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文档简介

第2章细胞工程

第1节植物细胞工程

第1课时植物细胞工程的基本技术

课前自主预习案

'利川川勿川川川川勿小勿川皿"勿勿川勿"川川"勿川",1=1E3•领团•随团I勿加川明川环"川卅川""川"加川"川"""川川排

知识点一植物细胞的全能性

1.概念:细胞经分裂和分化后,仍然具有

或的潜能。

2.生长发育过程中细胞没有表现全能性的原因

在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会

知识点二植物组织培养技术

1.概念:将的植物器官、组织或细胞等,培养

在上,给予适宜的培养条件,诱导其形成

________的技术。

2.全能性表达过程

(1)脱分化:让已经分化的细胞经过诱导后,失去其特有

的,转变成未分化细胞的过程。

(2)再分化:脱分化产生的,在一定的培养条件

下,再分化出,进而形成完整的小植株。

(3)激素的作用:植物激素中和是

启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。

3.菊花组织培养的操作流程

外植体的消毒:将流水冲洗后的外植体用消毒

30s,用无菌水清洗2〜3次后,再用处理30min,

用无菌水清洗2〜3次。

外植体的分割:用无菌滤纸吸去表面的水分,用解剖刀将

外植体切成〜1cm长的小段。

接种:在旁,将外植体的1/3〜1/2插入

____________的培养基中。

培养:将接种了外植体的锥形瓶或植物组织培养瓶置于

18〜22℃的中培养。定期观察和记录的生

长情况。

转移培养:将生长良好的愈伤组织转接到的培养

基上。长出芽后,再将其转接到的培养基上,进一步

诱导形成试管苗。

移栽:将试管苗移植到消过毒的上,壮苗后再移

栽入土。

知识点三植物体细胞杂交技术

1•概念

将的植物体细胞,在一定条件下融合成

,并把杂种细胞培育成的技术。

2.过程

植物细胞A植物细胞B

伏掉细胞壁j植

原生质体A。、,。原生质体B体

正在融合的原生质

体再生出______

杂种细胞(J

杂种植株

(1)去壁:用去除植物细胞壁,获得原

生质体。

(2)人工诱导原生质体融合的方法

①物理法:法、法等。

②化学法:融合法、融合法等。

3.意义

克服不同种生物的不亲和性。

1川川川I川川川川川川川川川川“川川川"出川川川川出川,E3陶•陶蒯•围同甲川川川川川川川川川I川川川川出川川川川川川川I.

判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)

1.植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的

全能性。()

2.在植物组织培养过程中,细胞的遗传物质一般都发生

改变。()

3.脱分化和再分化是植物组织培养的重要过程。()

4.在植物组织培养过程中需要给予光照,以诱导脱分化

过程。()

5.植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是细胞壁阻碍

了原生质体的融合。()

6.植物体细胞杂交过程中,细胞融合成功的标志是产生

新的细胞壁。()

7.植物体细胞杂交技术的最终目的是得到杂种细胞。

()

8.植物体细胞杂交过程中,原生质体融合的结构基础是

细胞膜的流动性。()

9.植物体细胞杂交只能在同种植物间操作。()

10.细胞工程可以通过在分子水平上的操作,获得特定的

细胞、组织、器官、个体或其产品。()

