分子生物学与基因工程智慧树知到期末考试答案章节答案2024年鲁东大学_第1页
分子生物学与基因工程智慧树知到期末考试答案章节答案2024年鲁东大学_第2页
分子生物学与基因工程智慧树知到期末考试答案章节答案2024年鲁东大学_第3页
分子生物学与基因工程智慧树知到期末考试答案章节答案2024年鲁东大学_第4页
分子生物学与基因工程智慧树知到期末考试答案章节答案2024年鲁东大学_第5页
已阅读5页,还剩11页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

分子生物学与基因工程智慧树知到期末考试答案+章节答案2024年鲁东大学DNA复制时的引物,只能是RNA。

答案:错rRNA都是由RNA聚合酶1转录产生的。

答案:错Pribnowbox是原核启动子的-10序列,是研究者将其命名为pribnowbox的

答案:错DNA印迹技术主要用于基因组DNA的定性和定量分析,例如对基因组中特异基因的定位及检测等,此外亦可用于分析重组质粒和噬菌体。

答案:对在定量PCR中,72℃这一步对荧光探针的结合有影响,故去除,实际上55℃仍可充分延伸,完成扩增复制。

答案:对质粒所携带的性状是宿主细胞正常生长所必须的

答案:错PCR技术需在体内进行。

答案:错配对的碱基总是A与T和G与C。

答案:对偏爱密码子含量高可提高外源基因在大肠杆菌中的表达

答案:对印记技术是指将在凝胶中分离的生物大分子转移或直接放在固定化介质上并加以检测分析的技术。

答案:对基因组学是指阐明整个基因组的结构、结构与功能的关系以及基因之间相互作用的科学。

答案:对根据采用的克隆载体性质不同,将重组DNA分子导入细菌的方法有转化、转染等。

答案:错由于原核生物和真核生物在同义密码子的使用频率上存在较大程度的差异性,因此,下面哪些策略可以使外源基因上的密码子在大肠杆菌细胞中获得最佳表达:

答案:外源基因全合成;同步表达相关tRNA编码基因核糖体循环包括哪三步

答案:转移;成肽;进位组成脱氧核苷酸的碱基包括

答案:G;A;T;C双链DNA变性的条件有

答案:化学试剂;高温常用于目的基因与表达载体连接的方式有()

答案:人工接头法;平头末端连接;AT克隆连接;黏性末端连接真核生物RNA聚合酶Ⅰ对α-鹅膏蕈碱最敏感,主要用于rRNA的转录;

答案:错下列有关真核生物初级转录物的论述是正确的

答案:许多核苷酸序列不存在于有功能的RNA中;通常比有功能的RNA长;可能含有一个以上的RNA信息;全部不含有修饰的碱基每个真核生物核小体核心上缠绕的DNA长度为

答案:146bp原核生物的转录终止机制有哪几种

答案:不依赖ρ因子的转录终止;依赖的转录终止机制以下描述DNA复制过程正确的有

答案:滞后链的不连续复制;前导链的连续复制;生物界具有普遍性;两条链复制方向都是5’-3’起始密码子为

答案:AUG引物酶是一种

答案:依赖DNA的RNA聚合酶一个基因组有两个序列,一个是A,另一个是B,各有2000bp长。其中一个是由400bp的序列重复5次而组成,另一个则由50bp的序列重复40次而组成,请问这个基因组的大小是否一致

答案:一致以mRNA为模板催化cDNA合成需要下列酶

答案:逆转录酶PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加

答案:n2依赖rho因子的终止子的特征是?

