革兰氏阳性球菌课件

革兰氏阳性球菌

第一节葡萄球菌属(Staphylococcus)

葡萄球菌广泛分布于空气、饲料、饮水、地面及物体表面。人及畜禽的皮肤、黏膜、肠道、呼吸道及乳腺中也有寄生。致病性葡萄球菌常引起各种化脓性疾患、败血症或脓毒败血症。当污染食品时，可引起食物中毒。一般特征

典型的葡萄球菌为圆形，直径0.5～1.5um，排列成葡萄串状，无芽胞，无鞭毛，有的形成荚膜或黏液层。

在脓汁中或生长在液体培养基中的球菌常呈双球或短链排列。

用青霉素可诱导成L型。革兰氏阳性，但衰老、死亡或被白细胞吞噬以及耐青霉素的菌株呈阴性。需氧或兼性厌氧，触酶阳性，氧化酶阴性，无运动力。可在普通培养基、血琼脂等生长，不在麦康培养基生长。最适温度35～40℃。最适pH7.0～7.5。致病性菌株多能产生脂溶性的黄色或柠檬色素，不着染培养基。分类

过去按产生的色素分为3种:金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌。1974年葡萄球菌属分为3种:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。《伯吉氏系统细菌学手册》(1986)则将本属细菌分为20多种。其中常见的动物致病菌有金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌厌氧亚种、中间葡萄球菌及猪葡萄球菌。

大多数从人分离的金黄色葡萄菌菌株，可根据噬菌体分型，分为22个型，但是动物的分离株不能用人的标准噬菌体满意地分型。三种葡萄球菌的主要生物学性状金黄色葡萄球菌

形态、培养及生化特性

与属的特征相一致。需注意的是脓汁、乳汁、液体培养的染色片中常见双球或短链排列的球菌，易误认为链球菌。

在普通琼脂平板形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落，直径1～2mm，有时可达4～5mm。菌落颜色依菌株而异，初呈灰白色，继而为金黄色、白色或柠檬色。致牛乳腺炎以及耐药菌株常为深黄色。色素的形成依培养条件而异，通常在22℃或在固体培养基中含有糖、牛乳或血清等，产生色素较多;有O2及CO2环境下易形成色素。

在血液琼脂平板形成的菌落较大，产溶血素的菌株多为病原菌，在菌落周围呈现明显的B溶血。

在普通肉汤生长迅速，初浑浊，管底有少量沉淀，轻轻振荡，沉淀物上升，旋即消散。培养2～3d后可形成很薄的菌环，在管底则形成多量黏稠沉淀。生化反应

生化反应并不恒定，常因菌株及培养条件而异。多数能分解乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸而不产气。致病菌株多能分解甘露醇。还能还原硝酸盐，不产生靛基质。抗原及变异葡萄球菌细胞壁上的抗原构造比较复杂，含有多糖及蛋白质两类抗原。1、多糖抗原具有型特异性。2、蛋白抗原所有人源菌株都含有葡萄球菌蛋白A(StaphylococalproteinA，SPA)，来自动物源菌株则少见。

SPA能与人、猴、猪、犬及几乎所有哺乳动物的免疫球蛋白的Fc段非特异结合，结合后的IgG仍能与相应抗原进行特异性反应。这一现象已广泛用于免疫学及诊断技术。抵抗力在无芽孢菌中，葡萄球菌的抵抗力较强。在干燥的脓汁或血液中可存活2～3个月，80℃30min才能杀死，煮沸可迅速使它死亡，3%～5%石碳酸3～15min即可致死，70%乙醇在数分钟内杀死本菌。对碱性染料敏感，浓度为1:100000～1:300000的龙胆紫可抑制其生长繁殖，故临床上应用1%～3%龙胆紫溶液治疗葡萄球菌引起的化脓症，效果良好。1:20000洗必泰、消毒净、新洁尔灭，1:10000度米芬可在5min内杀死本菌。药物敏感性

葡萄球菌对磺胺类、青霉素、金霉素、土霉素、红霉素、新霉素等抗生素敏感，但易产生耐药性。某些菌株能产生青霉素酶，或携带抗四环素、红霉素等基因，因而对这些抗生素产生耐药性。

致病性及毒力因子金色葡萄球菌可产生多种毒素和酶，故致病性强。常引起两类疾病，一类是化脓性疾病，例如动物的创伤感染、脓肿、蜂窝织炎、乳腺炎、关节炎、败血症和脓毒败血症等。另一类是毒素性疾病，被葡萄球菌污染的食物或饲料引起人或动物的中毒性呕吐、肠炎及人的毒素休克综合征等。

