杂交兰种苗组培快繁技术规程

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杂交兰种苗组培快繁技术规程

1范围

本文件规定了杂交兰种苗组培扩繁的组培苗培养、组培苗驯化移栽、质量等级、包装、标签和运输

的要求。

本文件适用于杂交兰种苗组培扩繁至驯化栽培的生产过程。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则

NY/T496—2010肥料合理使用准则通则

NY/T1276—2007农药安全使用规范总则

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

杂交兰Cymbidiumhybrid

由国兰和大花蕙兰种间杂交选育的一类兰花杂交种。

类原球茎protocorm-likebodies

兰花外植体诱导培养时，茎尖生长点组织逐渐膨大形成的、可发育成完整试管苗的扁形球状物。

4组培苗培养

外植体的选择和处理

4.1.1母株的预处理

于春秋季，宜使用50%多菌灵可湿性粉剂800倍液等广谱杀菌剂，对长势均匀、无病虫害且带有新

生芽的健康母株进行灌根处理，每隔3天1次，连续处理2次～3次，放置于通风良好、清洁、干燥的

环境，温度宜15℃～25℃，光照宜8000lux～12000lux。

4.1.2外植体的选取

母株基质干透后，选择苞叶尚未展开、露出基质表面2cm～6cm的新生芽，从基部切断取下，置

于无菌样品袋中带回实验室。

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4.1.3外植体消毒

4.1.3.1用洁净的软毛刷轻刷外植体表面，去除表面污垢，浸入洗洁精等清洁剂中震荡清洗50min～

80min，再流水充分冲洗，置于超净工作台上。

4.1.3.2剥去1片～2片外苞叶，75%酒精浸泡消毒90s，无菌水清洗2次～3次。

4.1.3.3再剥去1片～2片外苞叶，浸入10%NaClO溶液，加入2滴～3滴吐温20，处理10min，无

菌水清洗3次～4次。

4.1.3.4浸入0.1%HgCl2溶液，加入2滴～3滴吐温20，根据芽的大小灭菌15min～17min，无菌水

清洗5次～6次。

4.1.3.5再剥去1片～2片外苞叶，将剥离的芽浸入0.05%HgCl2溶液中消毒60s，无菌水清洗5次～

6次。

初代培养

4.2.1接种

取消毒后的芽，剥离0.3cm～0.5cm的茎尖组织接种于初代培养基诱导类原球茎。

4.2.2培养基

培养基配方宜为：1/2MS+1mg/L6-BA+1mg/LIBA+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+5g/L琼脂，

pH值5.6～5.8。

4.2.3培养条件

光照16h/d，光照强度500lux～1000lux，温度（25±1）℃；暗培养时温度为（20±1）℃。

继代培养

4.3.1转接

初代培养60d后，将诱导形成的类原球茎分割为体积约0.4cm×0.4cm×0.4cm的团块，接

种于继代培养基上，每隔60d～75d继代一次，分割时去除类原球茎上分化的芽和根，继代次数不宜

超过12代。

4.3.2培养基

培养基配方宜为：Hyponex1（花宝1号）+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+50g/L香蕉泥+2

g/L水解酪蛋白+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值5.6～5.8。

4.3.3培养条件

光照16h/d，光照强度500lux～1000lux，温度（25±1）℃；暗培养时温度为（20±1）℃。

分化培养

4.4.1转接

将增殖的类原球茎分割为体积约0.4cm×0.4cm×0.4cm的团块，转接至分化培养基上分化

成芽，类原球茎之间的距离不宜少于1.5cm。

4.4.2培养基

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培养基配方宜为：1/2MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+10%椰汁+0.2g/L活性炭+20g/L

