药用 维生素B6规范指引

T/ZZB0191—2017

药用维生素B6

1范围

本标准规定了药用维生素B6的基本要求、技术要求、安全提示及试验方法、检验规则、标签、包装、

运输和贮存、质量承诺等。

本标准适用于以丙氨酸为起始原料经化学合成的药用维生素B6产品。

化学名称：6-甲基-5-羟基-3，4-吡啶二甲醇盐酸盐

分子式：C8H11NO3·HCl

相对分子质量：205.64（按2016年国际相对原子质量）

结构式：

3CHN

OH．HCl

OH

OH

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/Z2.1—2007工作场所有害因素职业接触限值

GB/T191包装储运图示标志

GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定

GB/T8978—1996污水综合排放标准

GB/T14554—1993恶臭污染物排放标准

GB/T16297—1996大气污染综合排放标准

GB/T24000环境管理体系要求及使用指南

GB/T28001职业健康安全管理体系要求

3基本要求

3.1工艺

维生素B6应采用Diels-Alder加成反应、酸催化芳构反应、水解反应合成，并经重结晶精制制得。

3.2原料

原料丙氨酸采用非水滴定法测定含量不得低于98.5%。

3.3生产装备

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3.3.1由化学合成反应系统、提纯除杂系统、高真空溶剂回收系统、填料塔精馏溶剂回收系统、多级

精密过滤系统以及洁净除尘系统等组成。

3.3.2生产过程使用的设备应无毒、耐腐蚀，与成品直接接触的设备采用316L型不锈钢等材质，不得

与产品发生化学反应、吸附产品或向产品中释放物质。

3.4过程控制

应符合药品生产质量管理规范（GMP）要求，成品结晶、干燥和包装等工序应在D级洁净控制区内进

行。

3.5检测能力

应具备对原料及成品进行全项目检验的能力。

3.6安全环保

3.6.1建立实施安全标准化管理体系，应符合GB/T24001、GB/T28001中规定。

3.6.2生产过程废水排放应符合GB/T8978—1996中一级标准的规定。

注：若当地政府建有城市污水处理厂，则执行政府纳管标准。

3.6.3废气排放应符合GBZ2.1—2007中的规定、GB/T14554—1993中规定的二级标准、GB/T

16297—1996中规定的二级标准。

3.6.4危险固废应按照《危险废物规范化管理指标体系》中的要求实施。

4技术要求

4.1外观

白色或类白色结晶或结晶性粉末。

4.2质量指标

应符合表1的要求。

图1质量指标

项目要求

红外光谱应符合本标准规定

鉴别

液相色谱法应符合本标准规定

澄清度，溶液色泽澄清，不强于Y7

维生素B6含量(按干燥品计)，%99.0～101.0

干燥失重，%≤0.3

炽灼残渣，%≤0.1

酸度（pH值）2.4～3.0

重金属，%≤0.001

苯≤0.0002

残留溶剂，%

甲苯≤0.089

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表1（续）

项目要求

杂质A≤0.10

杂质B≤0.10

有关物质（HPLC），%

其它单个杂质≤0.10

总杂质≤0.2

注1：Y7为欧洲药典溶液色泽标准比色液。

注2：杂质A（6-甲基-1,3-二氢呋喃[3,4-c]并吡啶-7-醇），杂质B（5-羟甲基-2,4-二甲基吡啶-3-醇）。

5试验方法

5.1安全提示及一般要求

5.1.1本实验方法中使用的部分试剂具有毒害性或腐蚀性，应按规定操作，使用时应小心谨慎。若溅

到皮肤上应立即用水冲洗，严重者应立即治疗。在使用挥发性酸时，要在通风橱中进行。

5.1.2除特别标明外，试验中所用试剂为分析纯试剂，水为蒸馏水或相应纯度的水，溶液为水溶液。

测定中所需溶液在未注明时，均按《中华人民共和国药典》附录的规定制备。仪器、设备为一般实验室

仪器、设备。

5.2外观

取适量样品置于白色背景上，在自然光线下观察其色泽和形态。

5.3鉴别

5.3.1试剂和材料

溴化钾：光谱纯。

5.3.2分析步骤

5.3.2.1红外光谱

取适量供试品按照药品红外光谱集压片法进行操作，制得的图谱与药品红外光谱集448号维生素B6

对照图谱一致。

5.3.2.2液相色谱法

检查含量测定项下记录的色谱图，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一

致。

5.4澄清度及溶液色泽

5.4.1试剂和材料

所需试剂和材料如下：

a)溶液S：取本品2.50g，加适量无二氧化碳水（新沸并冷却至室温）溶解，并用该溶剂稀释到

50.0mL；

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b)参比溶液Y7：准确吸取2.5mL标准溶液Y置于100mL容量瓶中，用10g/L的HCl溶液稀释