答案:发夹结构尾随着一串的UPCR产物长期储存最好置于

答案:-20℃逆转录表达系统通常包括的组件不包括

答案:表达细胞系在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的酶是

答案:DNA连接酶下列哪一项是对三元转录复合物的正确描述

答案:全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。

答案:对CT1/2与基因组大小相关。

答案:对一个完整的基因克隆过程应包括:目的基因的获取,与载体的连接构建重组DNA,重组DNA分子导入受体细胞,获得改造出含感兴趣基因的重组DNA转化细胞。

答案:对一个转录因子通常具有两个独立的结构域:分别是转录激活结构域和DNA或蛋白结合域

答案:错一个核小体由各两拷贝的H2A,H2B,H3,H4组蛋白和146bp的DNA组成的.

答案:错在转录终止子柄部的A-T碱基对可以增强结构的稳定性

答案:错CT1/2与基因组复杂性相关。

答案:对病毒基因可能是单链或双链,闭合环状或线性,DNA或RNA组成。

答案:对RNA聚合酶是通过氢键互补的方式识别启动子的.

答案:对转录原点记为+1,其上游记为正值,下游记为负值;

答案:错质粒根据其在宿主细胞数量的多寡可分为两种类型分别是严谨复制型质粒和松弛复制型质粒

答案:对非组蛋白染色体蛋白负责30nm 纤丝高度有序的压缩。

答案:对载体的既可以携带外源DNA又可自主复制

答案:对PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面

答案:对蛋白质印迹分析技术中蛋白质的转移,可以用电转移,也可以靠毛细作用转移。

答案:错tRNA的种类有

答案:同工tRNA;延伸tRNA;校正tRNA;起始tRNA核酸包括

答案:RNA;DNARNA印迹技术主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA的表达水平,也可以比较不同组织和细胞中的同一基因的表达情况。

答案:对质粒可作为基因载体是因为

答案:可插入外源DNA;含有复制子结构,能自主复制DNA的变性

答案:是可逆的;氢键断裂DNA碱基对互补原则是

答案:AT;CG外源基因在大肠杆菌的表达受以下条件的影响,包括

答案:质粒拷贝数;核糖体结合位点;启动子和终止子的选择;密码子的选择原核生物基因组结构特征包括

答案:结构简练;存在转录单元;有重叠或嵌套基因核糖核甘酸和脱氧核糖核甘酸的组成差别有

答案:碱基种类有差异;前者2C位上连接的是一个羟基,后者只连一个H。重组DNA技术中常用的质粒DNA是

答案:细菌染色体外的独立遗传单位计算分子量为3X105的双链DNA分子的长度(一个互补的脱氧核苷酸残基的平均分子量为618)

答案:165.05nm一般情况下下列哪些基因组特性是随生物复杂程度的增加而上升的?

答案:基因组大小;单个基因的平均大小哺乳动物载体通常有

答案:类似于质粒的DNA载体;改造后的病毒载体系统DNA在有丝分裂中期染色质中压缩的倍数大约是

答案:8400倍一个基因的DNA序列是3’-CCATGCTA-5’,那么从这一基因转录来的mRNA序列为:

答案:5’-GGUACGAU-3’依赖DNA催化合成RNA的酶是()

答案:RNA聚合酶下面哪一事件在翻译起始时发生?

答案:mRNA结合到核糖体在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括

答案:A、B、C都可能PCR基因扩增仪最关键的部分是

答案:温度控制系统转录因子TFIIS的功能是

答案:促进RNA校读PCR技术于哪一年发明

答案:1985原核RNA聚合酶亚基

答案:特异性识别启动子位点大肠杆菌转录生成的mRNA是:

答案:多顺反子如果反应体系中加入模板DNA分子100个,则经过30个循环后,DNA分子的数量将达到()个。

答案:100×230下列哪种物质一般不用作基因工程的载体?

