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文档简介
第2章细胞工程
第1节植物细胞工程
第1课时植物细胞工程的基本技术
课前自主预习案
'利川川勿川川川川勿小勿川皿"勿勿川勿"川川"勿川",1=1E3•领团•随团I勿加川明川环"川卅川""川"加川"川"""川川排
知识点一植物细胞的全能性
1.概念:细胞经分裂和分化后,仍然具有
或的潜能。
2.生长发育过程中细胞没有表现全能性的原因
在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会
知识点二植物组织培养技术
1.概念:将的植物器官、组织或细胞等,培养
在上,给予适宜的培养条件,诱导其形成
________的技术。
2.全能性表达过程
(1)脱分化:让已经分化的细胞经过诱导后,失去其特有
的,转变成未分化细胞的过程。
(2)再分化:脱分化产生的,在一定的培养条件
下,再分化出,进而形成完整的小植株。
(3)激素的作用:植物激素中和是
启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。
3.菊花组织培养的操作流程
外植体的消毒:将流水冲洗后的外植体用消毒
30s,用无菌水清洗2〜3次后,再用处理30min,
用无菌水清洗2〜3次。
外植体的分割:用无菌滤纸吸去表面的水分,用解剖刀将
外植体切成〜1cm长的小段。
接种:在旁,将外植体的1/3〜1/2插入
____________的培养基中。
培养:将接种了外植体的锥形瓶或植物组织培养瓶置于
18〜22℃的中培养。定期观察和记录的生
长情况。
转移培养:将生长良好的愈伤组织转接到的培养
基上。长出芽后,再将其转接到的培养基上,进一步
诱导形成试管苗。
移栽:将试管苗移植到消过毒的上,壮苗后再移
栽入土。
知识点三植物体细胞杂交技术
1•概念
将的植物体细胞,在一定条件下融合成
,并把杂种细胞培育成的技术。
2.过程
植物细胞A植物细胞B
伏掉细胞壁j植
物
原生质体A。、,。原生质体B体
细
胞
融
合
正在融合的原生质
体再生出______
杂种细胞(J
植
物
组
织
培
养
杂种植株
(1)去壁:用去除植物细胞壁,获得原
生质体。
(2)人工诱导原生质体融合的方法
①物理法:法、法等。
②化学法:融合法、融合法等。
3.意义
克服不同种生物的不亲和性。
1川川川I川川川川川川川川川川“川川川"出川川川川出川,E3陶•陶蒯•围同甲川川川川川川川川川I川川川川出川川川川川川川I.
判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)
1.植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的
全能性。()
2.在植物组织培养过程中,细胞的遗传物质一般都发生
改变。()
3.脱分化和再分化是植物组织培养的重要过程。()
4.在植物组织培养过程中需要给予光照,以诱导脱分化
过程。()
5.植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是细胞壁阻碍
了原生质体的融合。()
6.植物体细胞杂交过程中,细胞融合成功的标志是产生
新的细胞壁。()
7.植物体细胞杂交技术的最终目的是得到杂种细胞。
()
8.植物体细胞杂交过程中,原生质体融合的结构基础是
细胞膜的流动性。()
9.植物体细胞杂交只能在同种植物间操作。()
10.细胞工程可以通过在分子水平上的操作,获得特定的
细胞、组织、器官、个体或其产品。()
第2课时植物细胞工程的应用
课前自主预习案
峭川川川川川川川川川川川川川川川川川川“川川川"川川,1=1E3•囤包•蝎囱I勿川皿川川川川川川川川川川川“川川刖川川川川,
知识点一植物繁殖的新途径
1.快速繁殖
(1)概念:用于快速繁殖优良品种的技术,
也叫作技术。
(2)特点:①高效、快速地实现种苗的;②无性
繁殖,保持优良品种的o
2.作物脱毒
(1)选材部位:植物顶端o
(2)选材原因:植物顶端(如茎尖)的病毒极
少,甚至0
(3)实例:目前采用培养技术来脱去病毒,已在
、草莓、大蒜、甘蔗、菠萝和香蕉等许多作物上获得
成功。
知识点二作物新品种的培育
1.单倍体育种
⑴过程:(或花粉)离体培养f植株
人工诱导染色体加倍纯合二倍体植株优良品种。
(2)优点
①后代是纯合子,能O
②明显缩短了O
③进行体细胞诱变育种和研究的理想材料。
2.突变体的利用
(1)产生原因:在植物的组织培养过程中,由于培养细胞
一直处于不断增殖的状态,因此它们容易受到和
(如射线、等)的影响而。
(2)利用:从产生突变的个体中筛选出对人们有用的
,进而培育成o
知识点三细胞产物的工厂化生产
1.概念:由于植物细胞的次生代谢物含量很,
从植物组织提取会大量破坏植物资源,有些产物又不能或难以
通过化学合成途径得到,因此人们期望利用来获
得目标产物,这个过程就是细胞产物的工厂化生产。植物细胞
培养是指在离体条件下对或进行培养
使其增殖的技术。
2.次生代谢物:植物代谢产生的一些一般认为
植物基本的生命活动所必需的产物,是一类
(如酚类、菇类和含氮化合物等),在植物
、抗虫等方面发挥作用,也是很多、香料和
色素等的重要来源。
3.优点:不占用,几乎不受、天气等
的限制,因此对于社会、经济、环境保护具有重要意义。
4.实例:、、人参皂甘的生产。