第2课时植物细胞工程的应用

课前自主预习案

峭川川川川川川川川川川川川川川川川川川“川川川"川川,1=1E3•囤包•蝎囱I勿川皿川川川川川川川川川川川“川川刖川川川川,

知识点一植物繁殖的新途径

1.快速繁殖

(1)概念:用于快速繁殖优良品种的技术,

也叫作技术。

(2)特点:①高效、快速地实现种苗的;②无性

繁殖,保持优良品种的o

2.作物脱毒

(1)选材部位:植物顶端o

(2)选材原因:植物顶端(如茎尖)的病毒极

少,甚至0

(3)实例:目前采用培养技术来脱去病毒,已在

、草莓、大蒜、甘蔗、菠萝和香蕉等许多作物上获得

成功。

知识点二作物新品种的培育

1.单倍体育种

⑴过程:(或花粉)离体培养f植株

人工诱导染色体加倍纯合二倍体植株优良品种。

(2)优点

①后代是纯合子,能O

②明显缩短了O

③进行体细胞诱变育种和研究的理想材料。

2.突变体的利用

(1)产生原因:在植物的组织培养过程中,由于培养细胞

一直处于不断增殖的状态,因此它们容易受到和

(如射线、等)的影响而。

(2)利用:从产生突变的个体中筛选出对人们有用的

,进而培育成o

知识点三细胞产物的工厂化生产

1.概念:由于植物细胞的次生代谢物含量很,

从植物组织提取会大量破坏植物资源,有些产物又不能或难以

通过化学合成途径得到,因此人们期望利用来获

得目标产物,这个过程就是细胞产物的工厂化生产。植物细胞

培养是指在离体条件下对或进行培养

使其增殖的技术。

2.次生代谢物:植物代谢产生的一些一般认为

植物基本的生命活动所必需的产物,是一类

(如酚类、菇类和含氮化合物等),在植物

、抗虫等方面发挥作用,也是很多、香料和

色素等的重要来源。

3.优点:不占用,几乎不受、天气等

的限制,因此对于社会、经济、环境保护具有重要意义。

4.实例:、、人参皂甘的生产。

勿川川川川川川川川川川川川I川川川川川川”川川川川川,E1E3,陶蒯•围同‘川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川八

判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)

1.葡萄的杆插、桃树的嫁接、石榴的压条繁殖方式都属

于微型繁殖。()

2.脱毒苗培育所选的组织培养材料可以来自植株的任何

部位。()

3.植物组织培养技术不仅可以快速、高效地实现种苗的

大量繁殖,还可以保持优良品种的遗传性状。()

4.培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是植物体细胞杂交。

()

5.作物脱毒时选材部位应为植物木质部附近的部位,因

为此处细胞内病毒极少。()

6.在植物组织培养过程中,容易获得突变体的主要原因

是培养的细胞一直处于不断增殖的状态。()

7.由于大多数单倍体植株的细胞中只含有一套染色体,

染色体加倍后得到的植株的显性性状容易显现,因此它也是进

行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料。()

8.单倍体育种和突变体培育的遗传学原理是一致的。

()

9.突变体培育通常对植物的愈伤组织进行诱变处理,而

工厂化生产的细胞产物也来自愈伤组织细胞。()

10.工厂化生产的细胞次生代谢物,其化学成分都是蛋白

质。()

11.细胞产物的工厂化生产提高了获取植物某些成分的效

率。()

12.次生代谢物是植物生命活动所必需的。()

第2节动物细胞工程

第1课时动物细胞培养

课前自主预习案

勿川川川川川川川川川川川皿川川川川川川川川川川川川,|=1E3•血包|•图|固,勿川川川川川川川川川川川川川川“川川川川川川h

知识点一概念

动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散

成,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和

________的技术。

知识点二动物细胞培养的条件

培养液和灭菌处理,

1.无菌、无毒的环境,环境下进行操作

更换,清除代谢物

2营养

僧养物质:糖类、、、维生素等

:补充培养液中尚未研究清楚的成分

温度:哺乳动物多以为宜

3.温度和pH,

pH:________

门________:细胞代谢所必需的

4.''兄|CO2:维持培养液的

知识点三动物细胞培养的过程

取动物组织

击u剪碎组织

A-----

砧I分散成单个细胞

制成细胞悬液

转入培养液中o^J------^放入__________中培养

进行--------L__________।一

贴满瓶壁的细胞用处理

转入培养

液中进行

1.悬浮生长:细胞悬浮在培养液中生长增殖。密度过大

时,由于积累和培养液中,细胞分裂

受阻。

2.细胞贴壁:多数细胞贴附在培养瓶上生长。

3.接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面时,

细胞的现象称为细胞的接触抑制。

4.原代培养:指动物组织经处理后的o

5.传代培养:分瓶后的细胞培养。传代培养时,悬浮培

养的细胞直接用法收集;贴壁生长的细胞要先用

等处理,再用法收集。

知识点四干细胞的培养及其应用

1.干细胞功能:在一定条件下,可以分化成

2.干细胞的存在:、和等多

种组织和器官中。

3.干细胞的种类

(存在:中

功能:具有分化成为成年动物体内的

胚胎干细胞

(1)<任何一种类型的细胞,并进一步

(ES细胞)

形成机体的________和_________

、甚至的潜能

(存在:成体组织或器官内的干细胞,包括骨髓

中的、神经系统中的

成体

(2)(和睾丸中的

干细胞

功能:只能分化成

不具有发育成的能力

’来源:体外诱导产生

诱导多能干细胞应用:分化形成各种功能细胞,

(3)<

(iPS细胞)用于治疗疾病

、应用优点:避免________________

'川川川川川川川川川I川川“川川川“川川川川川川川川川,屈E3,陶蒯•国同'川川I川川川川川川川川川川川川川川川川川I川川川

判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)

