人前列腺素E2（PGE2）ELISA试剂盒说明书_第1页
人前列腺素E2（PGE2）ELISA试剂盒说明书_第2页
人前列腺素E2（PGE2）ELISA试剂盒说明书_第3页
人前列腺素E2（PGE2）ELISA试剂盒说明书_第4页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

第第页人前列腺素E2（PGE2）ELISA试剂盒说明书原理本试验采用双抗体夹心ABCELISA法。用抗人PGE2单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的PGE2与单抗结合，加入生物素化的抗人PGE2，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最终加停止液硫酸，在450nm处测OD值，PGE2浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中PGE2浓度。试剂盒构成（28℃保管）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml第一抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml停止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（肝素抗凝）、细胞培养上清液、尿液等尽早检测，28℃保管48小时；更长时间须冷冻（20℃或70℃）保管，避开反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，配成40ng/ml的溶液。设标准管8管，第一管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在第一管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤46次，向滤纸上印干。3.每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul停止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与推断1.全部OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.依据样品OD值在该曲线图上查出相应PGE2含量即可。试剂盒性能1.灵敏度：最小的PGE2检测浓度小于30pg/ml。2

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 规章制度

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论