至刻度，摇匀，具体制备方法见附录A；

c)硫酸肼；

d)乌洛托品；

e)浊度标准贮备液,制备方法：称取于105℃干燥至恒重的硫酸肼1.00g，置100mL量瓶中，

加水适量使溶解，必要时可在40℃的水浴中温热溶解，并用水稀释至刻度，摇匀，放置4～6

小时；取此溶液与等容量的10%乌洛托品溶液混合，摇匀，于25℃避光静置24小时，即得。

本液置冷处避光保存，可在两个月内使用，用前摇匀；

f)浊度标准原液,制备方法：取上述浊度标准贮备液15.0mL，置1000mL量瓶中，加水稀释至

刻度，摇匀，取适量，置1cm吸收池中，照分光光度法，在550nm的波长处测定，其吸收度

应在0.12～0.15范围内。本溶液应在24小时内使用，用前摇匀；

g)参照溶液I：准确吸取2.5mL浊度标准原液置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

临用前新制；

h)参照溶液II：准确吸取10mL浊度标准原液置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

临用前新制。

5.4.2分析步骤

5.4.2.1澄清度

使用相同的无色、透明、内径为15mm～25mm的平底硬质玻璃比色管，比较新鲜制备的溶液S与参比

溶液水，液层高度均为40mm。供试溶液与参比溶液同置于黑色背景下在漫射灯光下，从水平方向观察

比较。样品溶液与水的澄清度一致或所显示的浊度不强于参照溶液I就认为液体是澄清。

注：使用的光线应能明显区分参照液与水，参照溶液I和参照溶液II。

5.4.2.2溶液色泽

取25mL溶液S加入到无色、平底、具塞、透明钠氏比色管中，立即在伞棚灯下与参比溶液Y7对照管

同置白色背景上，自上向下透视，供试品管呈现的颜色不得比对照管Y7颜色更深。

5.5维生素B6含量的测定

5.5.1试剂和材料

所需试剂和材料如下：

a)维生素B6对照品：含量≥99.0%；

b)戊烷磺酸钠：液相色谱用试剂；

c)冰醋酸：液相色谱用试剂；

d)甲醇：液相色谱用试剂；

e)对照品溶液,制备方法：精密称定维生素B6对照品平行两份，加流动相溶解并定量稀释制成约

0.1mg/mL对照品溶液；

f)供试品溶液,制备方法：精密称定维生素B6供试品平行两份，加流动相溶解并定量稀释制成约

0.1mg/mL供试品溶液。

5.5.2仪器设备

高效液相色谱仪带紫外检测器。

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5.5.3色谱条件与系统适应性试验

5.5.3.1色谱条件

色谱条件如下：

——色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

——流动相：0.04%戊烷磺酸钠溶液（用冰醋酸调节pH值至3.0）－甲醇=85:15；

——流速：1.0mL/min；

——检测波长：291nm；

——进样量：10μL。

5.5.3.2系统适应性试验

对照品溶液连续进样5次，其中维生素B6峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0%。理论塔板数

按维生素B6峰计算不低于5000。典型色谱图见附录B，图B.1。

5.5.4测定步骤

精密量取10µL对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；得到色谱峰面积（Ar、

Ai），用外标法计算。

5.5.5结果计算

维生素B6含量按面积外标法以干燥品计算含量，用X1表示，数值以%表示，按式（1）计算：

mrAi

X1C1...............................(1)