毒力因子葡萄球菌的某些细胞壁结构具有毒力因子的作用，如葡萄球菌蛋白A、荚膜、纤连素结合蛋白，但是最主要的毒力因子还是毒素及酶。α毒素

又名α溶血素，与牛羊的坏疽性乳腺炎有关，它还导致白细胞等崩解，并作用于平滑肌细胞的血管壁细胞，引致平滑肌收缩、麻痹，最终坏死。α毒素是不耐热的蛋白质，分子量为34000。与α毒素类似的还有β、γ及δ溶血素，人源菌株多数产生α毒素，而从动物分离的菌株则常见ß溶血素。

肠毒素

引致人类食物中毒，刺激呕吐中枢，表现呕吐，并腹泻。除猫患及幼猴外，大多数动物对此毒素有很强的抵抗力。凝固酶

多数致病株能同时产生两种蛋白质，一种分泌于菌体外，另一种结合在菌体表面，它们能使含有抗凝剂的家兔或人的血浆凝固，称为凝固酶。前一种称游离凝固酶，类似凝血酶原的作用;后一种称结合凝固酶，或凝聚因子，可使血浆纤维蛋白与菌体交联，引起菌体凝集。凝固酶有助于致病菌株抵御宿主体内吞噬细胞和杀菌物质的作用，同时也使感染局限化。检测葡萄球菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标，致病株多数为凝固酶阳性，非致病株则为阴性，但近年来发现后者亦有致病性。耐热核酸酶

l00℃作用l5min不失去活性，由致病菌株产生。感染部位的组织细胞和白细胞崩解时释放出核酸，便渗出液黏性增加，此酶能迅速分解核酸，利于病菌扩散。目前也将该酶的检测作为鉴定致病菌株的重要指标之一。除产生上述酶类外，还可产生溶纤维蛋白酶、透明质酸酶，又称为扩散因子、磷酸酶、卵磷脂酶、脂酶等。微生物学诊断小猫试验标本脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等分离培养血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检革兰阳性葡萄球菌生长现象色素，溶血，生化反应毒素检查

1.涂片、染色

化脓性病灶取脓汁、渗出液，乳腺炎取乳汁，败血症取血液，中毒症取剩余食物、呕吐物或粪便。将病料涂片，染色，镜检，如见有大量典型的葡萄球菌可初步诊断。

2.分离培养鉴定将病料进行划线接种于5%绵羊或兔血液琼脂平板，血液、剩余食品、呕吐物、粪便等病料需经增菌肉汤培养后再划线接种血平板，37℃培养18～24h，菌落金黄色，周围呈溶血现象者多为致病菌株。进一步鉴定还要做凝固酶试验、耐热核酸酶试验、分解甘露醇试验，阳性者多为致病菌。必要时可做动物试验。实验动物中家兔最为易感，皮下接种24h培养物1.0m1，可引起局部皮肤溃疡坏死;静脉接种0.1～0.5ml，于24～48h死亡。刮检可见浆膜出血，肾、心肌及其他脏器出现大小不等的脓肿。发生食物中毒时，将从剩余食物或呕吐物分离的葡萄球菌接种到普通肉汤中，置30%CO2培养40h，离心沉淀后取上清液，100C℃30min加热后，注入幼猫静脉或腹腔内，l5min到2h内出现寒战、呕吐、腹泻等急性胃肠炎症状，表明有肠毒素存在。采用ELISA法可快速检测微量的肠毒素，应用DNA探针杂交技术则可直接检出肠毒素的阳性菌株。禽葡萄球菌病附：禽萄葡球菌病

禽葡萄球菌病是由葡萄球菌引起的家禽的一种急性或慢性接触性传染病。禽萄葡球菌病【流行特点】禽萄葡球菌病

各种家禽均可发生本病，鸡最易感，40～60日龄的幼鸡多发，主要表现为急性败血症；中雏和成年禽也可发病，呈急性或慢性经过。发病率5%～10%，致死率为5%～60%。可通过皮肤黏膜创伤感染，也可通过直接接触或空气传播。禽萄葡球菌病【临床特征及大体病变】禽萄葡球菌病1急性败血型

禽萄葡球菌病病鸡精神不振，食欲减褪或废绝，双翅下垂，部分病鸡排出灰白色粪便禽萄葡球菌病

病鸡局部羽毛脱落，皮肤水肿、坏死、破溃，流出红棕色液体，与周围羽毛粘连禽萄葡球菌病

有时可见感染部位皮肤充血、出血

禽萄葡球菌病

腿部肌肉点状或条纹状出血禽萄葡球菌病肝脏可见大小不一、数量不等的黄白色化脓灶

禽萄葡球菌病2关节型禽萄葡球菌病多见于青年禽，表现为多发性关节炎，病禽精神不振，跛行或不能站立

禽萄葡球菌病跗关节肿胀、变形禽萄葡球菌病跗关节及趾关节肿胀禽萄葡球菌病关节腔内有灰白色脓汁（鸡）禽萄葡球菌病关节腔内积有多量干酪样渗出物（肉鸭）禽萄葡球菌病股骨头溃疡禽萄葡球菌病龙骨滑液囊脓肿禽萄葡球菌病3趾瘤型禽萄葡球菌病病变部位呈污黑色，质地较硬

