g)2-6GB/T41225—2021甲醇溶解后，加入3mL1mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至11,加水定容至刻度，摇匀，作为游离酚标样储备液。用移液管移取上述储备液1mL于另一50mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为标样溶液。5.3.2.5.2试样溶液的制备称取含有效成分约0.2g(精确至0.0001g)的试样置于50mL容量瓶中，加入40mL甲醇超声振在上述操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针的峰面积相对变化小于1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中某一酚的峰面积分别进行平均。试样中某一种酚的质量分数按式(2)计算，2,4-滴系列试样中游离酚的质量分数按式(3)计算，2甲4氯系列试样中游离酚的质量分数按式(4)计算： (2) (3) (4)式中：w———试样中某一种酚质量分数，以百分数(%)表示；A——试样溶液中，某一种酚的峰面积的平均值；mh--—游离酚标样储备液中某一种酚标样的质量，单位为克(g);Wh——某一种酚标样的质量分数，以百分数(%)表示；Abr—标样溶液中，某一种酚的峰面积的平均值；m₂——试样的质量，单位为克(g);w₂———2,4-滴系列试样中游离酚的质量分数，以百分数(%)表示；162.99——2,4-二氯酚摩尔质量，单位为克每摩尔(g/mol);M——某一种酚的摩尔质量，单位为克每摩尔(g/mol),见附录A;W₃——2甲4氯系列试样中游离酚的质量分数，以百分数(%)表示；5.3.2.7允许差游离酚质量分数两次平行测定结果之相对差，应不大于20%,取其算术平均值作为测定结果。5.4检验结果判定规则按GB/T8170—2008中4.3.3判定检验结果是否符合本文件要求。7GB/T41225—2021(资料性)中文名称ISO通用名称CAS登录号实验式相对分子质量结构式2-氯酚2-Chlorophenol4-氯酚4-Chlorophenol2,6-二氯酚C₆H₁Cl₂O2,4-二氯酚C₆H,Cl₂O2.4,6-三氯酚C₆H₃Cl₃O邻甲酚C₇H₈O4-氯邻甲酚6-氯邻甲酚6-Chloro-o-cresol4.6-二氯邻甲酚4,6-Dichloro-0-cresolC₇H;Cl₂O8GB/T41225—2021(资料性)苯氧羧酸类除草剂中主要游离酚的鉴别试验——高效液相色谱法(pH值2.75)利用游离酚在高效液相色谱法分析中对流动相的pH值敏感的特性，通过改变流动相的pH值对主要的游离酚进行高效液相色谱法的鉴别。B.2试剂和溶液B.3仪器B.4高效液相色谱法操作条件B.4.1.1流动相A:乙酸钠水溶液，1.36g乙酸钠溶解于2L水中，用冰乙酸调节pH值至2.75,混匀，脱气，备用。B.4.1.2流动相B以及流动相梯度设定见5.3.2.4.1。B.4.2保留时间35.4min、4-氯邻甲酚约42.5min、2,4-二氯酚约43.8min、4,6-二氯邻甲酚约46.4min、2,4,6-三氯酚约46.7min。典型的游离酚混合标准品的高效液相色谱图见图B.1。图B.1游离酚混合标准品的高效液相色谱图9C.1方法提要试样用甲醇溶解，使用高效液相色谱-四极杆质谱联用仪，采用SIM模式对试样中的游离酚进行质谱检测，根据得到的提取离子色谱图对试样中主要的游离酚进行鉴别。C.2试剂和溶液C.2.5标样见5.3.2.2.5。C.3仪器C.3.1高效液相色谱-四极杆质谱联用仪。C.4.3柱温：30℃。