山西省古县、高县、离石县八校新高考压轴卷生物试卷及答案解析

山西省古县、高县、离石县八校新高考压轴卷生物试卷注意事项:1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。2．答题时请按要求用笔。3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．中国赛罕坝林场建设者荣获2017年联合国环保最高荣誉—“地球卫士奖”。塞罕坝曾被称作“千里松林”，但由于过度采伐，成为荒原。经林场建设者们的设计和努力创造了荒原变林海的奇迹。2019年，中国“蚂蚁森林”项目再获此殊荣。下列说法错误的是（）A．生态系统的自我调节能力是有一定限度的B．对森林采用科学合理的间伐，可提高其恢复力稳定性C．生态环境问题具有全球性，需要全人类的关注和合作D．人类活动往往会使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向进行2．基因I和基因Ⅱ在某动物染色体DNA上的相对位置如图所示，下列说法错误的是A．基因I和基因Ⅱ可能决定动物的同一性状B．基因I的表达产物可能影响基因II的表达C．基因I和基因Ⅱ可能在多种细胞中都表达D．基因I和基因Ⅱ在转录时不存在A和T配对3．“母性效应”是指子代某一性状的表现型由母体的核基因型决定，而不受本身基因型的支配。椎实螺是一种雌雄同体的软体动物，一般通过异体受精繁殖，但若单独饲养，也可以进行自体受精，其螺壳的旋转方向有左旋和右旋的区分。旋转方向符合“母性效应”，遗传过程如图所示。下列叙述错误的是（）A．与螺壳旋转方向有关的基因的遗传遵循基因的分离定律B．螺壳表现为左旋个体和表现为右旋个体的基因型均各有3种C．让图示中F2个体进行自交，其后代螺壳右旋∶左旋=3∶1D．欲判断某左旋椎实螺的基因型，可用任意的右旋椎实螺作为父本进行交配4．线粒体是一种存在于大多数细胞中的由两层膜包被的细胞器，是细胞中进行能量转换的结构，是细胞进行有氧呼吸的主要场所，被称为“powerhouse”。下图为线粒体中相关物质的生物合成示意图，下列分析错误的是（）A．线粒体中有核糖体以及RNA聚合酶、解旋酶等物质B．仅靠线粒体内基因的表达产物，线粒体不能完成全部的代谢C．图中遗传信息的流动过程中碱基互补配对方式完全相同D．与核DNA表达相比，线粒体DNA的表达没有空间上的障碍5．下列有关科学史的叙述正确的是（）A．欧文顿提出：生物膜是由脂质和蛋白质组成的B．斯他林和贝利斯通过实验证明小肠黏膜产生促胰液素并进入血液，随血液到达胰腺，引起胰液的分泌C．卡尔文等用蓝藻做实验，探明了CO2中碳在光合作用中转换成有机物中碳的途径D．孟德尔用豌豆做实验发现了两大遗传定律，提出性状是由基因控制的6．某些效应T细胞在癌组织环境中会合成两种细胞膜蛋白（CTLA-4、PD-1），这两种膜蛋白对效应T细胞的杀伤功能具有抑制作用。2018年诺贝尔生理学或医学奖授予了两位科学家，是因为他们发现了以上两种膜蛋白的特殊抗体，并成功将其用于癌症的治疗。下列叙述正确的是（）A．人体内癌变的细胞会成为抗原，被效应T细胞攻击B．提高CTLA-4、PD-1的活性，细胞免疫功能将增强C．通过使用两种膜蛋白的特殊抗体可直接杀灭癌细胞D．癌细胞一定是诱导效应T细胞发生基因突变后合成了CTLA-4、PD-1二、综合题：本大题共4小题7．（9分）玉米籽粒的有色和无色是一对相对性状，受三对等位基因控制。基因型E_F_G_的玉米籽粒有色，其余均无色。回答下列问题。（1）上述材料表明基因与性状的关系是___________。（2）玉米群体中，无色籽粒纯合子最多有___________种基因型。