答案:哺乳动物的病毒色氨酸操纵子,主要调控方式有二种,分别是负控诱导和弱化调节。

答案:错基因组大小是指其DNA总和

答案:对双链DNA的两条链是反向平行的。

答案:对DNA链的合成方向是从3’-5’。

答案:错荧光定量PCR检测操作扩增的产物长度通常较短。

答案:对人工染色体的构建大大增加了外源DNA的装载量,因此主要用于生物体的全基因组序列分析

答案:对PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等。

答案:对真核生物RNA聚合酶Ⅱ对α-鹅膏蕈碱最不敏感,主要用于mRNA的转录。

答案:错DNA链降解破坏的键是氢键。

答案:错高低拷贝质粒的用途不同,高拷贝质粒主要用于获得目标蛋白

答案:错PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。

答案:对PCR反应中,复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。

答案:对基因组的复杂性是指基因组中所有单一序列的总长度。

答案:对真核生物转录起始阶段,首先是转录因子ⅡD中的TBP亚基识别并结合DNA上的启动子

答案:对若标本中含有蛋白变性剂(如甲醛),PH、离子强度、Mg2+等有较大改变都会影响Taq酶活性。

答案:对在生物蛋白质合成过程,起始密码AUG只编码甲硫氨酸。

答案:错DNA链是有方向的,从3‘-5’。

答案:错真核生物三种RNA聚合酶都是具有的多亚基的大的蛋白复合体。

答案:对RNA聚合酶同操纵基因结合

答案:错原核生物的rRNA有

答案:16s;23s;5.8s酵母双杂交是检验DNA与蛋白质相互作用的技术方法

答案:错下列蛋白质合成正确的说法有

答案:肽链合成是从N-端向C端方向进行的;核糖体阅读mRNA密码子是从5’向3’方向进行染色体组蛋白上的共价修饰通常包括

答案:甲基化;ADP糖基化;磷酸化;乙酰化乳糖操纵子的主要转录调控机制

答案:阻遏调控;弱化子调控有关RNA转录合成的叙述,其中正确的是

答案:RNA链的生长方向是5到3端;所有真核生物RNA聚合酶都不能特异性地识别promoter;转录时只有一股DNA作为合成RNA的模板使外源基因上的密码子在大肠杆菌中高效表达的两种策略是

答案:外源基因全合成;同步表达相关tRNA编码基因常用的目的基因的获取方法有

答案:构建CDNA文库;人工合成DNA技术;制备基因组文库;PCR扩增目的基因组蛋白上发生甲基化的部位通常在

答案:赖氨酸;精氨酸核糖体循环三步曲中,不需要消耗能量的是()

答案:成肽真核生物RNA聚合酶Ⅱ转录RNA的主要步骤

答案:启动子的识别、转录起始复合体的形成、起始、延伸、终止tRNA的反密码子为UGC,与之对应的mRNA序列为?

答案:GCA反密码子IGC可以识别的密码子是

答案:GCA真核生物基因表达调控特点

答案:正控激活;具有多层次性PCR产物短期存放可在()保存。

答案:4℃以下是有关真核生物的启动子的描述,正确的是:

答案:CAAT区和GC区主要控制转录的起始,基本不参与起始位点的确定;在-70-80区含有CCAAT序列;真核生物的启动子在-25-35区含有TATA序列组成细菌染色体的DNA形态是

答案:环状和超螺旋现代分子生物学研究内容包括

答案:基因工程;基因表达调控;基因组、功能基因组及生物信息学;结构分子生物学与tRNA中的反密码子GCU配对的mRNA中的密码子是:

答案:AGU当新的核小体在体外形成时,会出现以下哪些过程?

答案:核心八聚体完全形成后,再与DNA结合λDNA载体的装载能力最大可达到

答案:25kb在翻译后加工的任何过程发生之前,几乎任何多肽链都以哪种氨基酸起始?

答案:methionine病毒基因组的可能组成是

答案:RNA或DNAM13的装载量很小只有

答案:1.5kb()的密码子可以作为起始密码子:

答案:甲硫氨酸遗传密码UAG代表哪一种氨基酸?

答案:noneoftheseTaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为

答案:37℃在真核细胞中参与pre-mRNA剪接的是?

答案:snRNA科斯质粒和噬菌粒的装载量大大增加,分别可达到

答案:45kb,10kb下面哪一项不是转录起始所必须的?