1.多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜pH

为~。()

2.动物细胞培养要定期更换培养液,其目的是便于清除

代谢物,防止代谢物积累对细胞自身造成伤害。()

3.动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。()

4.制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白

酶处理。()

5.培养动物细胞的第一代(即第一次细胞增殖)被称为原

代培养。()

6.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细

胞。()

第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体

课前自主预习案

'川川川川川川川川川勿川川川川川川川川川川川川川出,IE|E3•圆目•图囱阴川”川川川川川川川“川川川川川”"川川川川川出.

知识点一动物细胞融合技术

1.概念

使结合形成一个细胞的技术。

2.诱导原理和结果

(1)诱导原理:O

(2)诱导结果:形成细胞。

3.诱导方法:法、电融合法和

法等。

4.意义:突破了的局限,使

成为可能。

5.动物细胞融合技术的应用

(1)成为研究、、肿瘤和培育

生物新品种等的重要手段。

⑵用于制备O

知识点二单克隆抗体及其应用

1.制备原理

(1)B淋巴细胞的特点:一种B淋巴细胞只分泌一种特异

性抗体。

(2)骨髓瘤细胞的特点:能在体外大量o

(3)杂交瘤细胞的特点:B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得

到的杂交瘤细胞,既能又能产生大量

2.制备过程

出w,射特定的抗原蛋白

确淋巴细胞

。杂交细胞一第1次筛选:

又筛选出_______

苧杂交瘤细胞

—1*■*•*筛选一第2次筛选:

r------r\筛选出__________

I一的杂交瘤细胞

体外培养/\卡内强养

从培养液Y从小鼠腹水中提取

中提取流

单克隆抗体

3.单克隆抗体的优点

能准确地识别,与特定抗原发生特异性

结合,并且可以0

4.单克隆抗体的应用

(1)作为,具有准确、高效、简易、快速的

优点。

⑵用于和

1川川川川川出川川川川川川川川川川川川川川皿川川川,即E3,陶蒯•F3IBI小川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川I.

判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)

1.动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核的融合。

()

2.与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导

因素有聚乙二醇、灭活的病毒。()

3.用特定的抗原对小鼠进行免疫后,从小鼠脾脏中只能

得到一种B淋巴细胞。()

4.单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体。

5.单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。()

6.动物细胞融合的结果是形成单核的杂种细胞,植物体

细胞杂交的结果是得到杂种植株。()

7.杂交瘤细胞的培养可以采取体内培养和体外培养两种

方式。()

8.单克隆抗体制备过程中,需要进行多次细胞培养,如

骨髓瘤细胞的培养、不同杂交细胞的培养、杂交瘤细胞的培养

等。()

9.单克隆抗体由于特异性和导向性强而被誉为“生物导

弹”。()

第3课时动物体细胞核移植技术和克隆动物

课前自主预习案

小川川川川川川川川川川川川川川川"川川川川川川川川儿・国目・周囱w川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川儿

知识点一动物细胞核移植技术

1.概念

(1)供体:动物一个细胞的O

(2)受体:去掉细胞核的o

(3)结果:形成并发育成新胚胎,最终发育

成。

2.种类:胚胎细胞核移植和o两者中

难度较高的是o

3.原理:动物细胞核具有、细胞膜具有一定的

知识点二体细胞核移植的过程

I取供隼细胞I|卵巢卵产细胞|

细胞培养―|

I供体1胞I]去核卵母细胞|

I电融合

I重组1胞I

[发育’

I邮胚I

I代孕我物I

I与供体遗传物质的幼体]

知识点三体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题

1.应用前景

(1)畜牧生产方面:加速家畜进程,促进优

良畜群繁育。

(2)医药卫生领域

①转基因克隆动物作为,生产珍贵的

②转基因克隆动物的细胞、组织和器官可作为

____________的供体。

③人的核移植胚胎干细胞经诱导分化,形成相应的细胞、

组织、器官后,可用于的移植。

⑶了解胚胎发育及衰老过程。

(4)用克隆动物做,使人们更好地追踪研究

疾病的发展过程和治疗疾病。

(5)保护濒危物种方面:保护,增加濒危动

物的存活数量。

2.存在问题

(1)体细胞核移植技术的非常低。

(2)克隆动物存在健康问题,表现出遗传和缺陷

等。

'川川出川川川川川川川川川I川川川川川川川川川川川川mE3E3,陶蒯•围同邛川川川川川川川“川川川“川川川川川川川川川川%

判断对错(正确的打“J”,错误的打“X”)