（3）现提供甲（eeFFGG）、乙（EEffGG）、丙（EEFFgg）三个玉米品系，两两杂交。F1的表现型都是___________。（4）为确定这三对等位基因之间的位置关系，利用甲、乙、丙设计以下实验：（不考虑基因突变和交叉互换的情况），让每两个品系之间杂交得到三组F1，再让三组F1自交得到F2，分别统计三组F2籽粒颜色。预期的实验结果及结论：若三组F2籽粒有色与无色的比例均为9：7，则三对等位基因的位置关系是___________；若一组F2籽粒有色与无色的比例为1：1，其他两组籽粒有色与无色的比例均为9：7，则三对等位基因的位置关系是___________；若三组F2籽粒有色与无色的比例均为1：1，则三对等位基因的位置关系是___________。8．（10分）豌豆种子细胞呼吸时，底物经脱氢酶催化所释放的氢，能将无色的三苯基氯化四唑（TTC）还原为红色的三苯甲腙。在种子萌发过程中，其CO2释放速率和O2吸收速率的变化如下图所示，请回答：（1）种子萌发的12～14h，CO2释放速率远大于O2吸收速率，说明该阶段豌豆种子的主要呼吸方式为______________。豌豆种子细胞呼吸产氢的场所是___________。（2）胚根长出前，完整的种皮限制了种子对_____________的吸收，从而影响了种子的呼吸速率。36h后，O2吸收速率大于CO2释放速率，说明碗豆种子细胞的呼吸底物不全是_____________。（3）从细胞呼吸角度分析，碗豆种子比小麦种子更适宜浅播的原因是______________________。（4）实验室除用TTC鉴定种子胚细胞的“死活”外，还可用染料染色法来鉴定种子胚细胞的“死活”，后者的鉴定原理是___________________________。9．（10分）为了应对“垃圾围城”的困局，很多大型城市启动了近城区垃圾填埋场生态修复工程。目前推广的做法是将填埋场改造成生态公园。请回答下列问题：（l）垃圾填埋场内发生的群落演替属于____演替。（2）生态修复工程启动后，杂草丛生的垃圾填埋场可以在2年时间内变身生态公园，这说明人类活动对群落演替有什么影响？_______________________________（3）为了更好地做好生态修复工作，前期的调查研究必不可少。①若要调查填埋场土壤中小动物类群的丰富度，常用____的方法进行采集、调查。有些小动物用肉眼难以识别，可用镊子或吸管取出，放在载玻片上，借助______进行观察。②某时期有一批田鼠迁入该填埋场，该田鼠以草根为食，田鼠的种群数量可以通过________法测得。预计该田鼠种群增长速率的变化情况是____。10．（10分）红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。根据材料回答下列问题：（1）以哺乳动物的红细胞为实验材料的原因：________________。（2）提取血细胞时，首先进行红细胞的洗涤，洗涤次数、离心速度与离心时间十分重要。洗涤次数过少，________；离心速度________和时间________会使血细胞等一同沉淀。（3）蛋白质分离方法中常用凝胶色谱法，该方法是根据________分离蛋白质。（4）同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技术，将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的________、________以及分子本身的大小等。11．（15分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

