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文档简介

植物组织培养育苗跟岗实训指导01实训目的P302实训工具及材料P403实训内容及方法P504测评P19目录CONTENTS实训目的实训目的LOGO巩固植物组织培养的基本理论知识,进一步丰富所学知识;理论联系实际,通过自主学习和研究性学习培养学生独立工作能力和创新意识;重点掌握植物组织培养的基本操作技术和方法。实训工具及材料LOGO设备:超净工作台、无菌箱、恒温箱、烘箱、高压灭菌器、天平、摇床、离心机等器皿用具:培养皿、离心管、移液管、镊子、剪刀、解剖刀等药品:蔗糖、琼脂、1mol/LHCl、1mol/LNaCl、各种培养基母液实训内容及方法LOGO组织培养技术操作流程:培养基的制备玻璃器皿洗涤外植体的消毒、接种培养物的管理和试管苗的移栽移栽生根诱导培养实训内容及方法LOGO玻璃器皿洗涤仪器清洗后干净的标准:以内外不挂有水珠为宜。

实训内容及方法LOGO玻璃器皿灭菌灭菌的方法:物理方法;化学方法1.干热灭菌;2.湿热灭菌;3.过滤灭菌;4.射线灭菌;5.火焰灼烧灭菌;6.熏蒸灭菌;7.喷雾灭菌(物体表面)实训内容及方法LOGO培养基的制备培养基的组成

大量元素

微量元素

有机化合物

植物生长调节剂实训内容及方法LOGO培养基的配制计量移液称取融化混合调PH分装包扎灭菌实训内容及方法LOGO称取融化混合定容调PH分装灭菌实训内容及方法LOGO外植体的选择:选择优良的种质选择健壮的植株选择最适的时期选取适宜的大小实训内容及方法LOGO外植体的消毒1.流水冲洗2.酒精处理:用70-75%酒精浸10-30s3.灭菌剂灭菌灭菌时间:是从倒入消毒液开始,至倒入无菌水时为止。用无菌水涮洗,涮洗要每次3min左右.实训内容及方法LOGO实训内容及方法LOGO外植体的接种1.实验器具和材料的准备2.用75%的酒精擦拭超净工作台3.打开超净工作台用紫外灯和风机杀菌20min-30min。4.关紫外灯、以75%酒精洗手和手臂,更换无菌服、帽子和口罩,进入接种室实训内容及方法LOGO外植体的接种5.点燃酒精灯.6.灼烧枪装镊先将镊头烧红,后在酒精灯火焰上来回灼烧,直到烫手为止。7.在近火焰处打开瓶口,使瓶倾斜,以免空气中微生物落入瓶中,封口物朝上放。8.灼烧瓶口使瓶倾斜,避开火焰方向,以免损害培养基和培养物实训内容及方法LOGO外植体的接种9.接种用枪装镊将培养物放在培养基上。10、封口灼烧瓶口,用封口物封口。应避免接触封口物边缘。11、在瓶上用记号笔记录,培养基名称、材料名称、接种时间、污染情况、接种人姓名等。实训内容及方法LOGO酒精清洗手臂灼烧镊子灼烧瓶口接种外植体封口实训内容及方法LOGO接种叶片:上表皮朝上接种培养基。最好带叶脉,注意极性。实训内容及方法LOGO诱导与驯化:将切好的顶芽和侧芽插入诱导培养基中,基部向下,稍稍露出芽尖,置于培养室培养实训内容及方法LOGO继代增殖和幼苗分化:将诱导产生的芽接种于继代培养基中,在培养室中培养,随着继代次数的增加,让诱导芽直接分化萌发为小苗实训内容及方法LOGO生根与炼苗:当苗长至3cm高、有2-3片叶时,可将苗小心切离基部,转入生根培养基中,置于培养室中培养。20天左右开始生根,35天开始炼苗。瓶苗移栽前先放入遮阳篷,在自然散射光下,放置15-20天,荡平秒叶色浓绿、叶片坚挺,植株健壮时可出瓶移栽。测评LOGO评价标准分值(分)1.能够准确说出植物组织培养的原理及实用性特点152.能够准确进行组织培养的技术操作,操作规范,无错误403

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