1.动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。

()

2.体细胞核移植过程中采用Mil期卵母细胞作为受体细

胞。()

3.经动物细胞核移植技术培育出的新个体只有一个亲本

的遗传性状。()

4.动物细胞核移植技术的原理是动物细胞的全能性。

()

5.选择卵母细胞作为核移植的受体细胞的主要原因是该

细胞大,显微操作方便。()

6.克隆特定疾病模型的动物可用于疾病的研究和药物开

发。()

7.克隆动物技术成功率很高。()

第3节胚胎工程

第1课时胚胎工程的理论基础

课前自主预习案

勿川川川川川川"川/川川川川川川川川川川出川川川川川,1=1F3,同同|•随固,川"川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川h

知识点一胚胎工程

1.概念:对、或

进行多种显微操作和处理,然后将获得的胚胎移植到雌性动物

体内生产后代,以满足人类的各种需求。

2.主要技术:、和o

知识点二受精

1.概念:与结合形成(即受精

卵)的过程。

2.场所:雌性动物的内。

3.过程

知识点三胚胎早期发育

1.场所:O

2.过程

胚胎一端的细胞ff胎儿

V

的各种组织

透明带内壁扩展和排列的细胞f

囊胚:细胞

4一胎膜和胎盘

分化

胚胎内部出现了含有液体的

囊胚进一步扩大,会导致破裂,

胚胎从其中伸展出来(孵化)

原肠胚:形成f各种组织、器官

'川川川川川皿川川川I川川“川川川“川川川川川川川川川,屈E3,陶蒯•国同'川川I川川川川川川川川川川川川川川川川川I川川川

判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)

1.刚排出的精子即能与卵子受精。()

2.精子和卵子相遇结合形成受精卵的部位是子宫。()

3.精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂n,排出第二

极体,形成雌原核。()

4.囊胚期细胞还没有分化。()

5.原肠胚变大导致透明带破裂而孵化出来。()

6.卵裂期的细胞分裂方式包括有丝分裂和减数分裂。

7.卵裂期细胞的数量不断增加,胚胎总体积增大。()

8.囊胚阶段滋养层细胞将来发育成胎儿的各种组织。

第2课时胚胎工程技术及其应用

课前自主预习案

“勿〃川川卅/川勿加"卅出/〃川卅卅"卅卅小川"勿明",1=1E3•同包•图囱平川川川川川川/小勿/勿勿小川勿勿勿"削削勿勿",

知识点一体外受精

1.试管动物:通过人工操作使卵子在受精,经

培养发育为后,再进行移植产生的个体。

2.体外受精技术的主要步骤:、

____________和0

3.过程

卵巢

①______________采集精子

I培养也离—

③的卵母细胞狄丽柏十

-----、/

④---

I

⑤培养

知识点二胚胎移植

1.概念:是指将通过及其他方式得到的胚

胎,移植到、的雌性动物体内,使

之继续发育为新个体的技术。

2.胚胎移植的基本程序

选择:遗传性能和生产性能优秀的个

,,体(供体),健康、有正常繁殖能

对供、受体的

《力的个体(受体)

选择和处理

处理:处理和

处理

配种或___________

胚胎的收[收集:冲卵

集、检查、培(检查:发育到或阶段

养或保存।保存:一196℃的液氮中保存

胚胎移植

V

对受体进行妊娠检查I检查受体母牛

今蜘具有优良性状的后代

3.胚胎移植的意义

(1)充分发挥雌性优良个体的o

(2)了供体本身的繁殖周期。

(3)对供体施行处理后,增加后代数量。

知识点三胚胎分割

1.概念:采用将早期胚胎切割成

等,经移植获得同卵双胎或多胎的

技术。

2.所需主要仪器设备:和o

3.操作对象及要求:选择发育良好、形态正常的

,将它移入盛有操作液的培养皿中,在显微

镜下用或分割。在分割囊胚阶段的胚胎时,

要汪思0

4.胚胎分割的意义

(1)促进优良动物品种的繁殖,产生相同的

后代用于遗传学研究。

(2)对胚胎进行、等,

对于人工控制动物性别、动物繁育健康后代有重要意义。

‘川川川”川川川川川川I川川川川川川川川川川川川川川川,国IE3•陶腑•宿同%川川川川川川I川川川川川川川川川川川川川川川%

判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)