勿川川川川川川川川川川川川I川川川川川川”川川川川川,E1E3,陶蒯•围同‘川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川八
判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)
1.葡萄的杆插、桃树的嫁接、石榴的压条繁殖方式都属
于微型繁殖。()
2.脱毒苗培育所选的组织培养材料可以来自植株的任何
部位。()
3.植物组织培养技术不仅可以快速、高效地实现种苗的
大量繁殖,还可以保持优良品种的遗传性状。()
4.培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是植物体细胞杂交。
()
5.作物脱毒时选材部位应为植物木质部附近的部位,因
为此处细胞内病毒极少。()
6.在植物组织培养过程中,容易获得突变体的主要原因
是培养的细胞一直处于不断增殖的状态。()
7.由于大多数单倍体植株的细胞中只含有一套染色体,
染色体加倍后得到的植株的显性性状容易显现,因此它也是进
行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料。()
8.单倍体育种和突变体培育的遗传学原理是一致的。
()
9.突变体培育通常对植物的愈伤组织进行诱变处理,而
工厂化生产的细胞产物也来自愈伤组织细胞。()
10.工厂化生产的细胞次生代谢物,其化学成分都是蛋白
质。()
11.细胞产物的工厂化生产提高了获取植物某些成分的效
率。()
12.次生代谢物是植物生命活动所必需的。()
第2节动物细胞工程
第1课时动物细胞培养
课前自主预习案
勿川川川川川川川川川川川皿川川川川川川川川川川川川,|=1E3•血包|•图|固,勿川川川川川川川川川川川川川川“川川川川川川h
知识点一概念
动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散
成,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和
________的技术。
知识点二动物细胞培养的条件
培养液和灭菌处理,
1.无菌、无毒的环境,环境下进行操作
更换,清除代谢物
2营养
僧养物质:糖类、、、维生素等
:补充培养液中尚未研究清楚的成分
温度:哺乳动物多以为宜
3.温度和pH,
pH:________
门________:细胞代谢所必需的
4.''兄|CO2:维持培养液的
知识点三动物细胞培养的过程
取动物组织
击u剪碎组织
A-----
砧I分散成单个细胞
制成细胞悬液
转入培养液中o^J------^放入__________中培养
进行--------L__________।一
贴满瓶壁的细胞用处理
转入培养
液中进行
1.悬浮生长:细胞悬浮在培养液中生长增殖。密度过大
时,由于积累和培养液中,细胞分裂
受阻。
2.细胞贴壁:多数细胞贴附在培养瓶上生长。
3.接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面时,
细胞的现象称为细胞的接触抑制。
4.原代培养:指动物组织经处理后的o
5.传代培养:分瓶后的细胞培养。传代培养时,悬浮培
养的细胞直接用法收集;贴壁生长的细胞要先用
等处理,再用法收集。
知识点四干细胞的培养及其应用
1.干细胞功能:在一定条件下,可以分化成
2.干细胞的存在:、和等多
种组织和器官中。
3.干细胞的种类
(存在:中
功能:具有分化成为成年动物体内的
胚胎干细胞
(1)<任何一种类型的细胞,并进一步
(ES细胞)
形成机体的________和_________
、甚至的潜能
(存在:成体组织或器官内的干细胞,包括骨髓
中的、神经系统中的
成体
(2)(和睾丸中的
干细胞
功能:只能分化成
不具有发育成的能力
’来源:体外诱导产生
诱导多能干细胞应用:分化形成各种功能细胞,
(3)<
(iPS细胞)用于治疗疾病
、应用优点:避免________________
'川川川川川川川川川I川川“川川川“川川川川川川川川川,屈E3,陶蒯•国同'川川I川川川川川川川川川川川川川川川川川I川川川
判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)
1.多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜pH
为~。()
2.动物细胞培养要定期更换培养液,其目的是便于清除
代谢物,防止代谢物积累对细胞自身造成伤害。()
3.动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。()
4.制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白
酶处理。()
5.培养动物细胞的第一代(即第一次细胞增殖)被称为原
代培养。()
6.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细
胞。()
第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体
课前自主预习案
'川川川川川川川川川勿川川川川川川川川川川川川川出,IE|E3•圆目•图囱阴川”川川川川川川川“川川川川川”"川川川川川出.