Ariwm100/1

式中：

mr——对照品的质量，单位为毫克（mg）；

mi——供试品的质量，单位为毫克（mg）；

w——供试品的干燥失重，单位为%；

C1——对照品的含量，单位为%；

Ar——对照品溶液中维生素B6的平均峰面积；

Ai——供试品溶液中维生素B6的平均峰面积。

5.6干燥失重的测定

5.6.1测定方法

精密称取约1.0g（精确至0.0001g）供试品，平铺于预先在105℃±2℃下干燥恒重的称量瓶中。

再将样品放入同一干燥箱在105℃±2℃下干燥至恒重后，根据减失的重量和样品量计算供试品的干燥

失重。

5.6.2结果计算

干燥失重X2以质量分数计，数值以%表示，按式（2）计算：

mm21

X21....................................(2)

m3

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式中：

m1——干燥前的样品和称量瓶总质量，单位为克（g）；

m2——干燥后的样品和称量瓶总质量，单位为克（g）；

m3——样品质量，单位为克（g）。

5.7炽灼残渣的测定

5.7.1试剂

浓硫酸。

5.7.2测定方法

称取供试品1.0g（精确至0.0001g）置于预先在550℃±50℃灼烧至恒重的坩埚中，低温加热直至

样品完全炭化。冷却后，用少量的硫酸（通常为1mL）润湿残渣，缓慢加热直至白烟挥发完全。然后在

550℃±50℃灼烧直至残渣完全灰化至恒重。整个过程中确保样品不产生燃烧。将坩埚置于干燥器中冷

却，称重并计算残渣的量。

5.7.3结果计算

炽灼残渣X3以质量分数计，数值以%表示，按式（3）计算：

mm54

X31....................................(3)

m6

式中：

m4——坩埚和残渣质量，单位为克（g）；

m5——坩埚质量，单位为克（g）；

m6——样品质量，单位为克（g）。

5.8酸度的测定

用溶液S（5.3.1.1）作为供试液，按pH值测定法进行测定，用酸度计测定pH值，连续读取三次，取

平均值。

5.9重金属

5.9.1试剂和溶液

所需试剂和溶液如下：

a)醋酸铵；

b)硫代乙酰胺；

c)氨水；

d)氨试液：取氨水400mL，加水至1000mL，摇匀即得；

e)硝酸；

f)硝酸铅；

g)盐酸；

h)石蕊试纸；

i)甘油；

j)氢氧化钠；

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k)铅标准溶液：称取硝酸铅0.1599g，置1000mL容量瓶中，加硝酸5mL与水50mL溶解后，用

水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精密量取贮备液10mL，置100mL容量瓶中，加水稀释至