生态环境面临的问题有：1.全球变暧与海平面上升，大气中的二氧化碳等气体增加，将出现更严重的温室效应，旱涝灾害可能增加；2.土地流失失与人均耕地面积不断减少；3.森林资源日益减少，世界森林每年几乎减少1%；4.淡水供给不足将构成经济发展和粮食生产的制约因素；5.臭氧层的损耗将大影响水生生态系统；6、生物物种加速灭绝，动植物资源急剧减少。【详解】A、罕坝曾被称作“千里松林”，但由于过度采伐，成为荒原，这一事实说明生态系统的自我调节能力是有一定限度的，A正确；B、对森林采用科学合理的间伐，可提高其自我调节能力，B错误；C、生态环境是人类赖以生存的物质基础，故生态环境问题具有全球性，需要全人类的关注和合作，C正确；D、人类活动能够改变群落演替的方向和速度，因此可知人类活动往往会使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向进行，D正确。故选B。2、D【解析】

1、等位基因是指位于同一对同源染色体的相同位置，控制相对性状的基因。2、细胞中表达的基因形象地分为“管家基因”和“奢侈基因”。“管家基因”在所有细胞中表达，是维持细胞基本生命活动所必需的；而“奢侈基因”只在特定组织细胞中表达。【详解】基因I和基因Ⅱ位于同一条染色体上，所以不是等位基因。但生物的一个性状可能由多个基因决定，因此基因I和基因Ⅱ可能决定动物的同一性状，A正确；基因和基因、基因和基因产物、基因和环境之间存在着复杂的相互作用，因此基因I的表达产物可能影响基因II的表达，B正确；若基因I和基因Ⅱ是管家基因，在所有细胞中都表达，C正确；转录时，碱基互补配对为A-U、T-A、C-G、G-C，因此基因I和基因Ⅱ在转录时存在A和T配对，D错误。故选D。【点睛】理解等位基因的概念，明确基因、染色体和性状之间的关系是解答本题的关键。3、B【解析】

据图分析，左螺旋dd作为母本，与右螺旋DD作为父本杂交，后代基因型为Dd，表现型为左螺旋（与母本相同），子一代为Dd，Dd自交，子二代全部为右螺旋，且后代DD：DD：dd=1：2：1，说明Dd的遗传遵循基因的分离定律，即“母性效应”现象是符合孟德尔分离定律的。【详解】A、根据以上分析已知，与螺壳旋转方向有关的基因的遗传遵循基因的分离定律，A正确；B、根据题意和图形分析，螺壳表现为左旋，说明母本的基因型为dd，,故表现为螺壳左旋的子代基因型为dd或Dd2种；螺壳表现为右旋，说明母本的基因型为DD或Dd，则表现为螺壳右旋的子代基因型为DD、Dd或dd3种，B错误；C、让图示中F2个体进行自交，DD和Dd自交的后代都是右螺旋，dd自交的后代是左螺旋，因此后代螺壳右旋∶左旋=3∶1，C正确；D、左螺旋的基因型为dd或Dd，鉴定期基因型可以让其与任意的右旋椎实螺作为父本进行交配，若后代都是左螺旋，则基因型为dd，若后代但是右螺旋，则基因型为Dd，D正确。故选B。4、C【解析】

DNA复制、转录、翻译的比较

复制转录翻译时间

细胞分裂间期（有丝分裂和减数第一次分裂）

个体生长发育的整个过程场所主要在细胞核主要在细胞核细胞质的核糖体模板DNA的两条链DNA的一条链mRNA原料4种游离的脱氧核苷酸4种游离的核糖核苷酸20种游离的氨基酸条件酶（解旋酶，DNA聚合酶等）、ATP酶（RNA聚合酶等）、ATP酶、ATP、tRNA产物2个双链DNA一个单链RNA多肽链特点半保留，边解旋边复制边解旋边转录一个mRNA上结合多个核糖体，顺次合成多条肽链碱基配对A-T

T-A

C-G

G-CA-U

T-A

C-G

G-CA-U

U-A

C-G

G-C遗传信息传递DNA----DNADNA------mRNAmRNA-------蛋白质意义

使遗传信息从亲代传递给子代表达遗传信息，使生物表现出各种性状【详解】A、线粒体中能进行DNA的复制，说明有解旋酶，能进行遗传信息的转录说明有RNA聚合酶，能进行翻译说明有核糖体，A正确；B、线粒体内基因的表达产物和核基因的表达产物共同使线粒体完成全部的代谢，B正确；C、图中遗传信息的流动过程中碱基互补配对方式不完全相同，DNA复制过程中有A与T的配对，而遗传信息的转录过程中A只能与U配对，C错误；D、核DNA的转录发生在细胞核，翻译发生在核糖体，线粒体DNA的表达都在线粒体中进行，D正确。故选C。5、B【解析】

19世纪末，欧文顿对细胞膜结构的研究结论是：膜是由脂质构成的。1925年，两位荷兰科学家用丙酮从人的红细胞中提取脂质，在空气-水界面上铺成单分子层，测得单分子层的面积恰为红细胞表面积的2倍，由此得出结论：细胞膜中的脂质分子必然排列为连续的两层。1959年，罗伯特森利用电镜观察细胞膜的结构提出：所有的生物膜都是由蛋白质-脂质-蛋白质三层结构构成，他把生物膜描述为静态的统一结构。1972年桑格和尼克森提出了膜的流动镶嵌模型。【详解】A、欧文顿提出：生物膜是由脂质组成的，A错误；B、斯他林和贝利斯的实验证明了胰液的分泌不受神经调节控制，而是在盐酸的作用下，小肠黏膜产生了一种化学物质（促胰液素）进入血液后，随血流到达胰腺，引起胰液分泌的化学调节，B正确；C、卡尔文等用小球藻做实验，探明了CO2中碳在光合作用中转换成有机物中碳的途径，C错误；D、孟德尔用豌豆做实验发现了两大遗传定律，提出性状是由遗传因子控制的，D错误。故选B。6、A【解析】