答案:引物RNA序列对基因工程载体的描述,下列哪个不正确?

答案:是环状DNA分子以下哪种物质在PCR反应中不需要

答案:RNA酶真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是

答案:都需要GTPPCR的基本反应过程包括

答案:变性、退火、延伸下面那种原核生物是多种遗传学研究的研究对象

答案:大肠杆菌下面哪一事件在翻译终止时发生?

答案:tRNA从核糖体解离-決定tRNA上所携带的氨基酸种类:

答案:副密码子在原核生物中其mRNA的上游序列是起始蛋白质合成所必需的,这一序列称为

答案:Shine-Dalgarno高等哺乳动物的载体主要有两种来源类型分别是

答案:类似于质粒,人工构建含有真核生物启动子;源于动物病毒改造,如哺乳动物腺病毒、慢病毒等SV40病毒是一个基因组大小只有5024b'p的双链环状DNA

答案:错用人牛痘病毒构建表达载体表达外源基因时所用的启动子是

答案:T7启动子人腺病毒基因组的大小为24kb

答案:错SV40病毒构建的载体表达外源DNA过程中需要辅助病毒的帮助

答案:对人乳多瘤病毒构建载体时通常是将其基因组与大肠杆菌质粒整合构建成

答案:穿梭载体慢病毒载体的包装需要的辅助载体有几个

答案:2利用病毒改造的载体,通常还需要特定的受体细胞

答案:对SV40DNA载体的优点是

答案:基因表达效果好,可高效表达人腺病毒经改造后,其包装上限可达4kb

答案:对改善基因工程菌不稳定性的策略有()

答案:施加选择压力;控制目的基因的过量表达;改进载体受体系统;优化基因工程菌的培养工艺大肠杆菌作为受体菌表达真核生物外源基因时具有的劣势是

答案:不能对真核生物蛋白质进行修饰加工。;缺乏真核RNA加工剪辑所需要的酶系统大肠杆菌中的起始tRNA分子可以识别AUG、GUG和UUG三种起始密码子,但其识别频率并不相同,通常GUG为AUG的50%而UUG只及AUG的25%。

答案:对以包涵体形式表达目的蛋白的缺点有()

答案:通过变性复性操作回收得到体外复性蛋白质的效率较低外源基因在大肠杆菌的高效表达受以下条件的影响,包括启动子、终止子、核糖体结合位点、密码子以及质粒拷贝数。

答案:对融合形式表达目的蛋白的优缺点,包括目的蛋白稳定性高,目的蛋白易于分离,目的蛋白表达率高和目的蛋白溶解性好。

答案:对当真核基因在大肠杆菌中表达时,蛋白质N端的甲硫氨酸残基往往不能被切除。而分泌型表达后,N端的甲硫氨酸残基便可在信号肽的剪切过程中被有效除去。

答案:对以下是大肠杆菌基因工程中常常构建的蛋白表达系统有()

答案:构建蛋白酶抗性或缺陷型表达系统;融合型;分泌型;包涵体型一般而言,有两种策略可以使外源基因上的密码子在大肠杆菌细胞中获得最佳表达:外源基因全合成和同步表达相关tRNA编码基因

答案:对过长转录物的产生在很大程度上会影响外源基因的表达,原因有()

答案:过长的转录物往往不能形成理想的二级结构,从而大大降低外源基因编码产物的翻译效率;转录产物越长,RNA聚合酶转录一分子mRNA所需的时间就相应增加,外源基因的转录效率下降;往往会产生大量无用的蛋白质,增加工程菌无谓的能量消耗;如果外源基因下游紧接有载体上的其它重要基因或DNA功能区域,则RNA聚合酶在此处的转录可能干扰质粒的复制及其它生物功能,甚至导致重组质粒的不稳定性;重组DNA的筛选与鉴定不包括哪一方法