1.为了获得更多的卵母细胞,需用性激素对供体进行处

理。()

2.受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植。()

3.胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间进行,

因为两者生理特征相近,易于成功。()

4.胚胎移植时,供体母畜需要具备优良的遗传性能。

()

5.移植的胚胎只能来自体内受精或者体外受精直接产生

的胚胎。()

6.胚胎移植后不需再对受体进行检查。()

7.胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割。()

8.利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚

胎。()

9.胚胎分割可看作是有性生殖。()

第2章细胞工程

第1节植物细胞工程

第1课时植物细胞工程的基本技术

自主•预习•先知

知识点一

1.产生完整生物体分化成其他各种细胞

2.选择性地表达

矢口访^点[

1.着体人工配制的培养基完整植株

2.(1)结构和功能(2)愈伤组织芽、根等器官(3)生长

素细胞分裂素

3.酒精次氯酸钠溶液酒精灯火焰诱导愈伤组织

培养箱愈伤组织诱导生芽诱导生根蛭石或珍珠岩

知识点三

1.不同来源杂种细胞新植物体

2.原生质体融合细胞壁脱分化愈伤组织再分化

⑴纤维素酶和果胶酶(2)电融合离心聚乙二醇(PEG)

高Ca2+—高pH

3.远缘杂交

效果•检测•定向

1.X提示:具有某种生物全部遗传信息的细胞在离体

的情况下才能表现出全能性。

2.X提示:植物组织培养主要是通过细胞分裂和分化

实现的,遗传物质一般不会发生改变。

3.V

4.X提示:植物组织培养过程中,脱分化过程是要求

避光培养的。

5.V6.V7.X8.V9.X10.X

第2课时植物细胞工程的应用

自主•预习•先知

知识点一

1.(1)植物组织培养微型繁殖(2)大量繁殖遗传特性

2.(1)分生区附近(2)分生区附近无病毒(3)茎尖组织

马铃薯

知识点二

1.(1)花药单倍体(2)稳定遗传育种的年限遗传突

2.(1)培养条件诱变因素化学物质产生突变(2)

突变体新品种

知识点三

1.低植物细胞培养单个植物细胞细胞团

2.不是小分子有机化合物抗病药物

3.耕地季节

4.紫草宁紫杉醇

效果•检测•定向

1.X提示:题述繁殖方式属于无性繁殖,不属于微型

繁殖。微型繁殖是指用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技

术。

2.X提示:培育脱毒苗时选用的通常是茎尖等分生组

织,原因是该组织附近的病毒极少,甚至无病毒。

3.V4.X5.X6.V7.X

8.X提示:单倍体育种的原理是染色体变异和植物细

胞的全能性,突变体育种的原理是基因突变和植物细胞的全能

性。

9.V

10.X提示:次生代谢物一般不是植物基本生命活动所

必需的产物,不是蛋白质。

11.V12.X

第2节动物细胞工程

第1课时动物细胞培养

自主•预习•先知

知识点一

单个细胞增殖

知识点二

1.培养用具无菌培养液

2.氨基酸无机盐血清、血浆

3.36.5±0.5℃〜

4.02pH

知识点三

胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理原代培养CO2培养箱胰

蛋白酶传代

1.有害代谢物营养物质缺乏

2.瓶壁

3.相互接触停止分裂增殖

4.初次培养

5.离心胰蛋白酶离心

知识点四

1.其他类型的细胞

2.早期胚胎骨髓脐带血

3.(1)早期胚胎所有组织器官个体(2)造血干细胞

神经干细胞精原干细胞特定的细胞或组织完整个体

(3)体细胞免疫排斥反应

效果•检测•定向

1.X提示:多数动物细胞培养过程中其培养液所需的

适宜pH为〜。

2.V

3.X提示:动物细胞培养技术的原理是细胞增殖。

4.X提示:应该用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。

5.X提示:原代培养指动物组织经处理后的初次培养。

6.X提示:由于接触抑制所以培养瓶壁上形成的应该

是单层细胞。

第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体

自主•预习•先知

知识点一

1.两个或多个动物细胞

2.(1)细胞膜的流动性(2)杂交

3.PEG融合灭活病毒诱导

4.有性杂交远缘杂交

5.(1)细胞遗传细胞免疫(2)单克隆抗体

知识点二

1.(2)增殖(3)无限增殖特定抗体

2.骨髓瘤杂交瘤细胞产生所需抗体

3.抗原的细微差异

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