免疫是指身体对抗病原体引起的疾病的能力，特异性免疫包含细胞免疫和体液免疫。细胞免疫对抗被病原体感染的细胞和癌细胞，此外也对抗移植器官的异体细胞。体液免疫为效应B细胞产生和分泌大量的抗体分子分布到血液和体液中，体液免疫的主要目标是细胞外的病原体和毒素。这些病原体和毒素在组织和体液中自由的循环流动时，抗体与这类细胞外的病原体和毒素结合，致使病毒一类的抗原失去进入寄主细胞的能力，使一些细菌产生的毒素被中和而失效，还可使一些抗原（如可溶的蛋白质）凝聚而被巨噬细胞吞噬。【详解】A、人体内癌变的细胞会成为靶细胞，被效应T细胞攻击，A正确；B、CTLA-4、PD-1这两种膜蛋白对效应T细胞的杀伤功能具有抑制作用，提高CTLA-4、PD-1的活性，细胞免疫功能将减弱，B错误；C、抗体不能直接杀灭癌细胞，C错误；D、从题干中无法看出癌细胞一定是诱导效应T细胞发生基因突变，也有可能是影响了基因选择性表达，使其合成了CTLA-4、PD-1，D错误。故选A。二、综合题：本大题共4小题7、基因通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而控制生物体的性状7有色三对等位基因分别位于三对同源染色体上其中任意两对等位基因位于一对同源染色体上，另一对等位基因位于非同源染色体上三对等位基因位于一对同源染色体上【解析】

1、基因对性状的控制途径有两种，一是基因通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而控制生物体的性状，另一种是基因控制蛋白质的结构直接控制生物体的性状。2、题干分析，每对等位基因至少含有一个显性基因才表现为有色，其余均为无色。【详解】（1）基因通过转录和翻译过程控制蛋白质的合成，而有色和无色是非蛋白类物质，因此基因对性状的控制方式是基因通过控制酶的合成来控制细胞代谢进而控制生物体的性状。（2）玉米群体中，纯合子一共有8中基因型，其中只有EEFFGG表现有色，因此无色籽粒纯合子最多有7种基因型。（3）三个玉米品系两两杂交，F1的基因型均为E_F_G_，表现型都是有色。（4）甲和乙杂交得到的F1为EeFfGG，甲和丙杂交得到的F1为EeFFGg，乙和丙杂交得到的F1为EEFfGg，三组得到的F1分别自交，若每组自交后代的性状分离比均为有色9：7，则这三对等位基因分别位于三对同源染色体上。若其中一组F2籽粒有色与无色的比例为1：1，其他两组籽粒有色与无色的比例均为9：7，则有两对等位基因位于一对同源染色体上，另一对等位基因位于非同源染色体上；若三组F2籽粒有色与无色的比例均为1：1，则三对等位基因位于一对同源染色体上。【点睛】本题重点考查考生理解能力、实验结果进行分析能力，对考生的能力要求比较高，属于较难的题目。8、无氧呼吸细胞质基质和线粒体基质O2（或O2和水）葡萄糖（糖类）豌豆种子脂肪含量更高，脂肪氧化分解需要消耗更多的O2，浅播利于种子吸收氧气活细胞的细胞膜具有选择透过性，不易被染料染色（或者死细胞的细胞膜不具有选择透过性，易被染料染色）【解析】