答案:显微注射分子克隆又称

答案:基因重组;基因克隆重组DNA技术基本过程包括

答案:目的基因的获取;克隆载体的构建;目的DNA与载体的连接;将重组体导入受体菌;重组DNA分子转化受体菌的筛选可用作克隆基因载体的DNA有

答案:真核细胞基因组DNA;病毒DNA;酵母人工染色体;噬菌体DNA;细菌质粒DNA在基因工程中,DNA重组体是指

答案:目的基因与载体的连接物基因的分子生物学理论为基因工程提供了理论支撑

答案:对在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增

答案:A、B都可PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为

答案:引物理论上提高基因工程基因转录效果的有

答案:选择高效启动子;筛选使用合适的增强子序列PCR技术的发明人是

答案:Mullis镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为

答案:0.5-2mmol/L基因的分子生物学原理为基因工程的进行提供了

答案:表达目标蛋白的可能1944年Avery的肺炎链球菌转化实验不仅说明DNA是遗传物质,也说明了DNA可转移入细胞

答案:对重组DNA技术理论中最关键的是DNA的体外拼接

答案:对下列属于酵母双杂交技术应用范围的是()

答案:研究一对蛋白间发生相互作用所必需的结构域;绘制蛋白质相互作用系统图谱。;用已知功能的蛋白基因筛选双杂交cDNA文库;检验蛋白间的相互作用。反式作用因子往往由两个或两个以上相互独立的结构域构成,一个是DNA结合结构域,另一个是转录激活结构域,都是转录激活因子发挥功能所必需的,前者识别DNA上的特异序列,后者激活基因的转录。

答案:对在PCR反应中,dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作为DNA合成的原料。

答案:对酵母双杂交技术是在真核模式生物酵母中进行的,是研究细胞内两种蛋白质相互作用的技术系统。

答案:对真核生物基因表达调控过程中,也会有阻遏蛋白结合到转录起始点上游而导致转录不能进行。

答案:错染色体水平调控的主要表现是组蛋白的修饰

答案:对真核生物基因表达调控按性质划分可分为可逆调控和不可逆调控

答案:对在基因组序列不发生改变情况下的DNA修饰称为表观遗传控制

答案:对真核生物基因的表达调控目前只发现有正调控,没有负调控

答案:对真核生物基因的表达调控通常是基因受到内源信号作用,外部环境对其不起作用

答案:错下列哪项不属于真核生物转录水平的调控

答案:内含子的去除真核生物基因表达调控的多层次性表现在转录之前的有

答案:染色体水平调控;DNA水平的调控真核生物染色体水平的基因表达调控表现为

答案:DNA的甲基化;组蛋白的磷酸化;组蛋白的乙酰化下列不属于乳糖操纵子基本组成成分的是()

答案:弱化子1961年雅各布(F.Jacob)和莫诺德(J.Mon-od)提出著名的操纵子学说时研究的操纵子模型是()。

答案:乳糖操纵子正转录调控系统中调节基因的产物是激活蛋白

答案:对原核生物基因表达调控主要应答于营养状况

答案:错负转录调控系统就是阻遏蛋白所起的阻遏作用

答案:错原核生物的基因表达调控主要包括

答案:转录后水平的调控;转录水平的调控乳糖操纵子的调节基因是在弱启动子控制下永久型合成的。

答案:对有葡萄糖存在的情况下,即使在培养基中加入乳糖、半乳糖、阿拉伯糖或麦芽糖等诱导物,与其相对应的操纵子也不会启动,不会产生出代谢这些糖的酶来,降解物对基因活性的调节这种现象称为葡萄糖效应或称为降解物抑制作用。降解物抑制作用是一种积极的调节方式。

