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32范Part9:Emergencydet:)在提交反馈意见时,请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。1传染病突发公共卫生事件应急处置技术规范第9部分:应急检测流程WS233—2017病原微生物实验室生物安全通用准则指突然发生,造成或者可能造成社会公众健2脑炎脑膜炎症候群传染病突发公共卫生事件Encephalitismeningitidissyndromeinfectiousdiseasesandpublic4缩略语RT-PCR:Realtime-polymerasechainreaction,实时6发热呼吸道症候群传染病突发公共卫生事件应急检A群乙型溶血性链球菌、百日咳鲍特菌、流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体、隐球菌、曲霉菌和肺孢子菌等。等核酸检测技术确定是否可检测到上述目标细菌的特异性6.1.3.1全血标本在采样时置入血培养瓶,对接种后的血培养物进行培养,阳性血培养物进行固体培养基分离纯化,并进行革兰氏染色以便后续进一步鉴定。对血培养物阴性盲传一6.1.3.2痰液、鼻咽抽提物、支气管肺泡灌洗液、胸腔穿刺液标本经预处理后,均接种到血琼脂培养6.1.3.3不推荐常规使用咽拭子进行细菌培6.1.4.1细菌形态鉴定。在选择性培养基上,观察6.1.4.2生化鉴定。对于分离到的细菌,使用全自动细菌生化鉴定仪、商品化细菌生化鉴定试剂进行6.1.4.3质谱鉴定。对于分离到的纯培养物,使用36.1.4.4核酸鉴定。对于分离到的细菌,提取菌株DNA,使用普通或荧等试验,检测血液标本中特异性抗体。对尿液标本,开展支病毒、副流感病毒、偏肺病毒、其它人感染冠状病毒、博卡病毒和鼻病毒守区的特异性片段或者变异区片段靶序列进在多病原核酸检测均为阴性时,宜提取核酸进行宏基因组测7发热伴出疹症候群传染病突发公共卫生事件应急4等核酸检测技术确定是否可检测到上述目标细菌的特异性非血液标本来源的A群乙型溶血性链球菌、伤寒沙门菌、副伤寒沙门菌的分离可直接分离培养。一从选择性培养基上挑取5个可疑菌落,进行初步的生化反应进行鉴定;然后选择符合生化特征的菌对于分离到的细菌,提取菌株DNA,使用普通或荧光定量PCR进行基于种属的基测试剂、经过验证的引物探针或基因测序对菌株毒力基因进病毒、风疹病毒、肠道病毒(EV-A71、CV-A16、CV-A6和CV-A10)、水痘-带状疱疹病毒、人类小DNA病毒B19、EB病毒,人疱疹病毒6型和埃5定是否可检测到上述病毒特异性核酸序列,若若有相关流行病学史,可采集发病7天内的血样,用胶体金或ELISA检测登革NS1抗原,若有检出可在多病原核酸检测均为阴性时,宜提取核酸进行宏基因组测7.5发热伴出疹症候群传染病突发公共卫8发热伴出血症候群传染病突发公共卫生事件应急检测流程不限于鼠疫耶尔森菌、脑膜炎奈瑟菌、钩端螺旋体、猪链球菌、立克次体等核酸检测技术确定是否可检测到上述目标细菌等特异性针对不同细菌采用不同培养基和分离程序,得到细菌纯培鉴定方法包括镜检、生化鉴定、质谱鉴定、血清分型、噬菌体鉴定和基于种属的核酸检测的目标病毒包括流行性出血热(汉坦病毒)、登革病毒、克里米亚-刚果出血热病毒、大别班达病6定是否可检测到上述病毒特异性核酸序列,若若有相关流行病学史,可采集发病7天内的血样,用胶体金或ELISA检测登革NS1抗原,若有检出可在多病原核酸检测均为阴性时,宜提取核酸进行宏基因组测8.5发热伴出血症候群传染病突发公共卫生9腹泻症候群传染病突发公共事件应急检测流程9.1细菌学检测流程9.1.1检测标本和目标细菌9.1.2多病原核酸检测等核酸检测技术确定是否可检测到上述目标细菌的特异性9.1.3分离培养9.1.4细菌鉴定9.1.4.1菌落形态鉴定9.1.4.2生化鉴定7从选择性培养基上挑取5个可疑菌落,进行初步的生化反应进行鉴定;然后选择符合生化特征的菌9.1.4.3质谱鉴定9.1.4.4核酸鉴定化细菌毒力基因检测试剂、经过验证的引物探9.1.5血清分型希菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、志贺菌、小肠结肠炎耶尔森菌等均需进行血清分型。9.2病毒学检测流程9.2.1检测标本和目标病毒9.2.2病毒多病原核酸检测守区的特异性片段或者变异区片段靶序列进9.2.3病毒抗原检测用方法包括免疫层析、酶免疫测定、荧光免疫测定、放9.3阴性标本的检测策略在多病原核酸检测均为阴性时,宜提取核酸进行宏基因组测9.4检测结果报告9.5腹泻症候群传染病突发公共卫生事件应急检测流8可置于室温环境(15~30℃),如怀疑脑膜炎奈瑟菌需置于(25~35℃),勿放冰箱。等核酸检测技术确定是否可检测到上述目标细菌的特异性守区的特异性片段或者变异区片段靶序列进在多病原核酸检测均为阴性时,宜提取核酸进行宏基因组测9发

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