刻度，摇匀，即得；本溶液仅供当日使用；

l)盐酸溶液：C（HCl）=7mol/L，称取1442g盐酸加水稀释至1000mL；

m)盐酸溶液：C（HCl）=2mol/L，称取206g盐酸加水稀释至1000mL；

n)氨水溶液：C（NH3·H2O）=5mol/L，量取500mL氨水加水稀释至1000mL；

o)氢氧化钠溶液：C（NaOH）=1mol/L，称取40g氢氧化钠至于1000mL水中；

p)pH值3.5醋酸盐缓冲溶液：称取醋酸铵25.0g（精确至0.01g），溶于25mL水中，加入7mol/L

盐酸溶液38.0mL。必要时，用5mol/L氨水或2mol/L盐酸溶液调节pH至3.5，用水稀释至

100mL，混匀；

q)硫代乙酰胺试液：称取硫代乙酰胺4g（精确至0.01g），加水溶解成100mL，置冰箱中保存。

临用前取混合液（由1mol/L氢氧化钠溶液15mL、水5.0mL及甘油20mL组成）5.0mL，加上

述硫代乙酰胺溶液1.0mL，置水浴上加热20s，冷却，立即使用。

5.9.2测定方法

方法如下：

a)供试溶液管：称取供试品2.0g（精确至0.01g）于50mL纳氏比色管中，加水20mL溶解，用

氨试液调节溶液遇石蕊试纸显中性，摇匀即得；

b)对照溶液管：取2mL的铅标准溶液（10µg/mL）于另一比色管中，加18mL水，摇匀，即得；

c)监控管：取供试品2.0g和2mL的10µg/mL铅标准溶液于另一比色管中，加适量水，摇匀，即

得；

d)在三管中各加pH3.5的醋酸盐缓冲液2mL，然后加水至25mL，再分别加入2mL硫代乙酰胺试

液，摇匀后放置2分钟，同置于白色背景上，从上向下透视，供试液管显现的颜色比对照管不

得更深，监控管颜色比对照管不得更浅。

5.10残留溶剂

5.10.1试剂和溶液

所需试剂和溶液如下：

a)苯；

b)甲苯；

c)标准溶液，制备方法：精密称取约100mg苯置于1000mL容量瓶中用水溶解摇匀。再用水定量

稀释制成约0.00001%的苯溶液。精密量称取约89mg甲苯置于1000mL容量瓶中用水溶解摇匀

稀释制成约0.0089%的甲苯溶液。准确吸取苯溶液2mL和甲苯溶液1mL同置于20mL顶空瓶中，

即得，按此法分别吸取6份标准溶液；

d)供试品溶液，制备方法：平行称取0.10g（精确至0.0001g）供试品两份置于顶空瓶中，加入

3.0mL水，振摇使其溶解，即得。

5.10.2仪器设备

氢火焰毛细管柱气相色谱仪带顶空进样器。

5.10.3色谱条件与系统适应性试验

5.10.3.1色谱条件

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色谱条件如下：

——色谱柱：5%苯基-95%聚二甲基硅氧烷为固定液的毛细管色谱柱（Ф0.53mm×30m，5μm）；

——柱温：70℃，进样口温度：200℃，FID检测器温度：250℃，瓶加热温度：85℃；

——载气：氮气，流速：42cm/sec，分流比：10:1，加热时间：45min。

5.10.3.2系统适应性试验

按顶空进样法先进5份标准溶液进行重复性试验，按苯与甲苯峰面积计算RSD应不大于10%。然后再

进供试品溶液，供试品溶液结束后最后进第6个标准溶液，6份标准溶液进样面积的RSD也不得大于10%。

5.10.4测定步骤

按顶空进样法进样，收集图谱，取标准溶液6次进样图谱的苯与甲苯峰面积的平均值，供试品溶液

图谱中对应位置峰的峰面积应小于标准溶液峰峰面积。

5.10.5计算结果

苯含量X5、甲苯含量X6，数值以%表示，按式（4）、（5）计算：

A供苯C苯

X52...................................(4)

A苯m7

A供甲苯C甲苯

X6...................................(5)

A甲苯m7

式中：

A供苯——供试品溶液中苯的峰面积；

A供甲苯——供试品溶液中甲苯的峰面积；

A苯——标准溶液液中苯的主峰平均面积；

A甲苯——标准溶液中甲苯的主峰平均面积；

C苯——苯标准溶液的浓度，单位为%；

C甲苯——甲苯标准溶液的浓度，单位为%；

m7——样品质量，单位为克（g）。

5.11有关物质

5.11.1试剂和溶液

所需试剂和溶液如下：

a)维生素B6杂质A（6-甲基-1,3-二氢呋喃[3,4-c]并吡啶-7-醇）：含量≥98%；

b)杂质B（5-羟甲基-2,4-二甲基吡啶-3-醇）：含量≥98%；

c)磷酸二氢钾；

d)磷酸；

e)标准溶液，制备方法如下：

对照溶液a：精密吸取供试品溶液1mL用水稀释至100mL，再从中吸取1.00mL用水稀释

至10mL，即得；

对照溶液b：称取2.5mg杂质A和2.5mg杂质B用水溶解并稀释至10mL，摇匀；吸取2.0

mL该溶液，并用水稀释至10mL，摇匀即得；

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f)供试品溶液，制备方法：称取25mg样品，用水溶解稀释至10mL，即得。

5.11.2仪器设备

高效液相色谱仪带紫外检测器。

5.11.3色谱条件

色谱条件如下：

——色谱柱：尾端封端的十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

——流动相：称取2.72g磷酸二氢钾，加水900mL溶解，再用稀磷酸调节pH至3.0，并用水稀释

到1000mL即得；

——流速：1.0mL/min；

——波长：210nm；

——进样量：5µL；

——运行时间：维生素B6保留时间的2.5倍。

5.11.4系统适应性试验

依次取对照溶液b、对照溶液a、供试品溶液进样，对照溶液b中杂质A与杂质B分离度应不小于1.5。

典型色谱图见附录B,图B.2。

5.11.5杂质控制要求

供试品溶液中杂质B峰面积的1.5倍不得大于对照溶液a的主峰面积（0.10%，杂质A峰面积不得大于

对照溶液a的主峰面积（0.10%），其它单个杂质的峰面积不得大于对照溶液a主峰面积（0.10%），所有

杂质面积的和不得大于对照溶液a主峰面积的2倍（0.2%），同时小于对照溶液a主峰面积的0.5倍的杂质

峰均忽略不计。

5.11.6结果计算

杂质B含量X7、其余最大杂质含量X8、各杂质峰总含量X9，数值以%表示，按式（6）、（7）、（8）

计算：

AB

X7%1.0....................................(6)