知识点一动物细胞融合技术
1.概念
使结合形成一个细胞的技术。
2.诱导原理和结果
(1)诱导原理:O
(2)诱导结果:形成细胞。
3.诱导方法:法、电融合法和
法等。
4.意义:突破了的局限,使
成为可能。
5.动物细胞融合技术的应用
(1)成为研究、、肿瘤和培育
生物新品种等的重要手段。
⑵用于制备O
知识点二单克隆抗体及其应用
1.制备原理
(1)B淋巴细胞的特点:一种B淋巴细胞只分泌一种特异
性抗体。
(2)骨髓瘤细胞的特点:能在体外大量o
(3)杂交瘤细胞的特点:B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得
到的杂交瘤细胞,既能又能产生大量
2.制备过程
出w,射特定的抗原蛋白
确淋巴细胞
。杂交细胞一第1次筛选:
又筛选出_______
苧杂交瘤细胞
—1*■*•*筛选一第2次筛选:
r------r\筛选出__________
I一的杂交瘤细胞
体外培养/\卡内强养
从培养液Y从小鼠腹水中提取
中提取流
单克隆抗体
3.单克隆抗体的优点
能准确地识别,与特定抗原发生特异性
结合,并且可以0
4.单克隆抗体的应用
(1)作为,具有准确、高效、简易、快速的
优点。
⑵用于和
1川川川川川出川川川川川川川川川川川川川川皿川川川,即E3,陶蒯•F3IBI小川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川I.
判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)
1.动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核的融合。
()
2.与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导
因素有聚乙二醇、灭活的病毒。()
3.用特定的抗原对小鼠进行免疫后,从小鼠脾脏中只能
得到一种B淋巴细胞。()
4.单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体。
5.单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。()
6.动物细胞融合的结果是形成单核的杂种细胞,植物体
细胞杂交的结果是得到杂种植株。()
7.杂交瘤细胞的培养可以采取体内培养和体外培养两种
方式。()
8.单克隆抗体制备过程中,需要进行多次细胞培养,如
骨髓瘤细胞的培养、不同杂交细胞的培养、杂交瘤细胞的培养
等。()
9.单克隆抗体由于特异性和导向性强而被誉为“生物导
弹”。()
第3课时动物体细胞核移植技术和克隆动物
课前自主预习案
小川川川川川川川川川川川川川川川"川川川川川川川川儿・国目・周囱w川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川儿
知识点一动物细胞核移植技术
1.概念
(1)供体:动物一个细胞的O
(2)受体:去掉细胞核的o
(3)结果:形成并发育成新胚胎,最终发育
成。
2.种类:胚胎细胞核移植和o两者中
难度较高的是o
3.原理:动物细胞核具有、细胞膜具有一定的
知识点二体细胞核移植的过程
I取供隼细胞I|卵巢卵产细胞|
细胞培养―|
I供体1胞I]去核卵母细胞|
I电融合
I重组1胞I
[发育’
I邮胚I
I代孕我物I
I与供体遗传物质的幼体]
知识点三体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题
1.应用前景
(1)畜牧生产方面:加速家畜进程,促进优
良畜群繁育。
(2)医药卫生领域
①转基因克隆动物作为,生产珍贵的
②转基因克隆动物的细胞、组织和器官可作为
____________的供体。
③人的核移植胚胎干细胞经诱导分化,形成相应的细胞、
组织、器官后,可用于的移植。
⑶了解胚胎发育及衰老过程。
(4)用克隆动物做,使人们更好地追踪研究
疾病的发展过程和治疗疾病。
(5)保护濒危物种方面:保护,增加濒危动
物的存活数量。
2.存在问题
(1)体细胞核移植技术的非常低。
(2)克隆动物存在健康问题,表现出遗传和缺陷
等。
'川川出川川川川川川川川川I川川川川川川川川川川川川mE3E3,陶蒯•围同邛川川川川川川川“川川川“川川川川川川川川川川%
判断对错(正确的打“J”,错误的打“X”)