答案:对辅阻遏物作用后通常是使基因表达处于

答案:表达抑制诱导物作用后使阻遏蛋白失活,继而引起基因表达的是

答案:负控诱导在蛋白质合成终止过程中,除了需要核糖体A位点与终止密码结合外,还需要释放因子识别终止密码用于肽链的释放。

答案:对在翻译中

答案:RNA转变为蛋白质一个遗传密码代表一个特定的

答案:氨基酸用于原核生物和真核生物翻译起始的转运tRNA不同,原核生物蛋白质合成起始的tRNA是

答案:met-tRNA下面终止密码子为

答案:UAA氨基酸的活化是指氨基酸与tRNA相连,形成氨酰反应由氨酰-tRNA合成酶催化。

答案:对组蛋白甲基转移酶只能够使组蛋白上的氨基酸发生甲基化

答案:错原核生物mRNA是通过其()结合到核糖体小亚基上。

答案:SD序列构成原核生物核糖体的RNA有

答案:5SrRNA部分原核基因的转录终止子在终止位点前均有

答案:回文序列真核生物中rRNA包括

答案:28s,18s,5.8s,5srRNA在所有细胞类型中,主要RNA分子有几类?

答案:3RNA聚合酶II转录时,没有明确的终止信号—可能和转录后修饰相关

答案:对δ因子的结合依靠

答案:对启动子共有序列的长度和间隔的识别内含子的剪切位点具有的特征

答案:5,—GU,3,—AG原核细胞启动子-10区的序列通常被称为Pribnowbox,其一致序列是TATA。

答案:对对于每一种RNA聚合酶起始转录时,都有包含TAF(TBPassociatefactorTBP相关因子)的复合体结合在转录起始位点的上游。分别与RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ结合的是SL1、TFⅡD、TFⅢB。

答案:对大肠杆菌RNA聚合酶由核心酶和α因子组成,其中前者由α亚基、β亚基和β’亚基组成,活性中心位于β亚基上。

答案:对转录的基本过程包括模板识别、转录起始。

答案:错DNA聚合酶,主要活性就是聚合反应,催化核苷酸链由3’向5’不断延长。

答案:错在DNA复制过程中后随链的形成,模板链方向为5’-3’,它的子链合成方向是与复制叉前进方向相反的,只能等待解开一段DNA模板后,在靠近复制叉处合成一段RNA引物,往复制叉前进的相反方向合成一段子链。

答案:对端粒的存在具有重要的生物学意义,包括()

答案:保护染色体不被核酸酶降解;;补偿滞后链5’末端在消除RNA引物后造成的空缺;;防止染色体末端相互融合;引物是DNA复制必须的,提供3’-OH末端,才使DNA-pol能够催化()的聚合。

答案:dNTP前导链的连续复制和滞后链的不连续复制,在生物界具有普遍性,这就是DNA复制过程的一种模式,称为()

答案:DNA的半不连续复制冈崎片段的连接由()完成。

答案:DNA连接酶在自然状态下引物是一小段短的RNA链,是以DNA单链为模板,以dNTPs为底物,由引物酶或引发体催化合成。

答案:错DNA聚合酶不能催化两个游离的脱氧核苷酸聚合。

答案:对经过研究证实了在染色体末端有一种特殊结构,保证了遗传信息的不丢失。这个特殊结构就是()

答案:端粒DNA半不连续复制过程中一条链是连续合成的,另一条是先形成DNA,再由连接酶连成冈崎片段。

答案:错在真核生物中,遗传物质存在于什么细胞器?

答案:细胞核在核小体中,每个组蛋白八聚体分别由组蛋白H3和H4形成一个二聚体和组蛋白H2A和H2B形成另一个二聚体两种组蛋白组成。

答案:对因为组蛋白H4 在所有物种中都是一样的,可以预期该蛋白质基因在不同物种中也是一样  的。

答案:错DNA在10nm纤丝中压缩多少倍(长度)

答案:6倍真核基因经常被断开()。

答案:说明真核基因可能有多种表达产物,因为它有可能在mRNA加工的过程中采用不同的外显子重组方式;因为编码序列外显子被非编码序列内含子所分隔真核细胞和原核细胞的差别在于

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论