A对

A样

X8%1.0....................................(7)

A对

A总

X9%1.0.....................................(8)

A对

式中：

AB——供试品溶液中杂质B峰面积；

A对——对照溶液a主峰平均面积；

A样——供试品溶液中最大单个杂质的峰面积；

A总——供试品溶液中所有杂质面积的和。

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6检验规则

6.1组批

生产每批次成品应该经过检验及认定合格后方可进行组批，组批要保证其均匀性。

6.2抽样

6.2.1在检查好包装规格及包装质量符合规定后进行取样，取样量不应少于90g。设总件数为n：当n

≤3时，每件取样；n＞3时，按1n取样量随机取样。

6.2.2取样需备有清洁、干燥、具有密闭性的样品袋（或样品瓶），袋（瓶）上贴有标签，注明生产

厂家、产品名称、批号和取样日期、取样人签名及必要的说明。

6.2.3取样时，应用清洁适用的取样工具，每包装中取足够量的样品等量混匀后，装入样品袋或样品

瓶中。每批产品取样两份，每份样品应为全检所需样品的3倍量，一份检测，另一份密封保存，以备核

查使用。

6.3出厂检验

出厂检验项目为感观、鉴别、澄清度和溶液色泽、干燥失重、炽灼残渣、酸度、重金属、残留溶剂、

有关物质和维生素B6含量，按批检验放行。

6.4型式检验

型式检验为全项目检验，有下列情形之一时，应进行型式检验：

a)当本产品的原料、工艺、设备有大的改变，可能影响产品的质量时；

b)产品停产6个月后，恢复生产时；

c)批量生产时，每6个月周期性进行一次；

d)出厂检验结果与上述型式检验有较大差异时；

e)当用户对产品质量有较大的异议时；

f)当国家产品质量监督管理机构提出要求时。

6.5判定方法

6.5.1本标准中产品质量指标合格判定，采用GB/T8170中“修约值比较法”。

6.5.2检验结果全部符合为合格品。有一项指标不符合本标准要求时即判定为不合格，不得出厂。

7标签、包装、运输和贮存

7.1标签

应符合药品说明书和标签管理规定（国家食品药品监督管理局令第24号）的规定。

7.2包装

内包装应采用两层聚乙烯药用袋，外包装应采用纸板桶或瓦楞纸箱密封包装，每件包装净重为25kg

或根据客户的要求而定。

7.3运输

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在运输过程中应避免日晒雨淋和受热，搬运装卸时小心轻放，不得与有毒、有害及有腐蚀性等物质

混装载运。

7.4贮存

应遮光密封贮存，不得与有毒、有害及有腐蚀性等物质混存。

8质量承诺

8.1产品应具有可追溯性。

8.2本品在规定包装、贮存条件下，原包装有效期为48个月。

8.3客户正常接收产品后对产品质量有异议的，应在24小时内作出处理响应，及时为客户提供服务和

解决方案。

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AA

附录A

（规范性附录）

参比溶液Y7制备方法

A.1所需试剂

A.1.1制备参比溶液Y7所需试剂包括：标准溶液Y、10g/L的HCl溶液。

A.1.2制备标准溶液Y方法见表A.1。

表A.1标准溶液Y的配制

标准溶液黄色初始溶液，mL红色初始溶液，mL盐酸（1%W/V的HCl），mL

Y24670

初始溶液制备方法如下：

a)黄色初始溶液：

1)称取46g的FeCl3·6H2O，溶于约900mL由25mL盐酸和975mL水配成的盐酸溶液中，并

用此比例的盐酸溶液定容到1000mL。再用上述定容盐酸溶液调至每1mL含FeCl3·6H2O45

mg。所得溶液要避光保存；

2)取10mL以上所配溶液，加水15mL，盐酸5mL和碘化钾4g，盖紧锥形瓶，摇均后避光静

置15min，再加水100mL。用0.1mol/LNa2S2O3溶液滴定析出的游离碘，并用0.5mL淀