1.动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。
()
2.体细胞核移植过程中采用Mil期卵母细胞作为受体细
胞。()
3.经动物细胞核移植技术培育出的新个体只有一个亲本
的遗传性状。()
4.动物细胞核移植技术的原理是动物细胞的全能性。
()
5.选择卵母细胞作为核移植的受体细胞的主要原因是该
细胞大,显微操作方便。()
6.克隆特定疾病模型的动物可用于疾病的研究和药物开
发。()
7.克隆动物技术成功率很高。()
第3节胚胎工程
第1课时胚胎工程的理论基础
课前自主预习案
勿川川川川川川"川/川川川川川川川川川川出川川川川川,1=1F3,同同|•随固,川"川川川川川川川川川川川川川川川川川川川川h
知识点一胚胎工程
1.概念:对、或
进行多种显微操作和处理,然后将获得的胚胎移植到雌性动物
体内生产后代,以满足人类的各种需求。
2.主要技术:、和o
知识点二受精
1.概念:与结合形成(即受精
卵)的过程。
2.场所:雌性动物的内。
3.过程
知识点三胚胎早期发育
1.场所:O
2.过程
胚胎一端的细胞ff胎儿
V
的各种组织
透明带内壁扩展和排列的细胞f
囊胚:细胞
4一胎膜和胎盘
分化
胚胎内部出现了含有液体的
囊胚进一步扩大,会导致破裂,
胚胎从其中伸展出来(孵化)
原肠胚:形成f各种组织、器官
'川川川川川皿川川川I川川“川川川“川川川川川川川川川,屈E3,陶蒯•国同'川川I川川川川川川川川川川川川川川川川川I川川川
判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)
1.刚排出的精子即能与卵子受精。()
2.精子和卵子相遇结合形成受精卵的部位是子宫。()
3.精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂n,排出第二
极体,形成雌原核。()
4.囊胚期细胞还没有分化。()
5.原肠胚变大导致透明带破裂而孵化出来。()
6.卵裂期的细胞分裂方式包括有丝分裂和减数分裂。
7.卵裂期细胞的数量不断增加,胚胎总体积增大。()
8.囊胚阶段滋养层细胞将来发育成胎儿的各种组织。
)
第2课时胚胎工程技术及其应用
课前自主预习案
“勿〃川川卅/川勿加"卅出/〃川卅卅"卅卅小川"勿明",1=1E3•同包•图囱平川川川川川川/小勿/勿勿小川勿勿勿"削削勿勿",
知识点一体外受精
1.试管动物:通过人工操作使卵子在受精,经
培养发育为后,再进行移植产生的个体。
2.体外受精技术的主要步骤:、
____________和0
3.过程
卵巢
①______________采集精子
I培养也离—
③的卵母细胞狄丽柏十
-----、/
④---
I
⑤培养
知识点二胚胎移植
1.概念:是指将通过及其他方式得到的胚
胎,移植到、的雌性动物体内,使
之继续发育为新个体的技术。
2.胚胎移植的基本程序
选择:遗传性能和生产性能优秀的个
,,体(供体),健康、有正常繁殖能
对供、受体的
《力的个体(受体)
选择和处理
处理:处理和
处理
配种或___________
胚胎的收[收集:冲卵
集、检查、培(检查:发育到或阶段
养或保存।保存:一196℃的液氮中保存
胚胎移植
V
对受体进行妊娠检查I检查受体母牛
今蜘具有优良性状的后代
3.胚胎移植的意义
(1)充分发挥雌性优良个体的o
(2)了供体本身的繁殖周期。
(3)对供体施行处理后,增加后代数量。
知识点三胚胎分割
1.概念:采用将早期胚胎切割成
等,经移植获得同卵双胎或多胎的
技术。
2.所需主要仪器设备:和o
3.操作对象及要求:选择发育良好、形态正常的
,将它移入盛有操作液的培养皿中,在显微
镜下用或分割。在分割囊胚阶段的胚胎时,
要汪思0
4.胚胎分割的意义
(1)促进优良动物品种的繁殖,产生相同的
后代用于遗传学研究。
(2)对胚胎进行、等,
对于人工控制动物性别、动物繁育健康后代有重要意义。
‘川川川”川川川川川川I川川川川川川川川川川川川川川川,国IE3•陶腑•宿同%川川川川川川I川川川川川川川川川川川川川川川%
判断对错(正确的打“J”,错误的打“x”)
1.为了获得更多的卵母细胞,需用性激素对供体进行处
理。()
2.受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植。()
3.胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间进行,