禽萄葡球菌病脚趾脓肿、坏死（鸭）禽萄葡球菌病有的趾尖坏死、干缩（日.堀内贞治）

禽萄葡球菌病【防治要点】禽萄葡球菌病

消除造成家禽外伤的各种因素，加强卫生消毒工作。病禽用青霉素注射或内服氯霉素、土霉素、红霉素、磺胺类药物等可取得较好疗效。但对关节型病例，效果不好。

禽萄葡球菌病第二节链球菌属(Streptococcus)

链球菌种类很多，在自然界分布甚广，水、尘埃、动物体表、消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜、乳汁等都有存在，有些是非致病菌，有些构成人和动物的正常菌群，有些可致人或动物的各种化脓性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。分类目前链球菌属共有30多种，比较常见的有10余种。还可根据抗原构造、溶血特征分类。根据抗原结构分类

链球菌的抗原构造比较复杂，包括属特异、群特异及型特异三种抗原。核蛋白抗原，属特异抗原，又称P抗原，并与葡萄球菌属有交叉。

群特异性抗原，又称C抗原，是存在于链球菌细胞壁中的多糖成分，其抗原决定簇为氨基糖类，例如A群链球菌是鼠李糖-N-乙酷葡糖胺，C群为鼠李糖N-乙酷半乳糖胺，而F群则为葡萄糖-N-乙酷半乳糖胺。兰氏分类即以此为基础，用大写英文字母表示，目前已确定20个血清群。不过有的分离株往往不能定型。

型特异性抗原，又称表面抗原，

A群链球菌具有M、R、T等蛋白质抗原，M抗原与致病性及免疫原性有关。非A群链球菌有的具有类M蛋白结构。按溶血能力分类根据链球菌在血琼脂平板上的溶血现象分为α、β、γ3类，在鉴定链球菌的致病性方面有一定的意义。α型溶血链球菌在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环，红细胞未溶解，血红蛋白变成绿色。这种细菌致病力不强，多为条件性致病菌。β型溶血链球菌

菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。这类菌致病力强，常引起人及动物各种疾病。

γ型溶血链球菌

菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。

溶血性链球菌形态与染色链球菌呈圆形或卵圆形，直径小于2.0pm，常排列成链状或成双。一般致病性链球菌的链较长，非致病性菌株较短。肉汤内对数生长期的链球菌，常呈长链排列。革兰氏阳性，老龄的培养物或被吞噬细胞吞噬的细菌呈现阴性。除个别D群菌外，均无鞭毛。A群等的一些菌株有菌毛。A、B、C群等多数有荚膜。化脓性链球菌StreptococcuspyogenesDividingstreptococci

链球菌培养特性大多数为兼性厌氧菌，少数为厌氧菌。最适生长温度37℃，pH7.4～7.6，致病菌营养要求较高，普通培养基中生长不良，需添加血液、血清、葡萄糖等。在血液琼脂平板上长成直径0.1～1.0mm，灰白色，表面光滑，边缘整齐的小菌落。多数致病菌株具有溶血能力，溶血环的大小和类型因菌株而异。B、D群的一些菌株可产生橙红或黄色色素。血清肉汤中生长，初呈均匀浑浊，后因细菌形成长链呈颗粒状沉淀管底，上清透明。生理生化特性致病性致病性链球菌可产生各种毒素或酶，可致人及马、牛、猪、羊、犬、猫、鸡、实验动物和野生动物等多种疾病。链球菌的不同致病菌株，分别可产生溶血素、链激酶（又名溶纤维蛋白酶），链道酶(又名链球菌脱氧核糖核酸酶)，透明质酸酶等，其性质与作用与葡萄球菌的酶类似。

致病性链球菌细胞壁上的脂磷壁酸(LTA)等与动物皮肤及黏膜表面的细胞具有高度亲和力，使菌体易吸附于宿主口腔、咽部的黏膜上皮。其荚膜成分、M蛋白等具有抗吞噬作用，均有利于细菌发挥致病作用。

抵抗力本属细菌的抵抗力不强，对热较敏感，煮沸可很快被杀死，常用浓度的各种消毒药均能杀死。对青霉素、磺胺类药物敏感。免疫性链球菌的抗原结构比较复杂，机体感染后有多种抗体产生，已知抗M蛋白的抗体具有保护作用，M蛋白有多种抗原型，各型间缺