蔗糖+6g/L琼脂，pH值5.6～5.8。

4.4.3培养条件

光照16h/d，光照强度1200lux～2000lux，温度（25±1）℃；暗培养时温度为（20±1）℃。

生根培养

4.5.1转接

待芽长至3cm～5cm时，将其切下接种于生根培养基培养50d～70d。

4.5.2培养基

培养基配方宜为：Hyponex1（花宝1号）+0.1mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+100g/L香蕉泥+2

g/L水解酪蛋白+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH值5.6～5.8。

4.5.3培养条件

光照16h/d，光照强度2000lux～2500lux，温度（25±1）℃；暗培养时温度为（20±1）℃。

5组培苗驯化移栽

瓶苗驯化

当苗高长至8cm～12cm、根数达到3条～5条、根长3cm～5cm时，将瓶苗转移至温室驯化培养，

覆盖70%遮阳率的遮阳网5d～7d，而后揭去遮阳网继续培养10d～20d，移栽前，打开瓶口放置2d～

3d。光照强度宜4000lux～5000lux，白天温度宜25℃～30℃，夜间温度不宜低于20℃，宜春、

秋两季驯化。

瓶苗移栽

取出幼苗，洗净根部培养基，宜用50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液等广谱杀菌剂浸泡15min，晾

干至根变白后移栽至营养钵。宜选用经消毒的基质，体积比为松鳞、鹿沼土与仙土=1:1:1。

幼苗栽培管理

栽后具体管理措施详见附录A。

6质量等级

组培苗质量等级见附录B。

7包装、标签和运输

包装

7.1.1组培瓶苗

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将符合质量标准的组培瓶苗用封口膜封住瓶口，整齐排列装于纸箱中，瓶与纸箱之间用海绵等缓冲

物隔离填充。

7.1.2营养钵苗

将营养钵苗整齐排列于纸箱中，缝隙用海绵等缓冲物隔离填充。幼苗在包装前应根据运输时间和环

境控制基质水分含量，一般包装时栽培基质含水量根据包装方式及贮运时间控制，通常应控制在50%以

内，外观为表面基质较干，盆内基质湿润。密封的包装箱箱侧应设通风孔。

标签

每箱应贴上标签，标明品种名称、等级、数量、产地、出苗日期等，并在纸箱上做好“请勿倒置”

的明显标志。

运输

运输时选择整洁的保温车辆，车厢内温度保持在15℃～25℃之间，车辆行驶过程中避免剧烈颠

簸以防组培瓶破碎或幼苗脱落，并应在5h以内到达目的地。此外，不宜在严寒、酷热天气运输。

8模式图

杂交兰种苗生产模式图见附录C。

4

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A

A

附录A

（资料性）

杂交兰组培苗栽后管理

杂交兰组培苗栽后管理措施参见表A.1。

表A.1杂交兰组培苗栽后管理措施

根据实际环境调节光照，加强通风，栽后15d内弱光照，遮阳70%～80%，光照强度不超过3000lux；

光照

15d～30d可适当增加光照强度，一般不超过5000lux；30d后进一步增加光照，但不宜超过8000lux。

温度幼苗最适温度为15℃～30℃，早晚温差5℃～15℃。

幼苗移栽后第一次浇水浇透，之后视天气情况，基质见干即浇。一般春秋季每5d～7d浇一次，夏

浇水

季每2d～4d浇一次，冬季每7d～10d浇一次。

幼苗定植缓苗15d后，施一次时效180d、N：P：K比例为13：13：13的颗粒缓释肥1g～3g，或

施肥每周施一次1500倍N：P：K比例为20：20：20的水溶性肥料。肥料使用应按照NY/T496—2010的要

求执行。

缓苗15d～30d后，每隔15d喷施杀菌剂，杀菌剂可选择戊唑醇、多菌灵、可杀得3000或咪鲜胺；

根据虫害发生情况，杀虫剂可选用阿维菌素、爱卡螨或哒螨灵防治红蜘蛛，速勒马与盈辉优玛复配剂防

病虫害预防

治蓟马，吡虫噻嗪酮防治蚧壳虫，吡虫啉防治蚜虫。施药防治应按照GB/T8321（所有部分）和NY/T1276

—2007的要求执行。

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B

B

附录B

（资料性）

杂交兰组培苗产品质量等级

杂交兰组培苗产品质量等级参见表B.1。

表B.1组培苗产品质量等级

等级

评级项目

一级二级

幼