因为两者生理特征相近,易于成功。()
4.胚胎移植时,供体母畜需要具备优良的遗传性能。
()
5.移植的胚胎只能来自体内受精或者体外受精直接产生
的胚胎。()
6.胚胎移植后不需再对受体进行检查。()
7.胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割。()
8.利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚
胎。()
9.胚胎分割可看作是有性生殖。()
第2章细胞工程
第1节植物细胞工程
第1课时植物细胞工程的基本技术
自主•预习•先知
知识点一
1.产生完整生物体分化成其他各种细胞
2.选择性地表达
矢口访^点[
1.着体人工配制的培养基完整植株
2.(1)结构和功能(2)愈伤组织芽、根等器官(3)生长
素细胞分裂素
3.酒精次氯酸钠溶液酒精灯火焰诱导愈伤组织
培养箱愈伤组织诱导生芽诱导生根蛭石或珍珠岩
知识点三
1.不同来源杂种细胞新植物体
2.原生质体融合细胞壁脱分化愈伤组织再分化
⑴纤维素酶和果胶酶(2)电融合离心聚乙二醇(PEG)
高Ca2+—高pH
3.远缘杂交
效果•检测•定向
1.X提示:具有某种生物全部遗传信息的细胞在离体
的情况下才能表现出全能性。
2.X提示:植物组织培养主要是通过细胞分裂和分化
实现的,遗传物质一般不会发生改变。
3.V
4.X提示:植物组织培养过程中,脱分化过程是要求
避光培养的。
5.V6.V7.X8.V9.X10.X
第2课时植物细胞工程的应用
自主•预习•先知
知识点一
1.(1)植物组织培养微型繁殖(2)大量繁殖遗传特性
2.(1)分生区附近(2)分生区附近无病毒(3)茎尖组织
马铃薯
知识点二
1.(1)花药单倍体(2)稳定遗传育种的年限遗传突
变
2.(1)培养条件诱变因素化学物质产生突变(2)
突变体新品种
知识点三
1.低植物细胞培养单个植物细胞细胞团
2.不是小分子有机化合物抗病药物
3.耕地季节
4.紫草宁紫杉醇
效果•检测•定向
1.X提示:题述繁殖方式属于无性繁殖,不属于微型
繁殖。微型繁殖是指用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技
术。
2.X提示:培育脱毒苗时选用的通常是茎尖等分生组
织,原因是该组织附近的病毒极少,甚至无病毒。
3.V4.X5.X6.V7.X
8.X提示:单倍体育种的原理是染色体变异和植物细
胞的全能性,突变体育种的原理是基因突变和植物细胞的全能
性。
9.V
10.X提示:次生代谢物一般不是植物基本生命活动所
必需的产物,不是蛋白质。
11.V12.X
第2节动物细胞工程
第1课时动物细胞培养
自主•预习•先知
知识点一
单个细胞增殖
知识点二
1.培养用具无菌培养液
2.氨基酸无机盐血清、血浆
3.36.5±0.5℃〜
4.02pH
知识点三
胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理原代培养CO2培养箱胰
蛋白酶传代
1.有害代谢物营养物质缺乏
2.瓶壁
3.相互接触停止分裂增殖
4.初次培养
5.离心胰蛋白酶离心
知识点四
1.其他类型的细胞
2.早期胚胎骨髓脐带血
3.(1)早期胚胎所有组织器官个体(2)造血干细胞
神经干细胞精原干细胞特定的细胞或组织完整个体
(3)体细胞免疫排斥反应
效果•检测•定向
1.X提示:多数动物细胞培养过程中其培养液所需的
适宜pH为〜。
2.V
3.X提示:动物细胞培养技术的原理是细胞增殖。
4.X提示:应该用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。
5.X提示:原代培养指动物组织经处理后的初次培养。
6.X提示:由于接触抑制所以培养瓶壁上形成的应该
是单层细胞。
第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体
自主•预习•先知
知识点一
1.两个或多个动物细胞
2.(1)细胞膜的流动性(2)杂交
3.PEG融合灭活病毒诱导
4.有性杂交远缘杂交
5.(1)细胞遗传细胞免疫(2)单克隆抗体
知识点二
1.(2)增殖(3)无限增殖特定抗体
2.骨髓瘤杂交瘤细胞产生所需抗体
3.抗原的细微差异
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