种子萌发的外界条件有充足的水分、适宜的温度和足够的氧气，种子萌发的初期主要进行无氧呼吸，胚根突破种皮后主要进行有氧呼吸。脂肪中氧的含量低于糖类，脂肪氧化分解时消耗的氧的体积大于产生二氧化碳的体积。【详解】（1）无氧呼吸不吸收氧气，产生二氧化碳，有氧呼吸消耗葡萄糖时，产生的二氧化碳体积与消耗氧的体积相同。据图可知，在12～24h期间，氧气吸收量很少，而二氧化碳释放量很多，表明此时的呼吸方式主要是无氧呼吸，产物是二氧化碳和酒精。有氧呼吸的第一、二阶段和无氧呼吸的第一阶段可产生还原氢，有氧呼吸第一阶段和无氧呼吸第一阶段场所相同，都是细胞质基质，有氧呼吸第二阶段场所是线粒体基质。（2）胚根长出前，完整的种皮限制了种子对氧气的吸收，从而影响了种子的呼吸速率。36h后，O2吸收速率大于CO2释放速率，说明碗豆种子细胞的呼吸底物不全是葡萄糖，还存在脂肪等其他物质。（3）豌豆种子中脂肪含量高于小麦种子，脂肪氧化分解时需要的氧比单位质量的糖类氧化分解时需要的氧更多，浅播利于种子吸收氧气，有利于种子萌发。（4）活细胞的细胞膜具有选择透过性，染料分子不能通过活细胞的细胞膜，所以活细胞的胚细胞不易被染料分子染上颜色。【点睛】本题结合曲线图，考查细胞呼吸的过程及影响呼吸作用的环境因素等，要求考生识记植物细胞有氧呼吸和无氧呼吸的总反应式，能根据曲线图中信息准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。9、次生人类活动会使群落替按照不同于自然演替的速度和方向进行取样器取样放大镜、实体镜标志重捕先增大后减小【解析】

1、初生演替指在一个从来没有被植物覆盖的地面，或者是原来存在过植被、但被彻底消灭了的地方发生的演替；次生演替指原有植被虽已不存在，但原有土壤条件基本保留，甚至还保留了植物的种子或其他繁殖体的地方发生的演替。人类活动往往会使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向进行。2、种群数量“S”型增长实现的条件是：环境条件是有限的，资源和空间有限、存在敌害等，各阶段的增长速率不同，随着时间的增加，种群增长速率先增大后减小，种群增长速率在K/2达到最大。【详解】（1）垃圾填埋场原有的土壤条件基本保留，甚至还保留了植物的种子或者其他繁殖体，故在垃圾填埋场内发生的群落演替属于次生演替。（2）人类活动往往会使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向进行。（3）①土壤中小动物类群丰富度的研究，常用取样器取样法进行采集、调查；有些小动物用肉眼难以识别可用镊子或吸管取出，放在载玻片上，借助放大镜、实体镜进行观察。②田鼠活动能力强，活动范围大，常用标志重捕法调查其种群数量；田鼠迁入垃圾填埋场后，种群增长一般接近于“S”型增长，其种群增长速率的变化情况应是先增大后减小。【点睛】本题考查种群数量变化的S型增长曲线、群落的演替、群落中丰富度的调查，意在考查考生对所学知识要点的理解，把握知识间内在联系，运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。10、成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核和细胞器无法除去血浆蛋白过高过长相对分子质量的大小分子带电性质的差异分子的形状【解析】

1、凝胶色谱法：

凝胶色谱法也称做分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。2、电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。

电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。

3、红细胞的洗涤要点：

洗涤次数、离心速度与离心时间十分重要。洗涤次数过少，无法除去血浆蛋白；离心速度过高和时间过长会使白细胞等一同沉淀，达不到分离的效果。【详解】（1）因为成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核和细胞器，为了获得纯度较高的血红蛋白，经常选用哺乳动物的红细胞为实验材料来提取血红蛋白。（2）提取血细胞时，首先进行红细胞的洗涤，洗涤次数、离心速度与离心时间十分重要。洗涤次数过少，获得的血红蛋白质中会有较多的血浆蛋白；离心速度过高和时间过长会使血细胞等一同沉淀，达不到分离的效果。（3）由分析可知蛋白质分离方法中常用凝胶色谱法，该方法的原理是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的。（4）同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技术，将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，蛋白质分子的分子因为带电性质的差异、分子的形状以及分子本身的大小等不同而产生不同的迁移速度，从而实现了蛋白质的分离。【点睛】熟知蛋白质分离和提纯的原理以及相关的技术要点是解答本题的关键！11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植