梅毒的实验室检查讲解

胡学军嘉善中医医院检验科梅毒的实验室检查梅毒的定义定义：梅毒是一种慢性传染性疾病。是由梅毒螺旋体（苍白螺旋体）引起，患病后病程漫长，早期侵犯生殖器和皮肤，晚期侵犯全身各器官，并生多种多样的症状和体征，病变几乎能累及全身各个脏器。病原体为梅毒螺旋体，属于密螺旋体属，苍白密螺旋体苍白亚种(Treponemapallidumsubspeciespallidum)

苍白亚种梅毒苍白螺旋体地方亚种地方性梅毒极细亚种雅司病密螺旋体属

品他螺旋体品他病4

微生物形态

螺旋细密（5-15um长，0.1-0.2um宽）、规则一端/两端钩状，菌体成8、S或C形在暗视野显微镜下运动活泼

G-,Fontana镀银染色,染成棕褐色5形态与染色暗视野显微镜下观察6梅毒螺旋体梅毒螺旋体，Fontana镀银染色传播途径梅毒患者的皮肤、粘膜中含梅毒螺旋体，未患病者在与梅毒患者的性接触中，皮肤或粘膜若有细微破损则可得病。获得性梅毒（后天）早期梅毒病人是传染源，95%是通过不洁性交传染，少数通过接吻，握手、输血、接触污染的内衣湿毛巾、茶杯、烟斗、哺乳、尿布等传染。胎儿梅毒（先天）：孕妇体内螺旋体，一般在妊娠3—4月通过胎盘感染婴儿。

免疫性特异性抗体感染2周后产生特异性IgM抗体,不能通过胎盘感染4周后出现特异性IgG抗体,可通过胎盘非特异性抗体刺激机体产生抗心磷脂抗体/反应素RPR

和

TRUST等方法可检出：5～7周或硬下疳后2～3周完全治愈的早期梅毒可再感染梅毒的实验室检测方法显微镜检测法：

（1）暗视野显微镜检查（2）镀银染色检查血清学检测法：

非梅毒螺旋体抗原血清试验

（1）VDRL(性病研究实验室试验)：需灭活（2）USR（不加热血清反应素试验）（3）RPR(加速血浆反应素环状卡片试验)

（4）TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)

梅毒螺旋体抗原血清试验（1）FTA-ABS

（2）TPPA/TPHA

（3）TP-ELISA

（4）发光法（5）胶体金法

暗视野显微镜检查标本类型：梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液、淋巴结穿刺液方法：暗视野显微镜下查找梅毒螺旋体。结果：典型的梅毒螺旋体呈白色发光,其螺旋较密而均匀。运动方式：①伸缩其螺旋间距离而移动（主要方式）②蛇行式③旋转式评价：①.简单、可靠。②.早期：硬下疳（梅毒血清学试验仍阴性）。③.阴性不能排出患梅毒的可能性

暗视野显微镜下的梅毒螺旋体螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，WHO指定其为性病实验室必备项目之一镀银染色检查基本原理：梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体结果：棕褐色的梅毒螺旋体

梅毒血清试验梅毒螺旋体侵入人体后产生：抗心磷脂抗体：即非特异性抗体、反应素

RPR、TRUST抗梅毒螺旋体抗体：IgG、IgM

ELISA、TPPA两种抗体1．抗心磷脂抗体血清学试验（RPR，TRUST等）目的：检测血清中抗心磷脂抗体

抗原：心磷脂甲苯胺红不加热血清试验(TRUST):原理：抗原以胆固醇晶粒为载体，包被上心磷脂和卵磷脂，构成VDRL（抗类脂）抗原颗粒。再把抗原颗粒结合到甲基胺红上，当抗原与血清中反应素以一定的比例相互作用时，出现凝集，凝集颗粒呈红色。甲苯胺红不加热血清试验(TRUST):特点：敏感度高、特异性低，易出现假阳性用途作为筛选定量检测：观察疗效、复发和再感染2、梅毒螺旋体抗体血清学试验：方法：1、梅毒螺旋体抗体测定(ELISA法)2、TPPA（明胶凝集实验）等梅毒螺旋体抗体测定(ELISA法)

特点：检测总抗体（1）用作筛查和确认试验：敏感性、特异性高

（2）不用于观察疗效、复发和再感染：感染梅毒螺旋

体后，体内产生的抗螺旋体抗体持续存在，甚至

终生，即使经过足够的抗梅治疗，其血清反应仍

持续阳性TPPA（明胶凝集实验）

确证实验/确诊实验采用梅毒螺旋体天然抗原作为诊断抗原特异性和灵敏度高，检测的是IgM抗体，可以检测到潜伏梅毒，但操作繁琐，费用高梅毒血清试验假阳性因素：技术性：标本的污染溶血操作失误生物学假阳性：某些疾病：结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等，疾病发展过程中释放心磷脂，到血液中假阳性（多见于TRUST）生理机能发生变化：少数孕妇也可发生生物学假阳性梅毒螺旋体抗体测定(ELISA法)结果的解读

阴性对照OD≤0.1，阳性对照OD＞0.8时实验正常，否则实验无效。计算方法：cut-off(co)值=0.12+阴性对照平均OD值s/co值=病人OD值/cut-off(co)值，s/co值大于或等于1判为阳性，s/co值小于1判为阴性注s/co值在0.5~2.0之间的灰区样本需复检确认后报告梅毒检测流程图A1(ELISA)A1+A1-A2(PRP或TRUST）A1+A2+感染：既往或现在A1+A2-A3（TP